湿地松抗病家系组培繁殖技术研究

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1、南京林业大学硕士学位论文湿地松抗病家系组培繁殖技术研究姓名：何月秋申请学位级别：硕士专业：森林保护指导教师：叶建仁2003.6.1湿地松抗病家系组培繁殖技术研究摘要松针褐斑病(LPcⅡ"osticta口cfcD肠)的大面积流行严重制约了湿地松的进一步发展。在病害严重地区，抗病育种是经济有效地防治松针褐斑病的唯一途径。所建的抗病种子园已进入结实阶段，子代抗病性测定工作也已进一步展开之中。然而，种子园有限的产量远远不能满足生产的需要，快速扩大繁殖现有材质优良、抗病性强的湿地松材料已迫在眉睫。故此．本文以湿地松为材料，研究其快速繁育系统。其主要研究结果如下：以湿地松成熟合子胚为外植体诱导胚性愈伤组织

2、，其中培养基组合为LP+2，4一D12mg／L+6一BA4mg／L和LP+2，4一D4．5m玑+6一BA0．1mg／L+KT0．1mg／L可产生少量类似胚性愈伤组织的培养物。以幼嫩子叶为外植体诱导不定芽的发生，培养基组合为改良GD+NAA0．1mg，I片6一BA5mg／L，诱导频率仅有7．1％；直接诱导湿地松成熟合子胚的不定芽分化，较为适宜的培养基组合为改良GD+NAA0．0ling／L+6一BA5mg／L，其诱导率可达61％，但同时褐化率也高达56．5％。这两种途径获得的不定芽对培养条件要求较高，本实验中没有研究出适合其继续生长的培养基。以带子叶顶芽为外植体比较容易建立起湿地松组织培养的再生

3、体系。实验结果表明，改良GD是离体胚生长和丛生芽分化的较优基本培养基。改良GD培养基中附加6-BA(0．5～5rag／L)和NAA(O．01～0．1mg／L)可诱导丛生芽的发生。丛生芽诱导的较优培养基组合为改良GD+NAA0．05mg，L+6一BA3mg／L，诱导率73-3％，芽分化系数为4．7。丛生芽在培养基组合为改良GD+NAA0．07mg／L中可以继续生长。l，2改良GD培养基中添加0．05％的活性炭可促进丛生芽茎伸长，一个月内平均可伸长o．7cm。培养基组合为1／2改良GD+NAA0．05mg，L+6一BAl．5mg／L相对较适合丛生芽扩大繁殖，能使50％的丛生芽分化出第二代芽。在本实

4、验中没有研究出适合第二代芽继续生长的培养基。1／2MS培养基是湿地松试管苗生根的较优基本培养基。湿地松试管苗对NAA较为敏感，0．01mg／LNAA便有少量不定根的形成；而对IBA则不太敏感，lmgm以下的IBA都不能诱导根的形成。湿地松试管苗的不定根诱导培养较为适宜的组合是I／2MS+NAA0．05mg／L，诱导率可达55．5％。无激素1，2改良GD不但能够使少量试管苗直接分化出不定根，而且还能使已分化出的不定根迅速伸长。关键词：湿地松，松针褐斑病，组织培养，器官发生，植株再生StudieSonTechnologyAboutTissueCulturePropagationofResistan

5、ceFamiliesofSlashPine(Pinuselliottii)AbstractBrownspotneedleblighthasbecomeaseriousobstacleinthefurtherexpandingofPinuselliottii．Agreatdealofstudiesindicatethatbreedingforthediseaseresistanceisonlyefficientwaytocontr01thediseaseathightdiseasehazardsites．Theseedorchardsofresistancetothediseasehavecom

6、eintothestageofseeding。Furthermore，itisgoingthattheworkofthefilialgeneration’SresistancetOthedisease．Nevertheless，theseedsupplyoftheorchardsarefarawayfromtheneedsofafforestation．Therefore，itisimpendenttorapidlYproliferatethematedalofPmusellimtiiwhichhasgoodwoodqualityandcallstronglyresisttothebrowns

7、potneedleblight．So，thisarticleresearchedthesystemoftherapidproliferationinPinuselliottiibythewayoftissueculture。确e愆s迸搪are矗sfollowed：Embryogeniccallusdevelopmentwasinitiatedinculturedmatureembryoexplan