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1、第23卷第4期无锡轻工大学学报Vol.23No.42004年7月JournalofWuxiUniversityofLightIndustryJul.2004文章编号:10092038X(2004)0420010203ELISA法检测红曲中的黄曲霉毒素B111122龚燕, 蔡建荣, 赵晓联 黄国水, 孙开禧(1.江苏省微生物研究所,江苏无锡214063;2.福建省连江县卫生防疫站,福建连江350500)摘 要:探讨了红曲中黄曲霉毒素B1的提取方法,发现在传统提取方法甲醇/水溶液(体积比1∶1)直接提取的基础上加氯仿进行液液萃取后,进行ELISA法测定其含量,可以消除假阳性,同时提高了检
2、测灵敏度.在加标质量分数分别为2.5,5,10μg/kg时,加标回收率达到101%～146.8%,方法的重复性较好,变异系数小于13%,样品最低检测限达2.5μg/kg.关键词:红曲;提取方法;ELISA;黄曲霉毒素B1中图分类号:TS201.6文献标识码:ADeterminationofAflatoxinB1inRedLeavenbyELISA11122GONGYan,CAIJian2rong,ZHAOXiao2lian,HUANGGuo2shui,SUNKai2xi(1.JiangsuInstituteofMicrobiology,Wuxi214063,China;2.Healt
3、handEpidemicPreventionStationofLiangjiangCity,Liangjiang350500,China)Abstract:TheextractionmethodofaflatoxinB1inredleavenwasstudiedinthispaper.Theresultsshowedthat10mLmethanolandwatersolutionoftotal25mLextractextractedbychloroformcaneliminatenegativeerrorandimprovethedetectionsensitivity.Therec
4、overiesofaflatoxinwhenB1spikedat2.5～10μg/kgcouldbeattherangeof101%～146.8%andtherelativedeviationislessthan13%.Thedetectionlowlimitwas2.5μg/kg.Keywords:redleaven;extractionmethod;ELISA;AFB1[1,2] 红曲又称红曲米,分布于我国福建、浙江、霉(Monascus)发酵制成的.如果在红曲生产过程中广州、江苏、台湾等省,其中福建省是我国红曲的主原料发生霉变污染了黄曲霉素B1,那么红曲米中存要产地,以古田红
5、曲最为著名.由于红曲味甘、性在的AFB1会直接危害人们的身体健康.为此,作者温、无毒,是一种天然红曲色素和功能性食品的原[3]探讨了红曲中AFB1的提取方法,并用ELISA法料,具有医疗保健功能和抗菌防腐作用等,因此它检测其含量.在酿造、中药、食品、烹饪等领域的应用越来越广1 材料与方法泛.随着人们健康意识的提高,红曲的食用安全性已成为关注的内容,而红曲中黄曲霉毒素(AFB1)也1.1 主要仪器与设备成为备受重视的检测项目之一.传统红曲的生产是酶标仪:MK3,芬兰雷勃公司制造;微量振荡以大米为原料,经过浸米、蒸饭、冷却后,接种红曲器:MS2型,德国IKA制造;微量移液器:芬兰雷勃收稿
6、日期:2003210223;修回日期:2003212206. 基金项目:科技部农业成果转化资金项目(02EFN213)资助课题.作者简介:龚燕(19742),女,江苏无锡人,助理研究员,工学学士. 第4期龚燕等:ELISA法检测红曲中的黄曲霉毒素B111公司制造;恒温水浴锅:HH2S金坛国盛实验仪器厂正因素(1).制造;分析天平:AB2042S型,量程10mg～210g,根据计算将该溶液配制成10μg/mL标准溶梅特勒·托利多公司制造;隔水式电热恒温培养箱:液,检测时用甲醇/PBS溶液将该标准溶液稀释至上海跃进医疗器械厂制造;其它:三角瓶(100mL),所需的标准工作液质量分数(0
7、.1,0.5,1,5,10分液漏斗(125mL),蒸发皿(50mL),移液管(25μg/kg).mL),刻度试管(10mL),定量滤纸.1.5ELISA法检测步骤1.2 试剂从冰箱中取出黄曲霉毒素B1的ELISA快速测黄曲霉毒素B1ELISA快速测试盒:无锡市生物试盒,平衡至室温.用1.5mL酶标抗原稀释液(D技术公司研制;甲醇:分析纯,上海化学试剂公司生试剂)稀释冻干酶标抗原(C试剂),制成实验用酶产;三氯甲烷:分析纯,天津市博迪化工有限公司生标抗原溶液
