微生物检测技术与相关仪器知识扩充

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1、微生物检测技术和相关仪器首页→第八章微生物检测技术和相关仪器自动血培养仪进展血培养检查是用于检验血液样品中有无细菌存在的一种微生物学检查方法,对于快速检测临床上严重危及患者生命的败血症、菌血症患者血液中是否有细菌生长以明确诊断有十分重要的作用,是临床有效治疗的关键。近年来,随着科学技术进步和微生物学的发展,微生物学家、计算机专家和工程技术人员相结合,已经创造出许多自动化、电脑化的智能型自动血培养仪。一、自动血培养仪的基本结构和检测原理自动血培养仪包括培养系统或恒温孵育系统、检测系统、计算机及外围设备。培养系统设有恒温装置和震荡培养装置,其中培养瓶的支架根据容量不同分为50瓶、1

2、20瓶、240瓶等。自动血培养仪根据各自检测原理设有相应的检测系统。计算机及外围设备用于判断发出阴性、阳性结果报告,记录和打印结果,进行数据储存和分析等。自动血培养仪的检测原理主要有二氧化碳感受器、荧光检测和放射性标记物质检测三种检测技术。出于对环保和安全性方面的考虑放射性标记物质检测已较少使用。美国BD公司BACTEC系列自动血培养仪荧光增强检测技术的原理是细菌在代谢过程中利用培养基内营养成分,释放出二氧化碳,二氧化碳与培养瓶底部含有荧光染料的感应器反应,使感应器内结合二氧化碳的荧光物质被激发出荧光,系统每10min自动测定一次荧光水平,24h连续进行,通过电脑数据系统处理得

3、出培养结果,并立即以声、光信号报警。法国bioMerieux公司VITAL自动血培养仪的检测原理是在液体培养瓶内含有发荧光物质的分子,在孵育过程中,如有细菌生长,其代谢过程中会产生氢离子、电子和各种带电荷的原子团,发荧光的分子接受了这些物质后改变自身结构转变为不发光的化合物,出现荧光衰减现象,一旦被测出,即提示有细菌生长。荷兰OrganonTeknika公司BacT/alert自动血培养仪的检测原理是在血培养瓶底部有一个固相感应器,感应器上有半渗透性薄膜将培养基与感应装置隔离,只有二氧化碳能通过薄膜。当培养瓶内有细菌生长,其释放的二氧化碳可渗透至感应器,经水饱和后,产生氢离子,

4、使pH值发生改变,感应器的颜色也随之改变,颜色由原来的绿色变成黄色,这一过程由一个置于检测组件内部的光反射检测计进行连续监测。二、自动血培养仪的性能特点与自动血培养仪配套的培养瓶是血培养仪重要的核心技术,设置不同培养瓶的目的主要是针对微生物对营养和气体环境的要求悬殊,患者的年龄和体质差异较大及培养前是否使用抗生素三大要素,不仅提供不同细菌繁殖所必需的增菌液体培养基,还包含适宜的气体成分,最大限度检出所有阳性标本,防止假阴性。目前常用的培养瓶种类一般有标准需氧培养瓶、标准厌氧培养瓶、树脂或活性炭需氧培养瓶、树脂厌氧培养瓶、树脂儿童培养瓶等。标准培养瓶用于未使用抗菌素的患者,经济实

5、用,节约成本,适合各种细菌和酵母菌的生长;树脂培养瓶适合已使用抗菌素患者的标本,树脂包括亲水树脂和疏水树脂两种剂型,可分离已与细菌结合的抗菌素,裂解红细胞释放养分供细菌使用,裂解白细胞释放已被吞噬的细菌,断开链球菌及葡萄球菌簇以加速细菌生长,可以吸附临床使用的绝大多数抗菌素,使此类标本临床阳性培养率提高1/3;儿童培养瓶专门为儿童设计,添加特殊促进细菌生长因子,并含树脂,可提高血培养阳性率。自动血培养仪检测速度快、准确性及敏感性高是血培养仪的的突出特点。如根据1994年美国微生物协会年会报告美国BD公司BACTEC9050自动血培仪平均阳性标本检出时间为9.65h,最快阳性报告

6、时间为30min,培养20h阳性标本检出率为88.9%,培养48h阳性标本检出率为95%。法国bioMerieux公司的miniVITAL自动荧光血培养仪灵敏度为1000CFU/L。培养瓶采用真空负压采血技术,不需使用注射器采血,降低了成本,并减少标本污染机会;采血时血流量均匀,使病人免受痛苦;血量采集准确,避免血量过多或过少而影响检测结果的准确性;采血的密闭性操作,提高了医护人员的安全性。培养瓶有效期长达1年,储藏温度范围2℃~30℃;需氧培养瓶已预先填充培养所需气体,无须再做通气操作,提高了检验人员的安全性,降低了成本,减少了污染;培养瓶采用双条形码技术,撕下1条粘贴在病人

7、报告单上,查询病人结果时,只需用电脑上的条码阅读器扫描一下报告单上的条码,就可直接查询到病人的结果及生长曲线。通常血液培养仪不仅可进行血液标本的检测,也可以用于临床上所有无菌体液的细菌培养检测,如胸水、腹水、脑脊液、骨髓、关节液、腹透液、膀胱穿刺液、心包积液等。三、自动血培养仪发展趋势自动血培养仪的发展经历了观察指标从肉眼到放射性标记、再到非放射性标记,操作从手工到半自动、再到自动,结果判断从终点到连续判读、能记录细菌生长曲线、一旦出现阳性结果可随时报告几个阶段。今后自动血培养仪的发展趋势包

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