2012分子生物学复习题目

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1、分子生物学考试的题型：1、名词解释2、判断题3、选择题4、问答题分子生物学复习题　暂停信号：DNA模板中4种碱基对RNApol都是同等的，但当RNApol遇到特殊序列时，转录的速度会突然出现变化，可少于0.1bp/s，这段序列称为暂停信号。　摆动假说　回环模型：DNA双链是同时进行复制的，在复制叉处后滞链模板形成一个环，以适应双链同时进行复制。问答题：1.核酸的分子杂交一般有几种类型？它们分别检测哪些物质i.溶液杂交（检测DNA）ii.滤膜杂交：Southern印迹法（DNA）；Northern印迹法（检测RNA（主要是mRNA）的方法）；Western印迹法（检测蛋白质）；2.检

2、测核酸变性的定性和定量方法是什么？具体参数如何？紫外吸收光谱变化是检测DNA变性最简单的定性和定量方法。核酸在260nm具有特征的吸收峰，表示为A260nm，吸收紫外光的量取决于核酸的分子结构，结构越有序，吸收的光越少。游离核苷酸比单链RNA和DNA吸收更多的光，而单链RNA或DNA的吸收又比双链DNA多，以50ug/mlDNA溶液在260nm下测定，三者的A260nm数值为：双链DNAA260nm=1.00；单链DNAA260nm=1.37；游离碱基和核苷酸的A260nm=1.60。3.什么是C值矛盾，C值矛盾具体表现在哪些方面。（10分）P75,5真核生物中DNA含量并不与生物

3、的复杂性相一致，这种反常现象称为C值矛盾。C值矛盾表现在：①C值不随生物的进化程度和复杂性而增加；②关系密切的生物C值相差很大；③真核生物的C值之大，远远超过其基因编码所需。1.什么是基因组？试比较原核生物和真核生物基因组的特点。基因组：指导一个物种的结构与功能的所有遗传信息的总和。原核生物基因组的特点:①不具备明显的核结构，只有类核，即DNA相对集中的区域。②基因组小，一般只有一个染色体，大多为双链环状，少数为单链或线型。③染色体DNA并不与蛋白质固定地结合，不具核小体结构。④结构简练，重复序列和非编码序列很少，体现经济原则。⑤功能密切相关的基因构成转录单元，并常转录成含多基因信

4、息的mRNA分子，称为多顺反子mRNA。⑥有重叠基因真核生物基因组的特点①结构复杂、基因数庞大。②有若干个染色体，一般不呈环状，DNA与蛋白质紧密结合形成染色体，具多个复制起始点。③存在核膜，DNA的转录和翻译存在时空差异。④有很多不编码序列(内含子，内元）或介入序列。⑤有大量的重复序列。⑥功能上密切相关的基因集中程度不如原核生物高，大多分散在不同的染色体上，但有许多基因家族和假基因存在。⑦有细胞器基因，如chlDNA，mitDNA，其密码子有特异性。2.摘要叙述真核生物DNA序列的几种类型。（1）单一拷贝序列绝大多数编码蛋白质的基因都是单一拷贝的序列。（2）低度重复序列在一个基因

5、组中一般为2~10个拷贝数，常常是一些编码蛋白质的基因。如珠蛋白基因。（3）中度重复序列重复数十至数十万个拷贝，重复程度和长度相差很大，分散而不是集中重复存在于基因组内。主要是Alu家族，Kpn家族等序列。（4）高度重复序列重复次数上万至数百万次，主要指卫星DNA。3.试比较原核生物和真核生物基因转录的差异。书本P139或作业P174.DNA聚合酶II和聚合酶III在促使DNA合成的基本功能上有什么异同点？书本P85DNA聚合酶II和聚合酶III在促使DNA合成的基本功能与聚合酶I相似，①都需要模版指导，以4种脱氧核糖核苷三磷酸作为底物，且需要有3＇—OH引物链存在，聚合反应按5＇

6、→3＇方向进行；②都具有3＇→5＇外切酶活性，在聚合过程中起校对作用，但都无5＇→3＇外切酶活性；③都是多亚基酶，polII和polIII共用了许多亚基，也有些细微的区别。polII和polIII在聚合速度（240015000~60000）、持续合成能力（1500>=500000)方面差异较大。总之polII是主要的修复酶，而polIII是主要的复制酶。1.DNA聚合酶III具有哪3个复制特点从而使其成为DNA复制主要的酶？高的保真性、协同性和持续性。这三个特点使得DNA聚合酶III成为DNA复制的主要的酶。2.以大肠杆菌为例，说明DNA复制起始过程。书本P89形成起始复合体；形成

7、开放复合体；形成预引发复合体；引发合成短RNA引物。即：1、DnaA结合到OriC右侧的4个9bp共同序列上，2、20-40个DnaA单体蛋白结合成一个核心。3、DnaA蛋白作用于OriC左侧的3个13bp重复序列上，DNA融化解链，形成开放复合物。4、DnaB和DnaC以聚集体的形式与开放复合物偶联，形成一个复合物。5、每个DnaB六聚体结合6个DnaC单体，产生的蛋白聚集体为480KD，直径6nm球状体。6、旋转酶使解旋产生的正超恢复为负超，SSB使产生的单链保持