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时间:2019-05-12
《水稻细菌性谷枯病菌的风险分析、鉴定检测及其拮抗细菌的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、浙江大学农业与生物技术学院博士学位论文水稻细菌性谷枯病菌的风险分析、鉴定检测及其拮抗细菌的研究姓名:罗金燕申请学位级别:博士专业:植物病理学指导教师:谢关林20070701游扳大学磷士学位论文尽襁细蕊性貉{鑫瘸菌的风险分析、整定捻测及其接抗绷鏊鲍研究觅明显水稻缨蕊性谷桔病疫状懿糨旗稻种上分离浅6糠病藩纲蘸,经25项主要细菌学特性、茵落膨态、致病性、BIOLOG、脂肪酸分析、RAPD.PCR鉴定及与4株标准菌株比较,证实了它们系Burkholderiaglumae,是引起水稻细菌性谷枯病的瘸艨。最g/umae分离率失0.32%,这是串隧大陆箐次证实“健康稻种”也存在水稻细菌性
2、谷誊奏癍慧。4.本研究将免疫吸附富集(ISE)和经典PCR结合以提高检测效率,并且番l用多尧隆抗体技术成功的获得了4种抗血清,邵抗Burkholderiaglumae全菌体盘清ASBgl4、ASB932、ASB926耩ASB904,ODD法测定该4种抗血清的效价均达到l:32以上,利用凝聚法测邈的效价所有抗赢清豹效价也均达委7l:5120以上,通过两种方法结合测定效价均显示为合格抗体。通过对4种抗血清的专化性进行研究,结果是示ASBgl4葶爨ASB932专化性较高,抗斑清ASB926馨锺ASB904专纯性不是很理想。餍蛊接PCR技术帮免疫捕捉PCR技术检测谷枯瘸菡,绪粜表明
3、,所有谷桔病菌都能产生500bp左右的特异性片段,非谷枯病菌的S个菌株均无特异性片段产生。掰种梭测方法的灵敏度眈较发现,直接PCR技术能检测猁l×105cfu/ml左右的悬浮液,免疫捕捉PCR技术熊检测到103cfu/ml左右悬浮滚,免疫摊捉PCR院直接PER灵敏性提高{02倍。检测久工接种的瘸稻种赛验中,矗接PCR技术能捡溅到2粒及以。t带菌种子铡得浸悬液,而免液捕捉PCR技术仅l粒带菌种子即可。5+麸432份醚槐采集酌承稻样燕中分离到4253个纲菌分离物,在离体条件下测定它{}】黠求稻谷括病菌翡捂抗麓力,结果显示,有23令菌株对谷桔病菌脊很好撼抗效果,其中肖40%谷桔瘸
4、描抗菌对水稻纹枯瘸、水稻恶慧病和水稻绷菌性条斑瘸菌也产生了较好的生防效果,表现出一定的广谱性:对5株拮抗活性较高戆菌株进行了缀藏代溅产物熬活性撼定,2椿接撬缨菌<翻2l、S087)酌培养滤液对水稻谷槠桔瘸菌鸯较高的撼抗活性,其巾T02t对蠡.glumae秘水秘纹枯病菌的捕抗活性分别达到了50.2%和51.4%;通过对水稻生长的影响情况进行试验,结聚爱示菹株T02l不但对稻种豹出萤率没有影响两且麓够显著健进秧萤饔鬏的生长。塞≯T021其育魏饯点,对其进行了系统戆签定,液雳簧缓鹃表型特性数值分析、碳源利用(BIOLOG)、脂肪酸甲基酯(FAMEs)分析以及16SrDNA序列分析
5、技术去去确定其分类地位,最终确定T02l为Pseudomonasaeruginosa。关键溺:水稻细菌性谷枯病菌;风险分析;水稻晶种;感瘸性;鉴定;检测;免疫捕捉PCR;拮抗细菌浙?£犬学博士学位论文水鹅细菌健谷桔瘸越的风险分橱、鉴定捻测及其拮抗细麓的研究AbstractBurkholderiaglumaeinducedseedlingrotandgrainrotsymptomofriceistheatingtOriceproductionindistributedcountries.ThereiSnoocculTencereportexceptTaiwaninChina.
6、Becauseofthequarantinesignificance,itwouldbelistedasaquarantinepestbeforethisstudybyMinistryofAgriculture,howeve‘littleinformationisavailablefortheresearchofB.glumaeinChina.ThequantitativePRAofB.glumaeinChinawasprocessed;Theresistantanalysisofmajorricevarieties,growninZhejiangandHeilongjia
7、ng,wasevaluated;TheidentificationofB.glumaefromso-called“healthlookingseeds”wasperformed.InordertOincreasethedetectingefficiency,thepresentstudycombinedtheISEmethodwithclassicalPeR;theantagonisticbacteriaagainstB.glumaewerescreenedfromriceseeds/nvirtro.andthei
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