注射用复方荭草冻干粉针对大鼠凝血系统影响的实验研究

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1、注射用复方荭草冻干粉针对大鼠凝血系统影响的实验研究【摘要】目的探讨注射用复方荭草冻干粉针（WHG）对大鼠凝血系统的影响,探讨其发挥活血化瘀作用的机理。方法以Wistar大鼠为研究对象,通过测定其凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)，观察WHG对大鼠凝血系统的影响。结果WHG对大鼠凝血系统有显著影响,显著延长PT,APTT,TT(P＜0.05);显著降低FIB的含量(P＜0.05)。结论注射用复方荭草冻干粉针通过影响大鼠凝血系统的多个环节发挥抗凝血作用。【关键词】注射用复方荭草冻干粉针凝血系统活血化瘀抗凝血注射用复方荭草冻干粉针剂是

2、以贵州地产药材荭草为主药，根据传统苗族用药理论，结合现代制药技术及活性分析的技术与方法，研制出的中药新药。其具有改善冠脉循环、降低心肌耗氧量、减轻实验性心肌缺血损伤作用[1]，用于冠心病、心绞痛心血瘀阻所致胸痹心痛证。本实验在WHG药效学筛选研究的基础上,通过测定大鼠凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)4项指标观察WHG对大鼠凝血及纤溶系统的影响，阐述WHG发挥活血化瘀、抗凝血作用的机理，为其临床应用提供依据。1材料与方法1.1动物健康SD大鼠,体重180-220g，雌雄各半，由贵阳医学院实验动物中心提供。（合格证号:SCXK(黔)2

3、007-0001）。51.2实验药品盐酸川芎嗪(091103A3，哈尔滨三联药业有限公司)；注射用注射用复方荭草冻干粉针(20100105，由贵阳医学院贵州省药物制剂重点实验室制备)。1.3实验试剂与材料1.3.1实验试剂凝血酶原时间测定试剂盒（PT凝血酶STG20101-44，PT缓冲液STG40102-44)；凝血酶时间测定试剂盒(TT凝血酶STG20301-30，TT缓冲液STG40302-30）；活化部分凝血酶原时间测定试剂盒（APTTSTG20201-22，CaCl2，STY50202-23）；纤维蛋白原含量测定试剂盒（FIBSTG20401-29，FIB缓冲液STG300402-1

4、9），均为北京世帝科学仪器公司产品。1.3.2实验仪器EL204电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；凝血仪(北京世帝科学仪器有限公司，LG-PABERI型)；冷冻离心机（美国贝克曼公司，Allegra64R）。1.4统计方法应用SPSS13.0统计学软件进行分析,计量资料以（x-±s）表示,组间比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。2方法5取体重为180-220g的SD大鼠50只,雌雄各半。随机分为阴性对照组（生理盐水）、川芎嗪组（阳性组），WHG组高剂量组（13.5g/kg），WHG组中剂量组（6.8g/kg），WHG组低剂量组（3.4g/kg），每组10只。每天尾静脉注

5、射给药，连续10天。取血前大鼠禁食12小时，禁食不禁水，于末次给药后30分钟，大鼠股静脉采血1.8ml，置于含3.8%枸橼酸钠0.2ml的离心管中，立即轻轻地上下颠倒混匀10次，2500×g离心10min，分离血浆，保持室内温度在26℃±2℃，在4小时之内先后按各指标试剂盒的要求进行凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)的测定[2]。3结果WHG高、中剂量组均明显延长大鼠的PT、APTT、TT，并显著性降低大鼠FIB含量，与正常对照组比较，均有显著性差异（P＜0.05），表明注射用复方荭草冻干粉针通过作用于内源性及外源性凝血系统发挥

6、抗凝血作用。实验结果见表1～4。表1WHG连续10天给药对大鼠PT的影响(x-±s,n=10)注：与对照组比较，＊p<0.05表2WHG连续10天给药对大鼠APTT的影响(x-±s,n=10)注：与对照组比较，＊p<0.05表3WHG连续10天给药对大鼠TT的影响(x-±s,n=10)注：与对照组比较，＊p<0.05，＊＊p<0.015表4WHG连续10天给药对大鼠FIB的影响(x-±s,n=10)注：与对照组比较，＊p<0.054讨论冠心病是当前严重威胁人类健康和生命的最常见的疾病之一。其发病原因是冠状动脉粥样硬化使循环血量减少。Salomaa等报告指出，血液流

7、变性异常、血液处于高凝状态、纤维蛋白原增高是男、女冠心病的强危险因素，冠心病患者由于其动脉粥样硬化形成和内皮细胞受损，导致冠脉不全或完全阻塞[3]。冠状动脉或外周动脉血栓形成是各种疾病发生或死亡的主要原因，而血栓形成是凝血酶原以及溶血系统共同作用的结果，研究已证实，冠心病血瘀证存在着高凝血和低纤溶状态，处于高凝状态的机体易于形成血栓，目前国际上对抗凝药物普遍认同的检测指标为TT，APTT和PT[4