中草药对醋酸铅诱发小鼠雄性生殖细胞遗传损伤的防护研究

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1、r76j8吉林大学硕士研究生论文32000225原创性声明本人声明:所呈交的硕士学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:VJV日期:2003年5月13日吉林大学硕士研究生论文32000225关于论文使用授权的说明本人同意学校有权保留并向国家有关部门送交学位论文的复印件，允许论文被查阅和借阅。同意学校及国家有关机构可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印

2、、缩印或其他复制手段保存论文。论文作者签“:决」孙指导教师签“:羊参呱-日期:2003年5月日期:2003年5月吉林大学硕士研究生论文32000225英文缩写词表SSA精子崎形CA染色体畸变UDS非程序DNA合成了人为几醋酸铅M内曰、︺生理盐水PCA过氛酸TCA三氛醋酸3H一TDR氖标胸腺嗜咬核普PPO2>5一二苯基恶吐POPOP1，4一双一2-5一苯基恶哇苯吉林大学硕士研究生论文32000225提要醋酸铅对雄性生殖细胞的某些发生阶段有强烈的诱变作用，致精子崎形率增加，诱发小鼠精原细胞和初级精细母细胞染色体畸变，DNA单链或双链断裂，DNA片段缺失等。寻找安全可靠的杭诱变剂已成为遗传毒

3、理学一个重要的研究内容。本文采用小鼠精子畸形(SSA)试验为指标，进行了甘草、土获答、夏枯草、韭菜籽四种中草药对醋酸铅损伤雄性生殖细胞的防护作用的初筛，以期从中筛选出一种杭诱变效果较佳的中草药，再采用精原细胞染色体畸变(以)试验，小鼠雄性生殖细胞程序外合成(UDS)试验，对筛选出的这种中草药进行进一步的杭诱变研究。研究结果表明:甘草水煎液不引起小鼠精子畸形、精原细胞染色体崎变及雄性生殖细胞的UDS，即对小鼠雄性生殖细胞无诱变作用，而且对LA引起的小鼠精子崎形、精原细胞染色体崎变及雄性生殖细胞UDS均有明显的抑制作用，即具有抗诱变作用。吉林大学硕士研究生论文32000225前言随着现代化

4、工业的高速发展，职业中毒致生殖系统损害在国际上已日益受到关注，化学物不仅可以损害职业接触者自身的生殖系统，而且还可影响子代的发育和健康，甚至造成子代出生缺陷仁‘，。目前铅对雄性生殖功能的影响，在国内外已有许多报道，铅能通过辜丸屏障，诱发小鼠精原细胞和初级精母细胞染色体崎变[Z1铅可致染色体断裂、姐妹染色单体交换(SCE),DNA单链或(和)双链断裂，DNA片段缺失等〔31铅不仅影响生殖细胞，对生殖过程的各个环节产生直接的毒性作用，而且还影响性激素的合成及其下丘脑一垂体一性腺轴的正常生理调节功能〔们。还有研究表明，铅染毒可使小鼠肇丸组织神经生长因子(NGF)mRNA表达水平明显下降，使其

5、指导合成的NGF也必然减少，进而影响辛丸组织的生长发育，影响生精细胞的分化和成熟，影响精子的生成。这一切均会更加重铅对生殖系统的毒性作用〔5，。遗传毒理学检测方法是分析环境化学物质对人类遗传毒理效应的途径，建立了细胞、染色体和分子等不同水平的一系列检测试验，这也为人类寻找杭诱变物质提供了必不可少吉林大学硕士研究生论文32000225的试验手段。铅是一种明确的职业化学毒物，但铅在现代的工业生产中应用极其广泛，职业性接触在所难免，彻底去除这种诱变剂不太可能，因此应用遗传毒理学的检测方法，筛选出某些能减少或消除环境中化学诱变剂对人类遗传物质损伤的物质，保证育龄个体产生优秀的生殖细胞，提高人口

6、质量极具现实意义。许多天然动植物成分、药物、有机或无机化合物，被证明具有杭诱变和抗癌作用，特别是我国某些传统中草药，不仅可以防治肿瘤，而且具有显著的杭诱变作用〔6，一侧。中草药资源丰富，并对其成分、性能、炮制方法、药理作用、临床应用等诸多方面研究得相当深入。尤为重要的是中草药为天然药物，毒副作用小。例如:韩发彬等人用外周血淋巴细胞的非程序DNA合成(UDS)试验对半枝莲、白花、蛇舌草、犀牛丸、绿茶等的致突变性进行了研究，结果表明这几种药物均有不同程度的抗突变性〔w。丹参对丝裂霉素C(MMC)诱发的精子崎形，早期精细胞微核及精原细胞染色体崎变均有不同程度的抑制作用{121。刘冰等研究证明

7、五加皮可以有效地抑制锡对生殖细胞和体细胞的遗传毒性效应{‘”。有人〔14]以SCE吉林大学硕士研究生论文32000225(姐妹染色单体互换率)为指标证实老年人口服构祀子能提高DNA损伤后的修复能力，保护由BMmC诱发的遗传物质损伤。刘德祥等人报道甘草水提物具有拮抗B(a)P致DNA链断裂的作用，且强于构祀子〔‘5，。甘草是一种应用价值很高的中草药，甘草的主要水溶性成分是甘草甜素(GL)。甘草钳素具有杭炎、杭贵疡和杭病毒等药理活性〔16][171