blast简介及其应用

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1、BLAST简介及其应用BasicLocalAlignmentSearchTool2实验目的1、了解Blast资源和功能2、了解blast的应用3、掌握使用blast进行序列搜索3生物序列的相似性相似性(similarity)：是指一种很直接的数量关系，比如部分相同或相似的百分比或其它一些合适的度量。比如说，A序列和B序列的相似性是80％，或者4/5。这是个量化的关系。当然可进行自身局部比较。4同源性(homology)：指从一些数据中推断出的两个基因或蛋白质序列具有共同祖先的结论，属于质的判断。就是说A和B的关系上，只有是同源

2、序列，或者非同源序列两种关系。而说A和B的同源性为80％都是不科学的。生物序列的同源性5相似性和同源性关系序列的相似性和序列的同源性有一定的关系，一般来说序列间的相似性越高的话，它们是同源序列的可能性就更高，所以经常可以通过序列的相似性来推测序列是否同源。正因为存在这样的关系，很多时候对序列的相似性和同源性就没有做很明显的区分，造成经常等价混用两个名词。所以有出现A序列和B序列的同源性为80％一说。6Blast程序评价序列相似性的两个数据Score：使用打分矩阵对匹配的片段进行打分，这是对各对氨基酸残基（或碱基）打分求和的结果

3、，一般来说，匹配片段越长、相似性越高则Score值越大。Evalue:在相同长度的情况下，两个氨基酸残基（或碱基）随机排列的序列进行打分，得到上述Score值的概率的大小。E值越小表示随机情况下得到该Score值的可能性越低。我们在获得一个Blast结果时需要看这两个指标。如果Blast获得的目标序列的Score值越高并且E-value越低表明结果越可信，反之越不可信.7BLAST简介BLAST既是一种算法也是一种基于该算法设计出的搜索工具，是由美国国家生物信息中心（NCBI）研发的一个生物信息数据库搜索工具系统，该系统对于生

4、物基因序列数据在计算机中的表达和处理作了许多的研究，提供了一个快速的基于碱基数据的搜索引擎。BLAST是基于匹配短序列片段，用一种强有力的统计模型来确定未知序列与数据库序列的最佳局部联配，可在序列数据库中对查询序列进行相似性比对工作。8BLAST简介BLAST搜索的六大优点：使用方便，功能齐全速度快，结果可信NCBI精心维护，持续开发配套数据库不断更新免费服务（NCBI、EBI、TIGR）免费下载，本地安装9主要的BLAST程序（功能）程序名查询序列数据库搜索方法Blastn核酸核酸在核酸数据库中比对核酸序列Blastp蛋白质

5、蛋白质在蛋白质数据库中比对蛋白质序列Blastx核酸蛋白质在蛋白质数据库中比对待检的核酸序列（用所有6种可读框翻译）Tblastn蛋白质核酸在核酸数据库（用所有6种可读框翻译）中比对待检的蛋白质序列TBlastx核酸核酸在核酸数据库（用所有6种可读框翻译）中比对待检的核酸序列（也用所有6种可读框翻译）10两种版本的BLAST比较（一）网络版本包括NCBI在内的很多网站都提供了在线的BLAST服务，这也是我们最经常用到的BLAST服务。网络版本的BLAST服务就有方便，容易操作，数据库同步更新等优点。但是缺点是不利于操作大批量的

6、数据，同时也不能自己定义搜索的数据库。11单机版单机版的BLAST可以通过NCBI的ftp站点获得，有适合不同平台的版本（包括linux，dos等）。获得程序的同时必须获取相应的数据库才能在本地进行BLAST分析。单机版的优点是可以处理大批的数据，可以自己定义数据库，但是需要耗费本地机的大量资源，此外操作也没有网络版直观、方便，需要一定的计算机操作水平。两种版本的BLAST比较（二）WhyuseBLAST?BLAST是NCBI中用来将一个蛋白质或DNA序列和各种数据库中的其他序列进行比对的主要工具。BLAST搜索是研究一个蛋白

7、质和基因的最基本的方法之一。BLAST的使用BLAST具有非常广泛的应用：研究可能存在多种剪切方式的表达序列标签。。寻找对于一个蛋白质的功能和/或结构起关键作用的氨基酸残基。确定特定的蛋白质或核酸序列有哪些已知的直系同源或旁系同源序列。确定哪些蛋白质和基因在特定的物种中出现。确定一个DNA或蛋白质序列身份。发现新基因确定一个特定基因或蛋白质有哪些已经发现了的变种。Blast的使用首先在NCBI的基因数据库中找到一段基因核苷酸序列（或者是通过测序得到的核苷酸序列）。将该序列用FASTA格式存入记事本。进入Blast界面选择一种自

8、己所需的功能进行搜索比对。将需要查询序列键入框中选择数据库和确定比对参数。Blast（比对）网页版具体步骤1.登陆blast主页http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/2.根据数据类型，选择合适的程序3.填写表单信息4.提交任务5.查看和分析结果1