植物组织培养习题

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1、植物组织培养习题1、简述植物组织培养的理论依据？2、植物组织培养的类型？3、论述组织培养在农业上的应用。4、在植物组织培养中，通过哪些途径可以得到完整的植株？提示：①外植体→愈伤组织→根、芽→试管苗②外植体→愈伤组织→胚状体→试管苗③外植体→根、芽→试管苗④外植体→原球茎→试管苗⑤外植体→胚状体→试管苗5、培养基一般包含哪些成分？6、外植体怎样选择？7、按种后离体培养物对光、温、湿有何具体要求？8、植物组织培养技术主要包括哪些环节？各环节的主要工作内容？提示：1）培养基配制技术2）培养材料制备（灭菌）技术3）无菌接种技术4）培养技术9、论述离体培养可

2、能出现的异常现象及防止措施？提示：一、污染，二、褐化，三、玻璃化（玻璃化的含义：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水渍状，这种现象通常称为玻璃化(也称为超水化现象)。发生玻璃化的试管苗称为玻璃化。防止玻璃化苗发生的措施：(1)适当提高培养基中蔗糖和琼脂的含量水平，降低培养基的水势。(2)选择合适的激素种类和浓度，适当减少细胞分裂素用量或适当增加生长素比例。(3)适当延长光照时间或增加自然光照，提高光强。(4)调整培养温度，培养室要有降温和增温设施，防止温度突然变化。(5)使用透气性好的封口材料。如牛皮纸、棉塞、滤纸、

3、封口纸等，尽可能降低培养内空气湿度，加强气体交换。(6)尽量选用玻璃化轻或无玻璃化的植物材料。(7)适当提高培养基中的无机盐的含量，减少铵态氮而提高硝态氮的用量。(8)在培养基中适当添加活性炭、间苯三酚、根皮苷、聚乙烯醇(PVA)均可有效控制玻璃化苗的发生。四、其他问题：组织培养过程中除了污染、褐化和玻璃化三大技术难题之外，还有黄化、变异、瘦弱或徒长等问题。10、植物生长调节物质在组织培养中有哪些作用？11、简述愈伤组织细胞分化？12、何为植物生长调控理论？提示：Skoog和崔徵提出根芽激素理论13、愈伤组织在园艺植物育种中的应用。14、简述茎段培养

4、基本过程？提示：答：选健壮的枝梢→去叶片用自来水冲洗→75％酒精浸1min→0.1%Hgcl2浸泡5－10min→接种→培养15、简述叶培养基本过程？（类同14题）16、茎的培养发育方向及影响发育方向的因素提示：发育方向同第4题17、为何幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂？18、何为胚的早熟萌发？19、胚胎培养技术在育种工作中有哪些应用？20、论述如何制备胚和胚乳外植体？提示：幼嫩果实表面消毒后取出种子，分离出胚乳和胚21、花药和药粉培养技术主要包括哪些？提示：1、材料的选取，确定材料的最适发育期（单核期或单核中晚期）2、材料与处理与灭菌（3-5℃

5、低温处理3-10天-（大花蕾将萼片剥掉）-70%酒精几秒-0.1%升汞10min-无菌水冲洗。3、接种培养镊子剥去花瓣-花药均匀接种于培养基上，常用培养基MS、N6和马铃薯培养基。蔗糖5-10%，20-30℃，光照12h。4、培养方法培养基：我国朱至清N6适于禾谷类作物、马铃薯2号等。22、花药培养有何意义？23、简述花药（如水稻）培养方法？24、简述分离单细胞的方法？25、比较机械法和酶解法？26、简要说明影响单细胞培养的因素？27、何为细胞悬浮培养？怎样做到悬浮培养细胞的同步化？提示：悬浮细胞是悬浮培养中的细胞,而悬浮培养是非贴壁依赖性细胞的一种

6、培养方式。.同步化：使用理化方法使细胞分裂同步，即同时经历细胞周期的各个阶段（G1、S、G2和M）。同步化的方法有饥饿和抑制两种方法。饥饿是通过控制某种营养成分或细胞分裂所需激素受而使细胞在G1或G2期停止。抑制是通过加入DNA合成的抑制剂如5-氨基尿嘧啶、FudR、羟基脲和胸腺嘧啶脱氧核苷等使培养细胞达到G1/S期分界点，加入氮气和乙烯也可以诱导同步化。28、原生质体培养的意义何在？29、、PEG融合法原理是什么？提示：PEG是一种带负电性的离子化合物在原生质体融合中起到一种桥梁作用，可以使原生质体凝聚。在洗脱过程中，PEG将被洗掉，导致质膜表面电

7、荷重排。粘连的质膜大面积紧密相连，电荷的重排队导致一个原生质体的负性电荷部位与另一原生质体的正性电荷部位相连而导致融合30、原生质体活力测定的方法有哪些？提示：①孢质环流法②FDA染色法：荧光素双醋酸盐（FDA）（无荧光），FDA被膜内酯酶裂解掉乙酸，使其发出荧光。31、论述原生质体融合技术的主要环节？32、微繁的优点是什么？33、微繁的再生类型有哪些？提示：器官发生型，胚状体发生型，顶端分生组织伸长型，侧芽增殖型，不出芽发生及其它类型。34、茎芽增殖的途径有哪些？提示：①愈伤组织②不出芽形成③腋芽萌发35、微繁的应用及其局限性36、论述影响微繁的因

8、素37、无病毒苗培育的意义何在？提示：①从根本上消除只靠种苗传播的病毒病的危害。②无病毒栽培可改善果树品质，