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《2019版高考生物一轮复习第12单元现代生物科技专题第36讲基因工程学案苏教版》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、专题课件第36讲 基因工程考试说明1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。5.DNA的粗提取与鉴定(实验与探究能力)。?考点一 基因工程的概念及基本工具?1.基因工程的概念(1)手段:按照 ,进行严格的设计,通过体外 和 等技术,赋予生物以新的遗传特性。 (2)目的:创造出更符合人们需要的新的 和 。 (3)水平: 水平。 2.基因工程的基本工具(1)限制性核酸内切酶①来源:主要从
2、 中分离纯化而来。 ②作用:识别双链DNA分子的某种 序列,使 的两个核苷酸之间的 断裂。 ③结果:产生 末端或 末端。 (2)DNA连接酶常用类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源 T4噬菌体功能连接黏性末端连接 结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键(3)载体①条件:能自我复制、有一个至多个 切割位点、有特殊的 。 ②常用载体—— 。 ③其他载体:λ噬菌体的衍生物、 等。 1.限制酶和DNA
3、连接酶的关系图12-36-1(1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。(2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。(3)DNA连接酶起作用时,不需要模板。2.DNA相关六种酶的比较名称作用部位作用底物作用结果限制酶磷酸二酯键DNA 将DNA切成两个或多个片段DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段 将两个DNA片段连接为一个DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸 以单链DNA为模板,将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端DNA磷酸二酯DNA 将DNA片段水解为单个脱氧(水解
4、)酶键核苷酸解旋酶碱基对之间的氢键DNA 将双链DNA分子局部解旋为单链,形成两条长链RNA聚合酶磷酸二酯键核糖核苷酸 以单链DNA为模板,将单个核糖核苷酸依次连接到单链末端1.如图12-36-2为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图,据图回答下列问题:图12-36-2 (1)a代表的物质和质粒的化学本质都是 ,二者还具有其他共同点,如① ,② (写出两条即可)。 (2)若质粒DNA分子的切割末端为—A—TGCGC,则与之连接的目的基因切割末端应为
5、 ;可使用 把质粒和目的基因连接在一起。 (3)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA分子上称为 ,其作用是 。 (4)下列常在基因工程中用作载体的是( )A.苏云金芽孢杆菌抗虫基因B.土壤农杆菌环状RNA分子C.大肠杆菌的质粒D.动物细胞的染色体2.[2017·上海宝山区二模]分析有关基因工程的资料,回答问题。如图12-36-3为构建某重组质粒的过程示意图。lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal,从而使菌落显现出蓝色,若无该基因,菌落则成白色。图中甲~戊DNA片
6、段只注明了黏性末端处的碱基种类,其他碱基的种类未作注明。图12-36-3(1)若酶M特异性识别的DNA碱基序列是,则酶N特异性识别的DNA碱基序列是 。 (2)过程②是将所有片段混合在一起,用 酶拼接可得到不同的重组DNA。 (3)如果只考虑2个片段的组合,那么甲、乙、丁三个片段中能够形成环状DNA的片段组合是 (多选)。 A.甲和乙 B.甲和甲 C.甲和丁 D.乙和乙 E.乙和丁 F.丁和丁(4)为了筛选含重组质粒的受体菌,应在通用培养基中额外加入 ,培养一段时间,挑选出
7、 色的菌落进一步培养。原来质粒中,限制酶M和N的酶切位点 。 A.M位于青霉素抗性基因中,N位于lacZ基因中B.N位于青霉素抗性基因中,M位于lacZ基因中C.M和N都位于青霉素抗性基因中D.M和N都位于lacZ基因中(5)上述目的基因能够在受体细菌中表达,其原因是不同生物 。 A.共用一套DNAB.共用一套RNAC.共用一套蛋白质D.共用一套密码子方法技巧 限制酶的选择技巧(1)根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类。图12-36-4①应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可选择Pst
8、Ⅰ。②不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能选择SmaⅠ。③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点)。(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类。①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶一致,以确保产
