《杂交育种》PPT课件

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1、第一节微生物杂交第二节放线菌杂交育种第三节酵母菌杂交育种第四节霉菌杂交育种8工业微生物杂交育种第一节微生物杂交一、杂交的意义二、微生物杂交育种基本程序三、杂交育种中亲本和培养基的选择四、杂交育种的遗传标记五、杂交育种的方法第一节微生物杂交一、杂交的意义1、改变亲株遗传物质基础，获得新品种2、杂交所得新菌株可克服长期诱变造成的某些缺陷，提高对诱变剂的敏感性3、总结遗传物质转移和传递规律二、微生物杂交育种基本程序微生物杂交育种一般程序：杂交直接亲本之间亲和力鉴定选择原始亲本分离到基本培养基或选择培养基培养筛选重组体重组体分析鉴

2、定亲株A亲株B亲本选择亲本标记和亲和力测定亲株A亲株A标记亲和力亲和力标记A+B+C-D-A-B-C+D+A+B+C+D+双亲本杂交重组及重组体分离微生物杂交程序三、杂交育种中亲本和培养基的选择（一）亲本菌株的选择原始亲本优质出发菌株产量高、代谢快、产孢子能力强、泡沫少、粘性小2.直接亲本直接用于杂交的菌株具有遗传标记和亲和能力三、杂交育种中亲本和培养基的选择（二）培养基完全培养基（CM）2.基本培养基（MM）有限培养基（LM）专供异核体菌株生长4.补充培养基（SM）5.发酵培养基基本培养基，是营养成分简单而贫乏的一种培养

3、基。其配制的原材料基本上都是无机化合物。在杂交育种过程中相当重要，不论是营养缺陷型的筛选，还是重组体的检出、鉴别都是不可缺少的一类培养基。有限培养基，是专供异核体菌株生长使用的培养基。通常在基本培养基或蒸馏水中加入适量（10%—20%）的完全培养基，加入的量只限两直接亲本菌株稍许生长，以提供相互接触、吻合的菌丝体需要。加量过多，菌丝体也随之增多，会影响异核体菌株的检出。四、杂交育种的遗传标记为什么需要遗传标记？四、杂交育种的遗传标记常用哪些标记？营养缺陷型标记p1962.抗性标记3.温度敏感性标记4.其他性状标记亲株A亲株

4、B亲本选择亲本标记和亲和力测定亲株A亲株A标记亲和力亲和力标记A+B+C-D-A-B-C+D+A+B+C+D+双亲本杂交重组及重组体分离微生物杂交程序营养缺陷型标记五、杂交育种方法1.常规杂交育种微生物类别杂交方式供体与受体细胞关系参与交换的遗传物质原核微生物接合转化转导体细胞间暂时沟通细胞不接触，吸收游离DNA细胞间不接触，质粒、噬菌体介导部分染色体杂合个别或少数基因杂合个别或少数基因杂合真核微生物有性生殖准性生殖生殖细胞融合或接合体细胞接合整套染色体高频率重组整套染色体低频率重组微生物常规杂交形式2.原生质体融合育种双

5、亲本不受亲和力限制第二节放线菌杂交育种一、放线菌细胞结构和繁殖二、放线菌杂交概况和原理三、放线菌杂交技术（一）放线菌细胞结构和繁殖链霉菌的形态和构造（模式图）孢子在适宜的条件下萌发，长出1-3个芽管营养菌丝气生菌丝繁殖菌丝（孢子丝）孢子丝释放孢子链霉菌属第二节放线菌杂交育种二、放线菌杂交概况和原理（一）杂交原理供体菌向受体菌转移部分染色体，遗传物质交换，基因重组。类似于细菌二、放线菌杂交概况和原理（一）放线菌杂交原理一部分放线菌在杂交过程中会形成异核体，但这种异核体与霉菌异核体不同，在复制过程中染色体不发生交换。一部分放线

6、菌在杂交过程不形成异核体，真正类似于大肠杆菌杂交，两个不同基因型的菌株通过接合，细胞间沟通，供体菌株的部分染色体转移到受体菌细胞中，染色体发生交换，最后达到重组，获得各种重组体。ABHis-tyr-Met-str-染色体连接染色体交换部分结合子杂合系重组体亲本分离子异合体混合培养染色体转移放线菌杂交原理示意图放线菌的杂交只发生在具有一定感受态菌株之间据研究发现，在放线菌中也存在类似于大肠杆菌性因子的质粒第二节放线菌杂交育种二、放线菌杂交过程１、接合（参见图8.4）部分结合子：2、杂合系和重组体杂合系（参见图8.5）3、重组

7、体第二节放线菌杂交育种三、放线菌杂交技术混合培养法玻璃纸法平板杂交法三、放线菌杂交技术（参见图8.7）（一）混合培养法1、选择两个带遗传标记的直接亲本2、斜面混合接种两亲本重迭接种3、单孢子悬液制备4、检出重组体5、杂合系分析三、放线菌杂交技术—（一）混合培养法4、检出重组体原养型重组体检出：可在MM上生长生产水平提高4、检出重组体异养型重组体检出：带有营养缺陷的等位基因基本培养基不生长补充培养基上生长产量下降，生产中无多大应用价值三、放线菌杂交技术——（二）玻璃纸法1、原理两直接亲本携带营养缺陷型标记一个带抗药性标记，另

8、一个对同种药物敏感玻璃纸放在平板上，孢子混合接种于玻璃纸，培养玻璃纸转移到含药物补充培养基，培养长出菌落，是部分结合子第二节放线菌杂交育种三、放线菌杂交技术——（二）玻璃纸法2、方法（参见p205图8.9）第二节放线菌杂交育种三、放线菌杂交技术——（二）玻璃纸法3、分离子的检出和鉴别注意事项：孢子接种量