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时间:2019-05-10
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1、免疫学检验第五章凝集反应直接凝集反应间接凝集反应Coombs试验自身红细胞凝集试验冷凝集实验凝集反应Agglutination细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原,或可溶性抗原或抗体与载体颗粒结合为致敏颗粒后,它们与相应抗体或抗原发生特异性反应,在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象。凝集反应的特点抗原颗粒性抗原或致敏颗粒。反应的二个阶段抗原抗体的特异性结合和出现肉眼可见的凝集现象。在一定pH及适量电解质存在下才能发生。在凝集反应中IgM类抗体的作用强度比IgG类要大数百倍,lgG类抗体常出现不完全反应,即不
2、可见的抗原抗体反应。凝集试验为定性检测,也可进行半定量检测。直接凝集反应directagglutination颗粒性抗原在适当电解质参与下直接与相应抗体反应,当二者比例适当时,出现凝集。反应中的抗原称为凝集原agglutinogen参与反应的抗体称为凝集素agglutinin玻片凝集试验试管凝集试验玻片凝集试验玻片凝集试验为定性试验方法。一般用已知抗体作为诊断血清,与受检颗粒性抗原如菌液或红细胞悬液各加一滴在玻片上,混匀,数分钟后可用肉眼或低倍显微镜观察凝集结果。出现颗粒凝集者为阳性反应,也可用已知颗粒性抗原测定病人血清
3、中特异性抗体。§ABO血型鉴定CircleAshowsapositivetest(agglutinationofthelatexparticles.)TheothercirclesB-Eshownegativetests(noagglutinationofthelatexparticles).玻片凝集试验玻片凝集试验ABObloodtypeKarlLandsteiner(1968-1943)anAustrianimmunologistABO血型鉴定ABO血型及Rh血型抗体检测试管凝集试验试管凝集试验为半定量试验方法。在微
4、生物学检验中常用已知细菌作为一定浓度悬液抗原与一系列稀释的受检血清混合,经静置保温后观察每管内颗粒性抗原凝集程度。通常以产生明显凝集现象的最高稀释度为血清中抗体的效价。§肥达试验Widaltest§外斐试验Weil-Felixtest肥达试验WidaltestFernandWidal(1862–1929)Frenchphysicianandbacteriologistwhomadeimportantcontributionstothediagnosis,treatment,andpreventionofmanydisea
5、ses.Atestofbloodserumthatusesanagglutinationreactiontodiagnosetyphoidfever.AntigensdetectedaretheO(somatic),H(flagellar)andVi(virulence)antigens.肥达试验theWidalreaction外斐试验Weil-FelixtestAnagglutinationtestusedinthelaboratorytodiagnoserickettsialdiseases.RickettsialI
6、nfection外斐试验Weil-FelixtestItdependsonanon-specificcrossreactionbetweenantibodiesproducedbytherickettsialinfectionwiththeOX-2,OX-19andOXKantigensoftheGramnegativerod,Proteussp(变形杆菌).Thediagnosisofrickettsialinfectionisconfirmedbyafour-foldriseinantibodytitrebetwee
7、nacuteandconvalescentsamples.间接凝集反应indirectagglutination将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联与免疫无关大小适当的颗粒表面,使之成为致敏载体颗粒,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适宜的电解质存在条件下,出现特异性的凝集现象。也称被动凝集反应Passiveagglutination)。正向间接凝集反应用抗原致敏载体以检测标本中的相应抗体。将可溶性抗原与载体颗粒结合,再与样品中的抗体反应,通过抗体桥联,形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块者,为阳性反应。§伤寒沙门菌多糖抗原-绵羊
8、红细胞+抗体Agglutination血清稀释法123456反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体以检测标本中的相应抗原。用特异性抗体致敏载体,与检测样品中待测抗原反应,通过抗原桥联,形成肉眼可见的凝集者为阳性。§HBsAb-绵羊红细胞+HbsAg,§AFP,FetalAlphaGlobulin,AlphaFet
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