微生物学复习题带答案

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1、第23页共23页2005级微生物学复习题一、绪论1、十九世纪哪两个焦点问题的争论促使了微生物学的诞生？问题一：微生物不能自发产生问题二：传染病的性质是什么2、Pasteur是设计怎么的实验来否定“自然发生学说”？巴斯德实验：巴斯德将营养液(如肉汤)装入带有弯曲细管的瓶中，弯管是开口的，空气可无阻地进入瓶中，而空气中的微生物则被阻而沉积于弯管底部，不能进入瓶中。巴斯德将瓶中液体煮沸，使液体中的微生物全被杀死，然后放冷静置，结果瓶中不发生微生物。此时如将曲颈管打断，使外界空气不经“沉淀处理”而直接进入营养液中，不久营养液中就出现微生物了。可见微生物

2、不是从营养液中自然发生的，而是来自空气中原已存在的微生物(孢子)。1864年巴斯德在法国国家科学院报告了他的工作。原定和他辩论的有名的自然发生论者F．A．巴斯德实验意义巴斯德通过试验证实酒和醋的酿造过程实际上是微生物发酵的过程，而且认为不同发酵是由不同种类微生物所引起的，酒精发酵是有酵母菌引起的，乳酸发酵、醋酸发酵和丁酸发酵都是由不同的细菌所引起的。意义：（1）发现并证实发酵是由微生物引起的（2）彻底否定“自然发生”学说（3）为免疫学提供理论（预防接种）3、什么是柯赫法则？柯赫法则是德国科学家柯赫(Koch)(1843-1940)根据自己的工作

3、经验以及他的前辈Henle的观点提出的一套科学验证方法,成功地验证了细菌与病害的关系。其内容为：1、在每一病例中都出现这种微生物 2、要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中培养出来3、用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生4、从试验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物来二、实验技术1、提高显微镜分辨率的措施？利用油镜可提高显微镜分辨率。油镜的工作原理：在显微镜的光学系统中，物镜的性能最为重要。普通光学显微镜通常配置有几个物镜，可分为干燥系和油浸系两种物镜。干燥系物镜与标本之间的介质是空气，而油浸系物镜与标本之间的介质是

4、香柏油。第23页共23页若玻片与物镜之间的介质为空气，则当光线通过玻片后发生曲折，产生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样就降低了视野的照明度；反之，若玻片与物镜之间的介质为香柏油，当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。油镜的放大倍数最大，对微生物研究最为重要。利用油镜不但能增加照明度，更主要是能增加数值口径（N.A），也增加显微镜的分辨力。2、微生物纯种培养的方法？纯培养技术主要包括：培养基的配制与灭菌技术、无菌操作技术、工业微生物分离与纯化技术、厌氧微生物纯培养技术、工业微生物菌种保藏技术等。（1）培养基的配制和灭菌技

5、术培养基：是将微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工的方法配制而成的用于培养微生物的营养基质。分类：1.按来源分类天然培养基合成培养基半合成培养基2.按特殊用途分类加富培养基选择培养基鉴别培养基3.按物理状态分类固体培养基液体培养基半固体培养基灭菌：是指杀死或消灭所有微生物，包括营养体、孢子和芽孢。消毒：一般是指消灭有害微生物的营养体和病原菌。培养基的配制方法：1.按照配方的组分及用量先分别称量并配成液体。2.根据要求调到一定的酸碱度(pH)。3.若制成固体则加入2％琼脂并加热融化。4.根据需要的数量分装入试管或三角瓶中，加上棉塞或盖上纱布

6、。5.包扎好灭菌后备用培养基及常用器皿的灭菌：1.棉塞制作与器皿包扎棉塞起过滤的作用，只能让空气透过，而空气中的微生物则不能通过。制作棉塞应采用普通未脱脂的棉花，医用脱脂棉会吸水，不宜采用。用牛皮纸包扎棉花塞部分，防止水蒸气弄湿。2.培养基与器皿的高压蒸汽灭菌一般培养基常用0.1MPa，约120℃维持15～20min，便可达到彻底灭菌的目的。优点：时间短，灭菌效果好。可以杀死所有的微生物，包括最耐热的细菌芽孢及其他休眠体。注意：灭菌的因素是高温而不是高压，故灭菌锅内的冷空气要彻底排除，否则，压力虽然达到0.1MPa，但温度并没有达到要求3.玻璃

7、器皿的干热灭菌比湿热灭菌法所需的温度要高些(150～170℃)，时间也要长些(1～2h)，且包扎器皿的纸或棉塞容易烧焦。（2）无菌操作技术目的：防止纯培养物被其他微生物所污染。1.无菌环境条件：无菌环境是指在无菌室、无菌箱、超净工作室或超净工作台等无菌或相对无菌的环境条件下进行操作。2.无菌操作接种技术：接种时，关键是要严格进行正确的无菌操作，其要点是要充分利用酒精灯焰周围的高温区(无菌区)，即接种时，管口和瓶口始终保持在火焰(如酒精灯焰)旁边，进行熟练的移接种操作，以便保证微生物的纯种培养。此外，挑取和移接微生物纯培养物用的接种环及接种针，使

8、用时用火焰灼烧灭菌；转移液体纯培养物时，应采用无菌吸管或无菌移液枪。第23页共23页（3）工业微生物分离和纯化技术微生物的分离与纯化－获得只含有某一种