Melittin相关肽的抗菌和增强基因转染作用及其机理研究

Melittin相关肽的抗菌和增强基因转染作用及其机理研究

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时间:2019-05-10

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1、中图分类号哎墨墨UDC570硕士学位论文学校代码兰Q墨曼呈密级公珏Melittin相关肽的抗菌和增强基因转染作用及其机理研究Thqpplicationsandmechani:ofmelittinrelatedeapplicationsantlmechanismmelittn-relatedpeptidesinantibacterial—genetransfec‘onpeptidesinantiacterialandenetransfection作者姓名:学科专业:研究方向:学院:指导教师:副指导教师:马倩生物学生物化学与分子生物学生物科学与技术学院季守平檀英霞答辩委员会主席中南大学原创性声明

2、本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名:马锖日期:j坦&年』月Ⅱ日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研

3、究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。日期:垃年』月丘日Melittin相关肽抗菌和增强基因转染作用及其机理研究摘要:蜂毒因子Melittin是一种典型的抗菌肽,具有抗菌、抗病毒,抗肿瘤及增加基因递送效率等功能,但细胞毒性较高。前期研究发现,melittin的相关肽RV一23(来自加州红腿蛙Ranadraytonii)和AR一23(来自塔氏蛙Ranatagoi)分别具抗菌活性和增强基因转染的能力,而细胞毒性低于melittin。目的:研究RV一23和AR-23与细胞膜的相互作用方式,初步探讨RV一23选择性抗菌作用的机理及生物相容性;研究AR一2

4、3羧基端带正电氨基酸对功能的影响,探讨其作为基因转染增强剂的可能性。方法:合成了melittin,RV一23,AR~23,AR一20(AR一23的截短肽)和AR-26(C-末端序列与melittin相同);圆二色谱分析多肽二级结构;溶血实验检测多肽穿膜能力;去极化实验观察多肽与细胞相互作用;荧光示踪实验观察多肽进入细胞及促进物质进入细胞的方式;转染和抑菌实验分析多肽增强基因转染和抗菌功能,多肽对血液中重要成分的影响评价其生物相容性。结果:RV-23和AR-23均具有典型的a一螺旋结构;RV-23基于其特殊结构可选择性地与细菌结合、诱导细胞膜去极化,导致细菌裂解死亡;RV-23不与人细胞膜作用

5、,溶血活性及细胞毒性均很低;RV-23不会对血小板,白蛋白及凝血系统功能产生影响,具有良好的生物相容性。AR-23对细菌及人红细胞无选择作用,但其裂解内含体释放的能力高于melittin,而溶血能力和细胞毒性低于后者;AR-23增强PEI介导的基因转染效率的能力也较melittin强。结论:RV-23对细菌有选择性杀伤作用,是一种高效低毒的抗菌肽;净正电荷较少的AR-23,具有较强的内含体裂解能力和较低的细胞毒性,有望作为高效低毒的基因转染增强剂。图26幅,参考文献52篇。关键词:抗菌肽;选择性穿膜;抗菌作用;聚乙烯亚胺;基因转染分类号:Q753Theapplicationsandmecha

6、nismofmelittin·relatedpeptidesinantibacterialandgenetransfectionAbstract:Melittinisatypicalantibacterialpeptidefrombeevenom.Melittinhasbroadbiologicalactivity,suchasantibacterial,antiviral,antitumor,aswellasimprovingcationicpolymermediatedgenetransfection.However,hi曲cytotoxicityofmelittinhampersits

7、applications.Inpreviousstudy,wefoundthattwomelittin—relatedpeptides,RV一23fromRanadraytoniiandAR-23fromRanatagoLexhibitedhigherantibacterialactivityandhigherpotentforimprovinggenetransfectionefficiency,butlo

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