黄芩苷保护胚胎心血管发育的机制研究

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1、暨南大学硕士学位论文题名（中英对照）：黄芩苷保护胚胎心血管发育的机制研究Baicalinadministrationattenuateshyperglycemia-inducedmalformationofcardiovascularsystem作者姓名：梁健欣指导教师姓名王广及学位、职称：博士、副教授指导教师姓名陈利国、杨雪松及学位、职称：博士、教授学科、专业名称：中西医结合基础学位类型：学术学位论文提交日期：2018年3月10号论文答辩日期：2018年5月29号答辩委员会主席：吕志平论文评阅人：学位授予单位和日期：暨南大学2018年7月独创性声明本人声明所呈交的

2、学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得暨南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：2018年6月16日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解暨南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权暨南大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、

3、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签名：签字日期：2018年6月16日签字日期：2018年6月16日学位论文作者毕业后去向：继续考博工作单位：暂无暨南大学硕士学位论文黄芩苷保护胚胎心血管发育的机制研究中文摘要目的黄芩苷（Baicalin），是安胎中药黄芩的主要有效活性成分之一，它是否能保护妊娠糖尿病导致的胚胎早期心血管发育畸形尚未有研究，其机制也尚未清楚。本课题利用早期鸡胚为模型，结合小鼠和细胞实验，系统的研究黄芩苷对妊娠糖尿病胚胎发育的保护作用。方法我们发现6µM的黄芩苷对高糖环境造成的鸡胚死亡和发

4、育迟缓有明显的减缓作用。因此，我们用生理盐水，黄芩苷，高糖，黄芩苷+高糖分组，分别观察HH7,HH8,HH10,HH11时期（心血管发育的关键时期）的鸡胚发育情况；以及取材，用免疫荧光、原位杂交等分子生物技术，探索胚胎早期心血管发育中关键转录因子的表达，及自噬、凋亡相关基因、ROS等的改变，探索黄芩苷对高糖引起的心血管发育造成畸形的减缓作用的机制。同时结合体外HUVEC细胞培养探索黄芩苷减轻高糖导致心血管畸形的作用机制。此外，还利用黄芩苷治疗由链脲霉素（Streptozotocin）诱导小鼠糖尿病的模型，观察了黄芩苷对糖尿病小鼠血糖及其他脏器的保护作用。结果黄芩苷和

5、高糖组合的鸡胚和HUVECs，凋亡细胞比高糖组低。当给予黄芩苷处理时，高糖诱导的过量ROS产生受到抑制。SOD，GSH-Px，MQAE和GABAA的分析表明，黄芩苷可以通过调节氯离子通道发挥抗氧化作用。此外，黄芩苷通过调节p62的表达，从而促进自噬流通畅，降低由高糖诱导的细胞损伤。黄芩苷和维生素C（抗氧化剂）均能减少细胞凋亡，然而氯喹（自噬抑制剂）不能，说明大量的ROS诱导在细胞凋亡中起主要作用，自噬起的是保护细胞存活的作用。在小鼠中，黄芩苷降低了由链脲霉素（STZ）引起高血糖以及对肝、肾的造成的损伤。结论I暨南大学硕士学位论文黄芩苷保护胚胎心血管发育的机制研究以上

6、数据表明，通过抑制ROS和过量自噬的产生，黄芩苷处理可以减缓高糖环境诱导的胚胎心血管畸形。黄芩苷在患妊娠糖尿病的药物开发具有广阔前景。关键词黄芩苷；胚胎保护；血管生成；心管形成；ROS；细胞凋亡；自噬II暨南大学硕士学位论文黄芩苷保护胚胎心血管发育的机制研究AbstractAimsBaicalinisatraditionalChinesemedicinefortocolysis.Whetheritprotectsearlyembryoniccardiovasculardevelopmentcausedbygestationaldiabetesisobscure,an

7、dthemechanismremainsunclear.Inthisstudy,earlychickenembryowasusedasamodeltoexplorethemolecularmechanismofbaicalininreducingtheearlycardiovasculardevelopmentaldeformitycausedbyhighglucoseenvironment.MethodsWefoundthat6µMbaicalinadministrationcanattenuatethedeathrateandretardationofchi