生物技术概论平时测验(一)

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1、北京师范大学2013〜2014学年第一学期生物技术概论平时测验（基因工程）一、是非题（每小题1分）1.酵母双杂交技术通常可用于获得冃的棊因和研究蛋白质与蛋白质以及蛋白质与核酸Z间的相互作用。（）2.人工感受态的大肠杆菌在温度为42°C时吸附DNA,0°C时摄入DNA。（）3.在重组体的筛选小，遗传学方法、物理筛选法、核酸杂交法、表达产物分析法等是具有极高准确性的筛选方法。（）4.限制性内切核酸酶BsuRI和Haelll的来源不同,但它们识别相同的序列,并产生相同的粘性末端，因此它们属于同裂酶。（）5.基因剔除（knockout）的方法主要是用來阐

2、明基因的结构与功能。（）6.粘粒质粒中，cos位点的功能是参与包装进入病毒外壳。（）7.在克隆载体pUC质粒中，利用完幣的lacZ基因作为筛选标记，白色转化菌落表明重组质粒肯定含有插入片断。（）8.穿梭质粒载体在不同的宿主中具冇不同的复制机制并使用不同的复制起点。（）9.受体细胞的感受态是易于接受外源DNA的状态。（）10.Clark发现用TaqDNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的T-载体。（）11.反应体系中含有有机溶剂以及U•油含量过高是限制性内切酶产生星号酚活

3、性的主要原因。（）12.可用氯化钙法将外源基因导入培养的哺动物细胞。（）13.在基因工程中常用的酶有DNA聚合酶、限制性内切酶、碱性磷酸酶等。（）14.在众多重组体的筛选方法中，核酸序列分析法是具有极高准确性的筛选方法。（）15.在染色体步移中，可通过DNA测序可知道已到达所感兴趣的基因。（）1.为了保证重组DNA分了在受体细胞中能够稳定地独立存在下來，通常用rec~r'nr表型的细胞株作为受体菌。（）2.用免疫化学法筛选重组体不需要外源基因的表达。（）3.Ti质粒来源于脓杆菌，冃前被广泛用于植物基因工程。（）4.T.QNA连接酶和E.coll连

4、接酶都能高效地催化平末端和黏末端的连接。（）5.X-gal显色反应的基本原理是使载体与受体互补的失活。（）6.环状质粒的转化效率通常是超螺旋质粒DNA转化效率的1%。（）7.导致限制性内切酶产生星号酚活性的主耍原因是因为反应体系中的酚浓度过低。（）8.酵母菌具冇原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统，又因其不含冇特界性的病毒、不产内毒素，它被美国FDA认定为安全的基因工程受体系统。（）9.常用高等哺乳动物的表达载体有质粒型表达载体、病毒型载体和定向打靶载体。（）10.噬菌粒pETBlue-2载体是集质粒和丝状噬菌体有利特征于一身的载体，既能合成

5、单链DNA,又能合成双琏DNA。（）11.蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌能使对蛋白水解酶比较敏感的冃标蛋白能获得较高水平的表达。（）12.利用转基因动物细胞生产生物人分子,主要是通过在表达载体上安装病毒或细胞來源的强启动子及有效的翻译起始信号或通过强化基因的扩增来实现其高效表达。（）13.转基因食品的评价原则普遍使用的是实质等同性原则和个案分析原则。（）14.重组率是衡量连接反应效率的重要指标,较高的重组率可以大大简化DNA重组的后续操作。（）15.基因工程小使用77启动子的表达载体多为抗葡萄糖代谢阻遏的突变型PlacUV5o（）二、填空题（每空

6、1分）1.在植物基因转化方法中，应用最多的方法是和o2.酵母人工染色体含有、和三种必需成分。3.作为基因工程中使用的载体必须具备以下条件：、、和等。4.在植物基因工程中，帘用、、等方法将外源基因导入植物细胞。1.简并引物PCR主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计引物来合成相应的基因。2.只要知道基因组中某一•特定区域的部分核昔酸组成及序列，用技术町将这段DNA进行百万倍的扩增。3.基因工程的技术策略主要是和。4.基因工程中使用的载体主要冇、和三种类型。5.在DNA重组吋，为了防止质粒DNA的口身环化，可用脱去双链DNAo6.Bac-to-Bac

7、

8、:

9、状病毒表达系统利用细菌原理，在大肠杆菌内完成重组病毒的构建，革命性地改变了重组昆虫杆状病毒的构建方法。7.反转录病毒载体构建时，删除pol、env和gag基因，插入和,在屮+下游插入启动了，用两个缺失了屮+的反转录病毒DNA与病毒载体共转化受体细胞，包装成病毒颗粒。8.PCR的特点是、和。9.F1标蛋白在细胞质中由丁•不能正确折叠而形成包含体，可釆取表达策略来解决此问题。10.在酵母基因工程屮，主要用和方法将外源基因导入植物细胞。11.抑制性差减杂交(ssh)是利用所引起表型的不同来克隆目的基因。12.已知目的基因上游的DNA序列，可利用技术來获

10、得该目的基因。13.限制性酶切图谱筛选法可用来区分重组子与非重组子，鉴定o14.基因组文库质量的评价指标是和o15.Gateway克隆技