基因工程(浙版老师)

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1、下面是DNA分子平面图，说出图中1－11的名称。12345678109GTCA1.胞嘧啶2.腺嘌呤3.鸟嘌呤4.胸腺嘧啶5.脱氧核糖6.磷酸7.脱氧核苷酸8.碱基对9.氢键10.一条脱氧核苷酸链11.磷酸二酯键11什么叫基因工程？把一种生物的遗传物质DNA（目的基因）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。2.基因工程的核心是构建重组DNA分子，因此，早期也将基因工程称为重组DNA技术第一章基因工程原理：基因重组操作水平：DNA分子水平结果：定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。第一节工具酶的发现和基因工程的诞生基因工程的理论

2、基础：1.DNA是细胞生物的遗传物质2.DNA双螺旋结构3.遗传信息传递方式基因工程的技术保障——基因工程的工具1.(DNA分子剪刀）限制性核酸内切酶2.(DNA分子缝合针）DNA连接酶3.(DNA分子运输车）质粒与病毒一.限制性核酸内切酶（约4000种)1.高度特异性的酶①某种该酶只能识别双链DNA分子的某种特殊核苷酸序列，②只能把特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。ATGGCATCTTCGAA2.来源：主要来自微生物，如大肠杆菌EcoRⅠ限制酶AAGCTTTTCGAASma限制酶ATTCGAAGCTTACTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAG

3、GGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAGCTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG目的基因思考：1.要想获得某个特定性状的基因,必须要用限制酶切___个切口,可产生___个黏性末端.242.把两种不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA分子了。二.DNA连接酶1.作用：将互补配对（或相同）的两个粘性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子GGCATCTTAAAATTCCGTAGGGCATCTTAAAATTCCGTAG

4、CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT2.DNA连接酶的作用位点是：相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成：磷酸二酯键。产生4个磷酸二酯键,把目的基因与运载体连接起来目的基因运载体限制酶DNA连接酶DNA酶DNA聚合酶解旋酶作用结果作用部位DNA切断为2片段切断的DNA缝合起来DNA断裂为单个脱氧核苷酸单个脱氧核苷酸连接为DNA断开DNA的2条链的氢键切断2个磷酸二酯键产生2个磷酸二酯键断开所有磷酸二酯键产生许多磷酸二酯键碱基对之间的氢键几种酶的比较三.基因的运输工具——运载体标记基因，便于筛选。2.质粒:①能够自主复制的双链环状DNA分子.②

5、在细菌和酵母菌中,位于细胞溶胶，染色体之外③质粒含抗生素抗性基因（如四环素抗性基因），便于筛选1.运载体种类:______________________________质粒；噬菌体；动植物病毒质粒DNA分子同种限制酶剪切两个切口获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子（重组质粒）一个切口两个黏性末端DNA重组技术的三件工具：限制性内切酶、DNA连接酶、载体（如：质粒）。质粒含目的基因的DNADNA连接酶重组DNA同种限制性内切酶同种限制性内切酶2（组）重组DNA的形成3（导）重组DNA导入受体细胞4（筛）筛选含目的基因的受体细胞第二节基因工程的原理和技术原理基因工程原理

6、：___________________________让目的基因在宿主细胞中稳定表达什么是目的基因？人们需要的感兴趣的基因，如抗虫基因、抗病基因、抗除草剂基因、人胰岛素基因、人干扰素基因等。5（达）目的基因表达1（获）目的基因的获得基因工程的基本操作步骤：第一步.获得目的基因化学方法合成目的基因，如胰岛素基因从基因文库中寻找目的基因的序列是已知的聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因目的基因的序列是未知的:供体生物全部DNA限制性核酸内切酶所有基因(包括目的基因）与载体连接导入受体菌群体基因文库从基因文库中寻找目的基因第二步.形成重组DNA分子(核心）质粒目的基因同种限

7、制性核酸内切酶处理两个切口获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子（重组质粒）一个切口两个黏性末端受体细胞(如大肠杆菌)氯化钙处理细胞壁的通透性增大重组质粒进入受体细胞目的基因随受体细胞的繁殖而复制2.将重组DNA导入细菌第三步.将重组DNA分子导入受体细胞1.常用的受体细胞:大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞等。质粒重组DNA农杆菌植物体细胞表现性状3.将重组DNA导入植物细胞目的基因组织培养4.重组DNA导入动物细胞受体细胞（鼠受精卵）目的基因（人生长激素基因）普通鼠（对照）巨型鼠为什么把目的基因注入动物受精卵？答：可使