奶牛体外受精技术的研究

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1、上海交通大学硕士学位论文奶牛体外受精技术的研究姓名：唐峰申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：朱淑文20050501奶牛体外受精技术的研究摘要卵母细胞质量和精液质量不仅直接影响体外受精后的胚胎发育和移植效果而且对细胞核移植克隆动物转基因动物研究具有重要意义为了提高牛卵母细胞体外受精的卵裂率和囊胚发育率增加胚胎移植着床率使奶牛体外生产胚胎更有效的推广应用本研究对不同来源牛卵母细胞体外受精后的胚胎发育速度和囊胚的形成体外受精胚移植等技术和不同个体的冷冻精液质量对体外受精后的胚胎发育质量及染色体异常发生率进行了分析和研究结果如下1.不同来源牛卵母细胞体外受

2、精研究本研究对活体采卵和屠宰场废弃卵巢内卵母细胞体外受精后的卵裂率胚胎发育速度及囊胚形成率进行了研究结果证明屠宰场废弃卵巢所得卵母细胞体外受精后的卵裂率为63.7%利用OPU技术所得卵母细胞的卵裂率为85%两者之间差异显著P<0.05胚胎发育速度证明OPU的胚胎卵裂速度比屠宰场废弃牛卵巢内卵母细胞体外受精后的卵裂速度快OPU卵母细胞体外受精48h8-细胞期的胚胎率为41.2%囊胚形成率为35.1%屠宰场卵巢内卵母细胞体外授精48h后的8-细胞期胚胎率仅有26%囊胚形成率15.6%两者之间差异显著P<0.052.不同级别的卵母细胞体外受精研究本研究对活体采卵

3、不同级别的卵母细胞体外受精卵裂及囊胚发4育情况进行比较研究结果表明活体采卵AB级卵母细胞优于C级卵母细胞3.胚胎移植对28头黄牛发情第7天移植AB级早期囊胚36枚3个月未发生返情的有12头妊娠期间3头黄牛流产分娩时难产死亡1头存活12头4.不同个体的冷冻精液体外受精研究和染色体分析本研究对不同个体的种公牛的冷冻精液体外受精后的卵裂率和囊胚发育率进行了比较研究同时对体外受精胚的染色体进行分析结果表明冷冻精液A体外受精后的卵裂率及囊胚发育率均高于冷冻精液B体外受精后的胚胎发育速度快在第7天有47.8%的胚胎达到早期囊胚说明不同个体的精子活率不同体外受精后的卵裂

4、率和囊胚形成率不同两种冷冻精液体外受精后的胚胎染色体异常发生率无显著差异在染色体异常的胚胎中以多倍体发生率较高关键词牛体外受精胚胎发育染色体分析5StudiesoninvitrofertilizationtechniquesofcowoocytesAbstractThequalitiesofoocytesandspermscannotonlyeffectthedevelopmentofembryoafterreplantedbutalsohaveanimpactontheresearchofnucleartransferanimalcloninggenet

5、ictransformation.Inordertoenhancetheratesofthecleavageandblastocystofcowinvitrofertilization(IVF)oocytesandtherateofimplantationafterembryostransferredaswellasthewidelyapplicationsofcowembryosproductioninvitro,thetestshavebeencarriedoutinthisresearch:thedevelopmentpaceofembryoandt

6、heformationofblastocystafterinvitrofertilizationofcowoocytesfromdifferentorigin;thetechniqueofIVFembryosmigration;theanalysisofthequalitiesofembryosgrowthandthechromosomeabnormityafterIVFbyfreezingspermsfromdifferentindividual.Theresultsasfollows:1.Theresearchoninvitrofertilizatio

7、nofcowoocytesfromdifferentsourceInthisstudy,thecleavagethepaceoftheembryodevelopingandtheformationofblastocystwerecomparedbetweentheIVFoocytesderivedfromabandonedovariesinslaughtersandthosecollectedlive.TheresultshowedthatthecleavageratefromtheIVFoocytesderived6fromabandonedovarie

8、sinslaughterswas63.7%,otherwise,t