全册生物化学

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1、第二章蛋白质化学第一节概述一、蛋白质在生物体内的作用functionofproteins1．生物催化剂功能;2．激素功能：3．转运和贮存作用：4．运动功能：5．免疫保护功能：6．结构成分：7．接受和传递信息的功能：8．调节、控制细胞生长、分化、以及遗传信息表达的功能：二、蛋白质的化学组成（P157）1．元素组成碳50%氢7%氧23%氮16%硫0-3%;微量的磷;微量的铁、铜、碘、锌、钼2．基本结构物质：是氨基酸（1）酸水解*（2）碱水解：（3）酶水解：三．蛋白质的分类1．按组成分：2．按分子外形分：3．生物学功能可分为：4．亚基多少可分为：第二节氨基酸P123Aminoacid

2、s一、氨基酸的结构20种基本氨基酸结构、三字母表示法二、氨基酸的分类：四类三、氨基酸的性质1．物理性质：兼性离子：2．旋光性和光吸收特性3．两性解离和等电点（1）两性解离：（2）求一个aa等电点4．氨基酸的化学反应：（1）α-NH2参加的反应①与甲醛反应：②亚硝酸反应：③成盐反应：④酰基化反应：丹磺酰氯⑤烃基化反应重要的烃基化试剂：2.4一二硝基氟苯（DNFP）和苯异硫氰酸酯（PITC）（2）α-羧基参加的反应①成盐、成酯②成酰氯的反应（使羧基活化）P138③叠氮反应：（使羧基活化）（3）氨基、羧基共同的反应：①成肽反应：②茚三酮反应：（4）侧链R基参加的反应三、氨基酸的分析分

3、离（一）分配层析（二）离子交换层析第三节肽peptide一、肽的形成1．成肽反应：2．肽有寡肽和多肽之分：3．肽链具有方向性4．共价主链（mainchain），侧链（sidechain）。5．肽的命名：二、肽键的结构和性质三、天然存在的活性肽（activepeptide）第四节蛋白质的结构一、蛋白质一级结构（Primarystructure)蛋白质测序列的重要方法1．N-末端测定2．C-末端测定3．二硫键的断裂4．氨基酸组成的测定5．多肽链的裂解6．肽段的氨基酸测序——对小肽段进行氨基酸序列测定7．肽段在肽链中次序的确定8．二硫键位置的确定二、蛋白质的空间结构（二）蛋白质的二级

4、结构（Secondarystructure)：1．α-螺旋（α-Helix)：要点，使α螺旋不稳定性的因素。2．β-折叠β-sheet3．β-转角（β-turn）4．无规卷曲（Randomcoil)（三）、超二级结构（四）．结构域(domain)（五）、蛋白质的三级结构（Tertiarystructure)维持三级结构的作用力：疏水相互作用、二硫键、氢键、盐键、范德华力。（六）、蛋白质的四级结构（quaternarystructure)第五节蛋白质结构与功能的关系蛋白质的一级结构与生物功能的关系1．一级结构不同，生物功能各异2.一级结构中关键部分相同，它的生物学功能也相同3.一

5、级结构的关键部位发生变化，生物活性也会改变甚至丧失：4．一级结构的局部断裂与蛋白质激活二、蛋白质的空间结构与功能1．纤维状蛋白质2．球状蛋白质(globalprotein)三、蛋白质结构一旦被破坏，生物学功能即丧失，进一步说明结构和功能是密不可分的。第六节蛋白质的性质一、颜色反应1．茚三酮反应：2．双缩脲反应3．酚试剂(福林试剂)反应：二、蛋白质的两性解离和等电点：三、蛋白质的胶体性质四、蛋白质的沉淀反应常用的蛋白质沉淀剂有中性盐、有机溶剂、重金属和某些酸类物质。五、蛋白质变性(denaturation)：1．概念：2．影响因素：3．变性机理：4．性质变化：5．复性：六、蛋白质

6、分子大小及分子量的测定1．元素分析法2．渗透压法这是利用半透膜来测定蛋白质分子量的方法。3．沉降速度法4．凝胶过滤法（Gelfiltrationchromatography)：5．SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）：Polyacrylamidegeleletrophoresis第七节蛋白质的分离、提取和纯化一、提取：二、初步纯化（Roughpurification)三、精制（Finepurification)1．据蛋白质分子大小不同的方法：①透析和超过滤②密度梯度离心③凝胶过滤2．据溶解度不同来分离：①等电点沉淀法②盐析法③有机溶剂分级沉淀3．据电荷不同来分离①电泳：

7、②离子交换层析4．依据蛋白质的选择性吸附5．根据配基特异性的分离纯化方法：亲和层析法6．高效液相层析（highperformanceliquidchromatography，HPLC）和快速蛋白质液相层析（fastproteinliquidchromatography，FPLC）四、蛋白质含量测定与纯度鉴定1．测定蛋白质含量的常用方法有：2．蛋白质纯度的鉴定方法：3．蛋白质等电点测定第三章酶学EnzymeP319酶是一类具有高效率、高度专一性、作用条件温和、活性可调节的高分子生物催化剂。第一