羟乙基淀粉急性高容量血液稀释对肾缺血再灌注损伤的影响

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1、河北医科大学硕士学位论文羟乙基淀粉急性高容量血液稀释对肾缺血再灌注损伤的影响姓名：贺永进申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：贾慧群;宋子贤2003.3.1．±查塑兰——羟乙基淀粉急性高容量血液稀释对肾缺血再灌注损伤的影响摘要目的：研究6％羟乙基淀粉(HES)急性高容量血液稀释状态(acutehypervolemichemodilution，AHH)对肾缺血再灌注损伤的影响，为HES急性高容量血液稀释的安全应用和治疗作用提供参考，为在低血压低灌注状态下如何保护肾功能开辟新的途径。方法：健康新西兰雄性白兔二十六只，体重2-3kg，随机分为

2、二组(n=13)：HES急性高容量血液稀释组(AHH组)和对照组(C组)。实验前动物禁食水12小时。3％戊巴比妥钠40mg／kg静脉注射诱导并维持麻醉，将动物以解剖体位固定于动物实验台，盲探气管插管接动物呼吸机控制呼吸。耳缘静脉穿刺，输入5％葡萄糖生理盐水8-10ml／kg补足因禁食丢失的液体量。做颈部切1：3分离颈动脉并作动脉插管接压力传感器测平均动脉压(MAP)；分离颈静脉并插管，连接输液装置和水压力计测压，以平卧位约第四肋间腋中线为零点位置(用Powerlab校准)，根据水柱高度读取中心静脉压值。四肢皮下针电极穿刺连接八道生理记录仪

3、监测心电图(ECG)和心率(HR)。直肠置探头监测体温，用物理方法保温，使体温保持在正常范围(38．5"C．39．5℃)，避免温度对动脉血流量产生影响。以上指标均采用澳大利亚医研设备公司生产的Powerlab／8SP八道生理记录仪记录±墨塑兰各参数。补足丢失液体后，A删组予手术丌始前通过耳缘静脉用6％HES15ml／kg行急性高容量血液稀释，输入速度为20ml／min，严格控制输入的量和速度，避免稀释程度过高或稀释不够对实验结果带来的影响。于稀释前和稀释后作股静脉穿刺抽静脉血2ml测血红蛋白(Hb)含量和红细胞压积(Het)，分别记录稀释

4、前后的MAP、中心静脉压(CVP)、ECG、HR。C组仅常规给予林格液8—10ml／kg，不作血液稀释，其他操作同AHH组。腹部正中切口，将腹腔脏器推向右侧，暴露左肾及左。

5、!子蒂，分离左肾动脉，放置合适MFV一3200电磁血流计探头(通常为2mm)测再灌注前(夹闭前)、再灌注10分钟、再灌注90分钟和再灌注180分钟的肾血流量。术中丢失的血液以等量HES代替，而尿液与经创面蒸发的水分均用等量的林格液补充。AHH组于HES急性高容量血液稀释后、C组于补足丢失液体后，用无损伤动脉夹夹闭肾动脉和肾静脉，观察3-4分钟，待确认肾血管完全闭塞后暂

6、时关闭腹腔。缺血30分钟，松开动脉夹再灌注180分钟，制成缺血再灌注损伤模型。再灌注180分钟时两组动物均取肾下极肾组织，所取肾组织包括肾皮质和肾髓质。组织处理：(1)取肾下极组织块5mg在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，放入5-10ml的小烧杯内。用量筒量取预冷的0．86％生理盐水，生理盐水的总量应该是组织块重量的9倍，取总量2／3的生理盐水于烧杯中，用眼科小剪尽快剪碎组织块(天热时小烧杯要放入冰水中)。将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中，再将剩余的1／3冷生理盐水用来冲洗残留中文摘要在烧杯中的碎组织块，一起倒入匀浆管中进行匀

7、浆。左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器肌中，右手将捣杆垂直插入套管中上下转动研磨数十次(6-8分钟)，充分研碎，使匀浆化，制成10％匀浆。将匀浆以3000．4000r／min离心10．15分钟。取适量上清液测定丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)。MDA测定用硫代巴比妥酸比色法，SOD测定用黄嘌呤氧化酶法，试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供，严格按其规定步骤操作。(2)作切片观察肾组织学变化，作肾小管坏死计数：光镜下肾小管病变程度采用Paller氏标准评分：肾小管明显扩张、细胞扁平(1分)；管型(2分)；肾小管腔内有脱落、坏

8、死的细胞，但未成管型或细胞碎片(1分)；上皮细胞颗粒变性(1分)；空泡变性(1分)；细胞核固缩(1分)。结果：(1)稀释后和稀释前相比，动物ECG和MAP无明显变化，HR虽明显降低，但在正常范围内；CVP从2．85±1．25cmH20升高至4．48±1．69cmH，O，有显著性差异。(2)血液稀释后，动物血红蛋白从127．85±12．559／L下降到87．85±7．749／L，Hct从37±2．12％下降到25±3。83％，达中度血液稀释。(3)再灌注10分钟和再灌注90分钟时，AHI-I组和C组的肾血流量与再灌注前(基础值)相比明显升高

9、，有显著性差异。再灌注180分钟时，C组的肾血流量与基础值相比明显升高，有显著性差异；AHH组的肾血流量与基础值相比没有明显变化，但与c组再灌注180分钟时的肾血流量相比明显降低，有显著性差异