番茄tylcv抗性相关tetraspanin3基因克隆与功能分析

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1、．．—■一－？Ｖ＜，；：ｖ，芦，片＇Ｖ分类号Ｓ６４１．２学＾２０１２１０４０６８為音策毒义每硕±学位论文香茄ＴＹＬＣＶ抗性相关脚ｒ化４说基因克隆与功能分析裴延飞指导教师柳李狂教授张保龙研究员专业名称蔬菜学研究方向遗传育种与生物技术答辩日期二〇—五年六月ＩＳＯＬＡＴＩＯＮＡＮＤＦＵＮＣＴＩＯＮＡＬＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＴＥＴＲＡＳＰＡＮＩＮ３ＧＥＮＥＲＥＬＡＴＩＶＥＴＯＴＯＭＡＴＯＹＥＬＬＯＷＣＵＲＬＶＩＲＵＳＴＹＬＣＶＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＩＮＳＯＬＡＮＵ

2、Ｍ（）ＬＹＣＯＰＥ民ＳＩＣＵＭｂｙＹａｎｆｅｉＰｅｉＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂＰｒｏｆｅｓｓｏｒＬｉｗａｎＬｉｕｐｙｇ＆ＰｒｏｆｅｓｓｏｒＢａｏｌｏｎＺｈａｎｇｇＴｈｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅ民ｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｑＦｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＣｏｍｌｅ化ｄｉｎＡｒｉｌ２０１５ｐｐ，Ｃｏｍｍｅｎｃ

3、ｅｍｅｎｔｉｎＪｕｎｅ２０１５，原创性声明：本人郑重声明所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，。除文中己经注明引用的内容外本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。°／＾月曰学位论文作者（需亲笔）签名：旅如７每学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留，同、使巧学位论文的规定意学校保，允许论文被查阅和借阅留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版。本

4、人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可＾文采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□，在。年解密后适用本授权书本学位论文属于不保密□〇＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名：么＞杂【ｒ年＾月个曰导师（需亲笔）签名：分月ｉｖ目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ英：Ｓｃ缩略表＼一第１胃：ｆｃ献综述１番茄黄化曲叶病毒病１１．１番茄黄化曲叶病毒１１．２番茄黄化曲叶病的病症、危害及分布１１．３番茄黄化曲叶病的防治１１

5、．４抗香茄黄化曲叶病香茄品累的培育２１．５抗香茄黄化曲叶病香茄基因工程育种２２ＴＥＴＲＡＳＰＡＮＩＮ３２２．Ｉ；Ｔ￡Ｔ／ａＳ７ＭＷ／Ｗ基因家族及进化２２．２ＴＥＴＲＡＳＰＡＮＩＮ３蛋白结构４２．２．１跨膜区域４２．２．２细胞膜外环４２．２．３细胞质区域５２．２．４富含ＴＥＴＲＡＳＰＡＮＩＮ３童白的微区５■２．３化７ＶＭ５基因的功能６．．２３１基本功能６２．３．２影响细胞间及细胞与周围环境交流６２．３．３对细胞的物质交换作用６２．４．４与病毒的关系７２．４植物中的

6、７３本硏究的目的和意义８第二章ｒ￡Ｔ化基因克隆与序列分析９１材料与方法９１．１番茄品种９．２基因克隆９１■．１３咒ｒ化４Ｓ尚ＷＺＡＵ基因特征分析９ｉ巧茄ＴＹＬＣＹ抗性相关巧巧》况如田３巧因克隆与功能分析１．３．１结构域分析９１．３．２基因进化树９１．４总ＲＮＡ提取９一１．５ｃＤＮＡ第链的合成１０１．６实时黄化定量ＰＣ民引物设计、反应体系及程序１１１．７器官表达量分析１１１．８ＴＹＬＣＶ．番茄接种１１、１．９实时黄光定量ＰＣ民引物设计反应体系及程序ＩＩ１．０１

7、诱导表达分巧１１２结果与分析１１２．１ＴＥＴＲＡＳＰＡＮＩＮ３宴茵巧别１２２．２氨基酸序列保守结构域分析１２２．３ｒｃｒ化＂户．４＾０／５基因系统进化分析１２２．４香茄总ＲＮＡ提取１２２．５基因器官表达ｉｓ２．６番茄总民ＮＡ提取１３２１ＴＥＴＲＡＳＭＮ１Ｎ３１４．塞语诱导表达３纖１５第兰章基因沉默对番茄表型和抗病性的穀响１６１材料与方法１６１．１、、１６番茄品种菌株载体．１２总ＲＮＡ提取１６１．３ｃＤＮＡ合成１６■１．４ｒ￡Ｔ兄＂户乂Ｖ／Ｗ基因沉默载体构建

8、１６１．５咒基因