dna的的分析技术在法医物证学上应用

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时间:2019-05-10

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1、DNA分析技术在法医物证学上的应用法医物证学内容亲子关系鉴定个体识别亲子关系鉴定亲权纠纷(离婚案)移民案强奸致孕案拐卖丢失儿童案(医院中)婴儿错抱案(计划生育中)超生与否的鉴定个体识别凶杀案强奸案碎尸案石蜡包埋组织块调错案法医物证学鉴定方法血清学方法检验红细胞血型、白细胞血型、红细胞酶型、血清型DNA检验技术DNA指纹技术、PCR扩增技术血清学方法的局限性检材需要量大,且对时限要求较高(HLA分型要求采血后16--24小时内必须检验)不适用于陈旧、微量检材鉴别能力有限,不宜用于同一认定只能否定DNA

2、检验DNA核DNA线粒体DNA核DNA与线粒体DNANucleusMitochondriamtDNA结构D-loopD-环区 (displacementloop)HV1HV2在线粒体DNA基因组中占5-7%长约1100bpHV1:29-408bpHV2:15996-16401bp母系遗传mtDNA毛发骨骼牙齿细胞细胞核核DNADNA多态性序列多态性(mtDNA、DQ、PM)片段长度多态性(VNTR、STR)片段长度多态性VNTR位点(小卫星)重复单位17-170bpSTR位点(微卫星)重复单位2-7

3、bp长度相差1个重复单位就构成一个等位基因重复序列(在人类基因组所占比例为20-30%)散在重复序列:单拷贝DNA序列散布于基因组中在人类基因组中占10%串联重复序列:多个特定序列首尾相连而成(卫星DNA)在人类基因组中占15-20%倒位重复序列56可变串联重复数目41234123DNA多态性检测方法DNA多态性检测方法RFLP(DNA指纹技术)(VNTR位点)PCRPCR产物序列多态性检测(DQ、PM)PCR产物长度多态性检测(VNTR、STR)DNA检测方法比较RFLP信息量大费时(1~2周)费

4、力>50ngDNADNA不能降解PCR快速省力<1ngDNA适用于降解DNA复合扩增检测自动化RFLP技术DNA指纹DNA纹印DNA指纹使用一个含有多拷贝数核心序列的多基因座DNA探针(如33.6探针或33.15探针),在低强度条件下(较低温度、较高盐浓度)同时与许多VNTR基因座(约1000个)杂交,经电泳显示其中50-100个基因座的杂交结果,获得由一系列DNA片段谱带组成的图像,称DNA指纹。可进行同一认定DNA纹印使用位点特异性探针,在高强度条件下(较高温度、较低盐浓度)与特定的位点进行杂交

5、,获得DNA纹印。杂合子显示2条谱带,纯合子显示1条谱带。DNA纹印特异性强,4-6个单位点探针可达到同一认定的目的。操作流程限制酶PolymeraseChainReactionPCR检测序列多态性(斑点)DQPolymarker长度多态性(电泳条带)VNTR’s(D1S80,amelogenin)STR’sDQa特征DQa定位于第6号染色体扩增片段长242bp人群中存在7个等位基因1.1,1.2,1.3234.1,4.2/4.3DQa基因型1.1,1.11.2,1.21.3,1.32,23,34.

6、1,4.14.2/4.3,4.2/4.31.1,1.21.21.31.3,22,33,4.14.1,4.2/4.31.1,1.31.2,21.3,32,4.13,4.2/4.31.1,21.2,31.3,4.12,4.2/4.31.1,31.2,4.11.3,4.2/4.31.1,4.11.2,4.2/4.31.1,4.2/4.328种反向斑点杂交DQa分型1234C1.11.21.341.3Allbut1.34.14.2/4.3样本DNA的扩增产物与互补序列探针在膜上杂交,显示蓝色斑点DQa123

7、4C1.11.21.341.3Allbut1.34.14.2/4.3基因型:2,3DQa1234C1.11.21.341.3Allbut1.34.14.2/4.3基因型:1.2,4.1Multiplexing复合PCR扩增Polymarker(PM)LocusAllelesGenotypesLDLRA,BAA,AB,BBGypAA,BAA,AB,BBHBGGA,B,CAA,BB,CCAB,AC,BCD7S8A,BAA,AB,BBGcA,B,CAA,BB,CCAB,AC,BC972种可能的基因型PM检

8、测试剂条SABABABCABABCPOLYMARKERLDLRGcD7S8HBGGGypAPOLYMARKERLDLRBB,GYPAAA,HBGGABD7S8BB,GcBBSABABABCABABC辛普森(OJSimpson)被控杀人案 (1994-1995,“世纪审判”)基因座第29号血痕辛普森辛普森前妻GoldmanDQa1.1,1.2,41.1,1.21.1,1.11.3,4LDLRA、BABABABGYPAA、BBBABAAHBGGA、B、CBCABAAD7S

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