HPLC常见故障排除及维护

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1、HPLC常见故障排除与维护第一部分：色谱仪常见故障分析及排除LC-100液相系统示意图确定故障现象用排除法寻找问题原因分析可能引起问题的因素用基准的方法验证系统从简单问题入手色谱故障排除步骤寻求帮助一次只变化一个因素，以使你能够确认所变因素与问题之间的关联。养成良好的记录习惯。将来利用记录可以帮助发现问题，强化预防保养工作。尝试预测将来可能发生的问题。利用成功的故障排除经验。恢复原状。如果使用更换组件的方法来查找问题之所在，完毕后应将原有完好组件安装回原处。否则，换下来的组件将来很难再利用，造成浪费。确认问题至少发生两次以上。如果问题不重复出现，很难证实其确实存

2、在。色谱故障排除经验规则引起HPLC发生问题的潜在因素HPLC常见故障因素环境电源接地线温度湿度清洁程度化学品色谱柱保护柱溶剂样品仪器泵进样器检测器数据处理单元HPLC常见故障因素（工作环境）电源容量、稳定性地线系统统一电源,统一接地湿度对光学部件的影响尤为严重温度空调机的影响清洁不要轻视灰尘的影响工作环境的影响HPLC常见故障因素（化学品）已损坏的保护柱、色谱柱所用溶剂、试剂的品质化学品使用不当带来的影响样品前处理方法不当带来的影响实验前的准备和结束后的收尾工作化学品的影响友情提示：保持良好的色谱柱使用习惯使用新鲜的水溶液，并考虑使用生物稳定剂（如叠氮化钠）储

3、存色谱柱时，应冲净缓冲盐，并用有机溶剂保护色谱柱（乙腈）避免外力损伤色谱柱：弯曲、跌落或将接头拧的过紧完全润湿在运输中变干的色谱柱对含有保留性较强的杂质组分的样品要进行预处理定期用强极性的溶剂清洗色谱柱清除柱填料的局限性了解溶剂对样品的溶解性及分离的影响pH温度化学兼容性在使用前过滤溶剂友情警示：使用缓冲液的注意事项缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和pH值，减少拖尾。但是使用缓冲液要注意几点：1、避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用。2、缓冲液最好要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。3

4、、实验后不可用有机溶剂直接过度，有机溶剂会处使盐类析出，造成液路或色谱柱堵塞，可用95：5的水甲醇冲洗。4、使用缓冲液要及时掌握pH范围，做到胸中有数。5、清洗液路和柱子时，有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。6、长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路（拆下柱子，走30ml,再用5倍水冲洗）可以避免液路的堵塞。7、选择缓冲液要用可靠的试剂，避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。HPLC常见故障因素（泵）LC-P100高压恒流泵HPLC常见故障因素（泵）正确使用您的色谱泵：使用高品质的溶剂溶剂过滤（注意滤膜的选择

5、）脱气溶剂柱塞杆清洗注意调节流量时的变化速度HPLC常见故障因素（泵）注意流动相组分的互溶性！使用正确的密封圈清洗溶剂！泵头泵腔体吸入阀导通活塞向后运动泵座宝石活塞杆密封圈排出阀关闭液流方向泵的工作原理：①吸液过程泵头泵腔体吸入阀关闭活塞向前运动泵座宝石活塞杆密封圈排出阀导通液流方向泵的工作原理：②排液过程HPLC常见故障因素（泵头）柱塞杆密封圈HPLC常见故障因素（泵头）出口单向阀进口单向阀泵头泵头吸入阀宝石球与球坐粘连，吸入阀不能导通活塞向后运动泵座排出阀关闭液流方向泵吸液过程有故障情况：吸入阀宝石球粘连泵腔体内没有液体流入宝石活塞杆密封圈排出阀导通泵座宝石

6、活塞杆密封圈吸入阀宝石球与球座之间有杂质，液体反向泄漏液流方向泵排液过程有故障情况：宝石球与球座之间有杂质反向泄漏液流方向反向漏液方向活塞向前运动HPLC常见故障因素（单向阀）出口阀进口阀宝石球不能向上运动液流方向（正向）无液流流出宝石球与球座粘连不能向上运动使正向流动的液流①宝石球与球坐粘连单向阀有故障情况：不能通过接触面处有杂质宝石球与球座之间宝石球与球座不能形成了液体的反向②宝石球与球座之间有杂质单向阀有故障情况：液流方向（反向）紧密接触有杂质泄漏如何减少单向阀的故障流动相一定要用0.45μm的滤膜过滤。避免使泵长期不工作，使流动相干枯。避免使用高粘度的流

7、动相。使用带缓冲盐的流动相后，一定要充分清洗。定期对流动相过滤头进行清洗。吸入单向阀故障的排除单向阀的故障现象，极大多数出现在吸入单向阀上。可以将吸入单向阀从泵头上拆下，接上专用针头，用蒸馏水冲洗即可（冲水时注意手指要按住吸入阀头部白色垫圈，防止内部零件冲出）。泵头吸入阀关闭泵座宝石活塞杆密封圈排出阀导通液流方向（压力下降）密封圈泄漏产生的故障现象：密封圈与宝石杆之间存在间隙，导致漏液和压力下降泵腔体活塞向前运动如何减少密封圈的磨损要用优质的流动相。色谱柱的压力不要太高。即不要使用受污染、老化的色谱柱。使用带缓冲盐的流动相后一定要用纯水充分清洗。避免使用高粘度的

8、流动相。避免在没有流动相