毕业论文--弗氏柠檬酸杆菌TPL基因的体外扩增 

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1、常州工程职业技术学院毕业设计报告（论文）（2013届）系别：制药与生物工程技术系课题名称：弗氏柠檬酸杆菌TPL基因的体外扩增指导教师：韦平和班级：生物制药1021学生姓名：周利1摘要聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction，简称PCR)是最常用的分子生物学技术之一，通过变性、退火和延伸的循环来完成核酸分子的大量扩增。本实验是以基因组DNA为模板，利用PCR技术从弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacterfreundii)中扩增得到含有酪氨酸酚解酶（theTyrosinePhenolLyase，简称TPL）基因的有效DNA片段，得到大量的有效基因。PC

2、R技术产生时间虽不长，却以惊人的速度广泛应用于分子生物学各领域。PCR技术能够快速特异地扩增任何目的基因或DNA片段，它不仅可以用于基因分离、克隆和核酸序列分析，还可用于突变体和重组体的构建、基因表达调控的研究、基因多态性的分析、遗传病和传染病的诊断、肿瘤机制探查、法医鉴定等诸多方面。PCR技术已成为方法学上的一次革命，它必将大大推动分子生物学各学科和研究进展。关键词：弗氏柠檬酸杆菌TPL基因PCR扩增AbstractPolymeraseChainReaction(PCR)isoneofthecommontechniquesinmolecularbiology,whi

3、chcanamplifynucleicacidsthroughthecycleofdenaturation，annealingandextension.Tyrosinephenollyasegene-containingDNAfragmentwasamplifiedfromCitrobacterfreundii,getalotofeffectivegeneusingPCRtechnology.PCRtechnologygenerationtimeisnotlong,butitiswidelyusedinvariousfieldsofmolecularbiologyat

4、analarmingrate.PCRtechnologycanquicklyandspecificallyanydesiredgeneorDNAfragmentwasamplified,Itnotonlycanbeusedforgeneisolation,cloningandDNAsequencinganalysiscanalsobeusedfortheconstructionofmutantandrecombinant,thestudyoftheregulationofgeneexpression,genepolymorphismanalysis,geneticdi

5、seaseandinfectiousdiseasediagnosis,tumormechanismexplorationTheforensicidentification,andmanyotheraspects.PCRtechnologyhasbecomearevolutiononthemethodology,itwillgreatlypromotethevariousdisciplinesofmolecularbiologyandresearchprogress.Keywords：citrobacterfreundiigenePCRTPLamplification常

6、州工程职业技术学院毕业设计（论文）目录1前言21.1络氨酸酚裂解酶31.2.PCR技术31.3立题依据和研究内容41.3.1立题依据……………………………………………………………………………...…….41.3.2研究内容……………………………………………………………………………...…….42实验原理52.1SDS法制备基因组DNA52.2琼脂糖凝胶电泳原理52.3PCR反应原理63实验器材与步骤83.1实验材料83.1.2实验试剂83..2实验仪器93.3实验步骤93.3.1菌种培养.........................................

7、.......................................................................................9.3.3.2SDS法制备细菌基因组DNA103.3.3电泳检测113.3.4PCR124实验结果和注意事项134.1实验结果134.2分析及注意事项..............................................................................................................155结论1