ch14Transcription本科白

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1、第十四章RNA的生物合成Transcription学习目的及基本要求（1）掌握转录的概念及转录的基本过程。（2）熟悉RNA转录后的加工修饰过程。2教学内容（1）转录的概念、不对称转录的含义；编码链和非编码链的意义；原核生物RNA聚合酶的组成及作用；真核生物RNA聚合酶的分类及作用。（2）启动子的定义及-35区与-10区的碱基组成特点，转录泡结构特征。（3）转录的基本过程；原核生物转录终止的方式及ρ因子的作用。（4）三种RNA转录后的加工修饰；核酶的概念及结构特征。3考核知识和考核要求（1）识记：转录、启动子、核

2、酶的定义；原核生物RNA聚合酶的组成成分和各亚基的功能；真核生物RNA聚合酶的分类及作用；ρ因子在转录终止过程中的作用。（2）领会:mRNA的转录后加工修饰（编辑）在蛋白多样性中的意义。（3）简单运用：核酶的研究进展及其在医学领域的应用。4概述基因表达(geneexpression)转录(transcription)转译(translation)四类RNA：rRNA、mRNA、tRNA、smallRNA(snRNA、miRNA)及RNAworld5第一节DNA指导RNA的合成转录(transcription)：

3、以DNA为模板，四种三磷酸核苷为原料，按照碱基配对原则，在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。即把DNA的碱基序列转抄为互补的RNA碱基排列顺序。6转录的特点1、转录方式为不对称转录2、无需引物3、RNA聚合酶催化4、底物为NTP5、方向为5’→3’7转录的体系DNA模板RNA聚合酶底物NTPMg2+、Mn2+等无机离子8一、RNA聚合酶Weiss的鼠肝抽提物RNA聚合酶(DNAdependentRNApolymerase,DDRP,RNA-pol)原核一种、真核三种RNA聚合酶NTP+(NMP)n(NMP)n

4、+1+PPiRNA-pol,Mg2+9（一）原核生物的RNA聚合酶大肠杆菌(E.coli)RNA聚合酶：4种亚基、、’、组成的五聚体蛋白质，分子量465kD。亚基分子量功能36512决定哪些基因被转录150618与转录全过程有关（催化）’155613结合DNA模板（开链）70263辨认起始点9000未知101）全酶(holoenzyme)：2’，即亚基+核心酶，亚基的功能是辨认转录起始点，转录起始阶段需要全酶2）核心酶(coreenzyme)：2’能催化NTP按模板的指引合成

5、RNA，在转录延长全过程中均起作用3）利福平(rifampicin)或利福霉素的作用4）合成速度和校正功能1112原核生物的RNA聚合酶全酶及其在转录起始区的结合，DNA双链已打开，σ因子尚未脱落13（二）真核生物的RNA聚合酶真核生物的基因组远比原核生物庞大，其RNA聚合酶也更为复杂。真核生物的RNA聚合酶I、II、III都由多个亚基组成，可用电泳法将各亚基分离。真核生物RNA聚合酶中没有细菌RNApol中s因子的对应物，因此必须借助各种转录因子才能识别或选择启动部位，并结合到启动子上。14酶的种类功能对a-

6、鹅膏蕈碱敏感性RNA聚合酶I合成45S-rRNA前体，经加工产生5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA不敏感RNA聚合酶II合成所有mRNA前体(hnRNA)和大多数核内小RNA(snRNA)敏感RNA聚合酶III合成小RNA，包括tRNA、5SrRNA、U6snRNA和scRNA中等敏感RNA聚合酶Mt合成线粒体内的RNAs不敏感，但对利福平敏感15真核生物RNA聚合酶都是多亚基组成，并具有核心亚基。真核生物RNA聚合酶II都具有羧基末端结构域(CTD)线粒体和叶绿体的RNA聚合酶RNA聚合酶的错误

7、率高于DNA聚合酶16二、转录的模板不对称转录定义：就某一确定活化基因的转录，只能以DNA双链的一条链作为模板，这种现象称为不对称转录(asymmetrictranscription)。两重含义：(1)双链DNA只有一股单链用作模板参与转录。(2)模板链并非永远在同一单链上。17DNA双链在转录过程中只有一条链中的其中某一活化基因片段起作用，该链称模板链(templatestrand)，又称负(-)链；与其互补的链称为编码链(codingstrand)，又称正(+)链。一般书写都为编码链。转录生成的RNA链与编

8、码链的碱基序列相似，以U取代T。体外转录时会失控。18不对称转录19（一）启动子(promoter)概念：转录开始时RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。1.原核生物的启动子：40~60bp、起始部位、结合部位-10bp(-TATAAT-,TATA盒)、因子识别部位-35bp区(-TTGACA-)RNApol保护法，下游和上游20转译21222.真核生物的启动子由转录因子