大鼠全脑缺血模型的改良与热休克蛋白70HSP70对脑缺血保护作用的实验研究

《大鼠全脑缺血模型的改良与热休克蛋白70HSP70对脑缺血保护作用的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、南京医科大学硕士学位论文大鼠全脑缺血模型的改良与热休克蛋白70（HSP70）对脑缺血保护作用的实验研究姓名：赵珺申请学位级别：硕士专业：神经外科指导教师：傅震20030401南京医科大擘硕士季值论文大鼠全脑缺血模型制作的改良与全脑缺血再灌注后HSP70的表达及其与缺血耐受关系的实验研究中文摘要[目的]改进大鼠全脑缺血模型的制作方法并以症状学表现、海马CAl区热休克蛋白70(HSP70)的表达、海马区的病理改变和苏木素在体染色为指标验证该模型成功与否。在此改良模型之上，研究不同持续时间的大鼠全脑缺血预处理诱导热休克蛋白70(HSP7

2、0)的表达及其与缺血耐受之间的关系。／I[材料和方法]实验第一部分，采用42只成年健康雄性sD大鼠，随机分为四动脉阻断组(A组)、单纯阻断颈总动脉组(B组)、四动脉阻断在体染色组(C组)、单纯颈总动脉阻断在体染色组(D组)和假手术组(E组)。A组损毁双侧椎动脉+夹闭两侧颈总动脉，又分为缺血10min(AI组)和30rain(AII组)：B组单纯阻断颈总动脉，又分为10min(B1组)和30min(B1I组)。AI组和BI组缺血10rain再灌注2d后行免疫组化染色(sP法)，检测海马CAl区热休克蛋白HSP70的表达；AII组和B

3、II组缺血30min再灌注5d后行HE染色观察海马区病理改变；C组和D组分别在四动脉阻断和单纯颈总动脉阻断后立即进行苏木素在体染色，以脑底动脉环(Willis’环)是否染色来判断大脑供血是否阻断；E组为假手术组。所有大鼠在手术中均使用乙醚麻醉。实验第二部分，采用60只同样的戍年健康雄性SD大鼠，用改良的四动脉阻断法制备全脑缺血模型，分成单纯预缺血组(A组)、预缺血+再缺血组(B组)、单纯缺血组(C组)和假手术组(D组)。A组又分为AI—AIV组，分别单纯全脑缺血lrain、2min、5min和10rain，2d后处死，用免疫组化染

4、色方法检测海马CAl区HSP70的表达。B组又分为BI—BIV组，分别予以全脑预缺血1min、2min、5min和10min，间隔2d后再次给予20min的全脑缺血，南京医科大学硕士学位论文5d后处死，行HE染色观察海马CAl区的病理改变。[结果]实验第一部分：1．四动脉阻断的A组于夹闭颈总动脉1—2min内均出现意识丧失，翻正反射和角膜反射消失，口唇紫绀，双眼球苍白，瞳孔散大，以金属镊刺激口唇无咬啮活动。解除夹闭后1—2min以上症状均消失。单纯颈总动脉阻断的B组、假手术组在手术过程中始终保持意识清楚，翻正反射和角膜反射存在，瞳

5、孔轻度发白，咬啮活动减弱不明显。2．AI组大鼠两侧海马CAl区可以见到神经元胞体与胞浆中均出现棕黄色染色颗粒，BI组和假手术组未见到阳性染色。AII组HE染色海马区可见到大量锥体细胞坏死，主要表现为细胞缩小，胞核皱缩深染，核仁消失，细胞周围间隙增大。BII组和假手术组无病理学改变。C组在体染色脑底动脉环未见到染色，E组可见到脑底动脉环染成紫蓝色。实验第二部分：1．AI组未见到HSP70表达，AII组少量表达，AIII组大量表达，AIV组表达开始减少。2．BI组和BIV组CAl区锥体细胞大量坏死，BII组和BIII组坏死细胞较少。一

6、[结论]】．四动脉阻断法建立大鼠全脑缺血模型具有无需开颅，更接近于临床，本法在Pulsinelli的基础上提出改进，无需特殊的仪器，具有方法简便，易学易会，效果可靠等优点，熟练掌握后成功率亦较高，利于推广。2．HSP70是脑缺血敏感的应激标志，对脑缺血损伤具有保护作用，在一定的预缺血时间窗内存在量效关系。[关键词]全脑缺血；疾病模型，动魄、缺血再灌注；热休克蛋白70；嵌虹耐爱，南京医科走学硕士学住论文Themodifiedmethodofglobalcerebralischemia．reperfusionmodelinratand

7、thestudyoftheexpressionofHSP70intheglobalcerebralischemiareperfusionandtherelationtotheischemiatoleranceAbstractIObjectivelTomodifythemethodofglobalcerebralischemia-reperfusionmodelinratandthismodelwasconfirmedbysymptomatology，theexpressionofheat—shockprotein70(HSP70)

8、inthehip[，ocampusCA1region，thepathologicalchangesinthehippo。ampu3andthestainedWillis’circleafterperfusionofhematoxylinsoluti