硫化镉量子点与限制性内切酶EcoRI相互作用的研究

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1、独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：、罗舟签字日期：加1)年b月f口日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解江西师范大学研究生院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅

2、。本人授权江西师范大学研究生院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：罗丹签字日期：沙J多年∥月l01：I导师签名：牢两c7参签字日期：加侈年多月／口日摘要IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIHIIIIIlY2391972纳米生物技术是当今前沿科学的研究热点内容之一，CdSQDs具有独一无二的光化学特性，较高的表面积和表面能可以对生物分子产生很强的吸附作用。使其为纳米生物技术提供一个很好的载体平

3、台。而EcoRI是特殊的限制性内切酶，起到保护生命体原有遗传信息的作用。但限制性内切酶EcoRI是否具有生理功能取决于它们的空间结构。研究蛋白质与纳米粒子复合物中蛋白质的构象行为对纳米粒子应用于探测生物过程，作为检测生物体内某些重要分析物的报告者有重要的研究意义。具体做了以下工作：1．第一部分用简单的水热合成方法合成了MUA(十一基巯酸)包裹的CdSQDs，用紫外．可见光谱，荧光光谱，圆二色光谱，凝胶电泳和红外光谱来作为研究的基本手段，分析研究EcoRI与CdSQDs的相互作用及EcoRI．CdSQDs复合物中EcoRI的构

4、象变化。结果表明在pH6．0条件下CdSQDs对EcoRI的猝灭方式为静态猝灭，两者间的作用方式主要为静电引力，FTIR和CD光谱证明了在结合的过程中EcoRI的二级构象都是伴随着a．螺旋和转角构象含量减少，D．折叠和无序结构的含量增加。虽然EcoRI在纳米粒子表面的吸附导致了构象变化，但凝胶电泳发现复合物中EcoRI的活性任然存在。2．第二部分进行一系列的实验研究一定粒径范围的CdSQDs与EcoRI间的相互作用。用Hill理论研究了EcoRI对CdSQDs的猝灭方式，发现EcoRI与CdSQDs的平衡常数和代表着协同性的

5、Hill参数n与CdSQDs的粒径密切相关。并且发现EcoRI吸附在不同粒径CdSQDs上时，其构象变化是不同的。从凝胶电泳分析结果看，cc．螺旋结构的减少或多或少影响着酶的活性。3．第三部分用溶剂热法合成了尾端含有不同官能团(．OH，．CH3)的CdSQDs，探讨官能团对CdSQDs与EcoRI间的相互作用的影响，并研究EcoRI．CdSQDs复合物中EcoRI构象变化。聚丙烯酰胺凝胶电泳发现，CdSQDs与EcoRj的结合力因为官能团疏水性强弱而不同。用UV可见光谱，荧光手段发现了CdSQDs对EcoRI的猝灭方式虽然都

6、是静态猝灭，但从Ksv大小反映出的猝灭强度是明显不同的，结合常数Ka也同样如此。通过热力学参数发现CdSQDs．OH与EcoRI的作用力方式为氢键和范德华作用力，而CdSQDs．CH3与EcoRI的作用力方式为疏水力。FTIR光谱计算出复合物中EcoRI的B．折叠和转角含量增加，而其含量的增加主要由O【．螺旋和无序结构含量的减少。关键词：硫化镉量子点，限制性内切酶EcoRI，光谱法，二级结构变化AbstractBio-nanotechnologyhasgeneratedgreatresearchinterestinnOWda

7、ys．TheCdSQDsquantumdotsbecauseoftheiruniquesize—dependentphotochemicalproperties，theirhighratiobetweensurfacearea／totalvolumeandthehighsurfaceenergy，allowingastrongbiomoleculeabsorption．So，itcouldbeagoodsupporterforbio-nanotechnology．EcoRlwasanimportantbiomacromole

8、culeinlivescellsconsideredtobepartofadefensesystemthatprotectsbacterialcellsagainstforeignDNA．ButthephysiologicalfunctionofEcoRlwasdependedonthes