棉铃虫复眼眼色突变的遗传研究

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1、图幽密级:中国科学院大学UniversityofChineseAcademyofSciences硕士学位论文培养单位:2013年5月III[1lIlllIllllXlIIPIIIlllIIIY2430948ByTANGXuanADissertationSubmittedtoUniversityofChineseAcademyofSciencesInpartialfuif'dlmentoftherequirementForthedegreeofMasterofScienceInstituteofZoologyMay,2013学位论文原创性声明本人郑重说明:所呈交的学位论文,是本人在

2、导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:冶瞧,日期:7。}弓年5-月艿日版权声明任何收存和保管本论文各种版本的单位和个人,未经本论文作者及导师授权,不得将本论文转借他人并复制、抄录、拍照、或以任何方式传播。否则,引起有碍作者著作权益之问题,将可能承担法律责任。致谢本论文是在导师孙江华研究员的悉心指导下完成的,孙老师渊博的知识、严谨的治学态度使我获益匪浅,论文研究的每一步都

3、要感谢孙老师的教诲。孙老师的言传身教,不仅让我知道了研究者应具备的素质,为今后的学习打下基础,还让我懂了很多为人处事的道理。在此,向孙老师致以崇高的敬意和由衷的感谢。非常感谢刘柱东副研究员在实验过程中的无私帮助,刘老师在实验设计、技术攻关和结果分析等方面都给予了我耐心的指导,这篇论文的完成离不开刘老师的付出。感谢实验室韦卫老师、赵莉蔺老师和鲁敏老师在生活上的关心和帮助。感谢实验室张帅师兄、娄巧哲师姐、张金平师姐、程驰航师兄,徐乐天和张伟师弟,秦培君和张亚南师妹的支持与鼓励。中国科学院大学硕士学位论文摘要棉铃虫(Helicoverpaarmigera)是鳞翅目铃夜蛾属重要的农业害虫

4、之一,其高度的杂食性,强大的繁殖力以及分布的广泛性严重威胁着农作物的产量,是农业虫害防治的难点。实验室在棉铃虫饲养过程中筛选到一种可稳定遗传的复眼眼色突变体。与野生型相比,该突变体在幼虫体色和成虫眼色都表现出明显差异。目前对于棉铃虫等夜行性昆虫复眼眼色的突变很少有报告,其具体的色素种类、合成代谢途径及分子机制更是鲜有研究。本论文结合生态学与分子生物学的研究方法,试图定位克隆棉铃虫眼色突变体基因,并将该基因作为一种报告基因应用于鳞翅目的昆虫改造,同时也为探索夜行性昆虫相关色素代谢通路奠定基础。通过对棉铃虫成虫复眼眼色突变的遗传分析确定了棉铃虫复眼眼色突变是发生在位于常染色体上单基因

5、控制的隐性突变。通过系统比较棉铃虫野生型和突变体生长发育及交配生殖的相关指标,发现突变体与野生型在蛹重、幼虫和蛹的发育历期上,并没有显著差异。野生型和突变体的交配成功率和受精率也没有显著差异。对棉铃虫的野生型和突变体两个品系的杂交和回交代进行了的扩增片段多态性研究,使用60个EcoRI和MseI的引物组合共得到28个具1:1分离比的条带,绘制出该突变基因所在的连锁群,得到4个距离突变基因较近的分子标记。将得到的分子标记进行回收测序,BLAST对比得到6个匹配的基因序列,设计引物扩增,但因扩增条带的序列在GenBank中是大量重复序列而无法进行进一步的扩增得到全长。进而对野生型与突

6、变体两个品系进行cDNA的AFLP多态性分析,共得到了13个具有l:1分离比的分子标记,为进一步得到基因的全长奠定了坚实的基础。关键词:棉铃虫;眼色突变;AFLP;eDNA.AFLP;适合度中国科学院大学硕士学位论文摘要AbstractAsadestructivepestinChina,Thecottonbollworm(Helicoverpaarmigera,Leidoptera,Noctuidae)hasdevastatedlargeareasofcrops,duetoitsvastrangeofhostplants,overwhelmingfecundityandbroad

7、distribution,imposinggreatchallengesonagriculturalpestcontr01.Ⅵmilemaintainingthecottonbollwormpopulationinour1aboratory,wefoundandestablishedayelloweyemutantlineageofeyecolorinthecottonbollworm.Sofar,littlehasknownaboutfitnessandmolecularbas

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