微囊藻毒素对大鼠精原细胞的急性毒理作用研究

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1、ThesisSubmittedtoNanjingUniversityfortheMaster’SDegreeofImmunologyintheMedicalSchoolTheacutetoxicityofMicrocystin--LRtothemaleratspermatogoniaMasterDegreeCandidate：JingtaoYuan(MG0735007)Su[Prof．XiaodongHansupervisor：erotxlaoaongHanTheMedicalSchool，NanjingUniversity2010．6学位论文独创性声明本硕士学位论文为本人在导师指导下

2、进行的原创性工作的总结，除7"zjl用相关参考文献以外，所有的试验数据和结果均没有任何作伪，论文的内容不包含任何抄袭他人已经发表或尚未发表的成果，不涉及任何经济或产权纠纷，特此郑重声明。DECLARATION袁劲涛2010年6月8日Thisistodeclarethatmydissertationwasoriginallyfulfilledwiththegreathelpofthesupervisorsanddoesnotcontainanycribfrompublishedorunpublisheddataofotherauthorsexceptcitationsandcounter

3、feitresultsanddoesnotdealwithanyeconomicorpropertyclaims．JingtaoYuan2010．6．08目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言．．．⋯⋯．．．．．．．．⋯．．⋯．⋯．．．．．．．．．．．．．⋯⋯．．．．．．．．⋯．．．．8日U舌．．．⋯⋯．．．．．．．．⋯．．⋯．⋯．．．．．．．．．．．．．⋯⋯．．．．．．．．⋯．．．．第一部分大鼠精原细胞的分离纯化及鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．10一、材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．仪器和试剂⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．112．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11二、实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．141．光学显微镜以及激光共聚焦显微镜观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142．碱性磷酸酶显色试验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯143．流式细胞仪检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17三、实验讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．18第二部分MC．LR对大鼠精原细胞的急性毒理学影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．20一、材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．211．仪器和试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯212．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．

5、21二、实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯241．MC．LR对大鼠精原细胞膜完整性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．MC．LR对大鼠精原细胞活力的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．243．MC．LR对大鼠精原细胞内总抗氧化物水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯244．MC．LR对大鼠精原细胞内活性氧水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．265．MC．LR对大鼠精原细胞线粒体膜电位的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．266．MC．LR对大鼠精原细胞内游离Ca2+浓度的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．287．MC．LR对大鼠精原细胞凋亡的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．29三、讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．

6、．30四、结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31全文总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．32参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．33文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35攻读硕士期间发表论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．41致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42南京大学硕士学位论文中文摘要随着社会经济的增长、工业化的发展以及农业生产中农药化肥的使用，我国水体富营养化日益严重，由此导致的淡水有害藻类水华现象频繁发生，

7、其中微囊藻水华是危害最严重的一类。部分微囊藻产生微囊藻毒素(Miccrocystin，MC)，MC是一类具有生物活性的环状七肽物质，是迄今发现最强的肝癌促进剂。WHO早在1998年就将微囊藻毒素作为强制性标准，规定饮用水中限量为1I．tg／L。MC的肽链中由两个可变的L．氨基酸(X和Z)的更替，衍生出约80种毒素类型，其中毒性最强、分布最广的为MC．LR(L=精氨酸，R_亮氨酸)。目前研究发现MC具有肝脏和肾脏毒性，而关于哺乳动物的生殖毒性的研