植物叶片中游离氨基酸的测定及其对大气氮沉降的响应

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1、分类号：密级：UDC：学号：405827212036南昌大学硕士研究生学位论文植物叶片中游离氨基酸的测定及其对大气氮沉降的响应DeterminationofFreeAminoAcidsinPlantLeavesandTheirResponsestoAtmosphericNitrogenDeposition高肖飞培养单位（院、系）：资源环境与化工学院指导教师姓名、职称：肖化云教授申请学位的学科门类：工学学科专业名称：环境科学与工程论文答辩日期：2015年6月2日答辩委员会主席：评阅人：2015年月日学位论文

2、独创性声明一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文#本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）:高尚飞：签字曰期：如丨>年6月7曰二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家

3、有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写i导师签名（手写）:签字曰期：>7/彡年6月)曰签字曰期：讀年&月曰论文题

4、目姓名高肖飞学号论文级别博士□硕士■院/系/所专业Email备注：□公幵□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，_______年月后公开)摘要摘要氨基酸（aminoacids）是植物氮代谢过程中重要的代谢产物，以游离态、多肽和蛋白质形式存在，研究发现苔藓组织中游离氨基酸（FAA）仅占总氮含量的2%左右，但FAA不仅是苔藓重要的氮源，而且可以通过调节代谢平衡，保证逆境环境下植物的生存。苔藓并没有真正意义上的根，主要依靠吸收大气沉降来获得必需的营养，因此往往把苔藓总氮含量（TN）作为大气氮沉降指标，FAA作为

5、植物氮代谢过程重要的代谢产物，也可以响应大气氮沉降。苔藓样品中FAA态氮与TN含量显著正相关，表明苔藓组织FAA与大气氮沉降关系密切。城市环境限制了苔藓植物的生存，因此，利用高等植物组织FAA响应大气污染具有理论价值和实践意义。本论文采用反相高效液相色谱法，9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）与邻苯二甲醛（OPA）为衍生剂自动在线衍生，荧光检测器检测，在19min内即可完成单个样品21种氨基酸的分析，正缬氨酸（Nva）和肌氨酸（Sar）双内标法准确分析天门冬氨酸（Asp）、天冬酰胺（Asn）、精氨酸（Arg）、

6、丙氨酸（Ala）、谷氨酸（Glu）、谷氨酰胺（Gln）、γ-氨基丁酸（Gaba）、甘氨酸（Gly）、组氨酸（His）、苏氨酸（Thr）、酪氨酸（Tyr）、缬氨酸（Val）、蛋氨酸（Met）、苯丙氨酸（Phe）、异亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、赖氨酸（Lys）、脯氨酸（Pro）、丝氨酸（Ser）、色氨酸（Trp）和羟脯氨酸（Hyp）21种氨基酸浓度。其中Lys定量限为2.325mg/L，其他氨基酸的定量限均在0.53mg/L以下。标准氨基酸测定6次的保留时间相对标准偏差在0.07%~0.55%之间，平

7、均为0.14%；峰面积的相对标准偏差在1.5%~5.2%之间，平均为2.99%。各个氨基酸在4.5pmo/μL-450pmo/μL梯度的线性相关系数在0.9983~0.9999之间。仪器具有较高的精密度和准确性，因此，可用于氨基酸浓度的分析测定。一般情况下，植物样品常常包含大量的色素、糖类和有机酸等杂质，杂质影响植物样品中游离氨基酸的测定，还易造成色谱柱的堵塞，因此，植物样品必须通过提纯等手段达到纯化的目的。本论文利用超纯水超声提取植物样品中FAA，10%三氯乙酸沉淀蛋白，然后阳离子树脂纯化样品，去除了大

8、量的色素和无机盐等杂质，减轻了样品对液相色谱柱的损害，样品加标回收率平均为95.9%，测定样品的FAA峰面积相对标准偏差在0.51%~4.17%，保证了样品测定的准确I摘要性，该提纯方法可为植物样品FAA浓度的测定提供可靠的手段。本论文通过对比不同大气氮沉降环境下植物叶片中FAA含量及组成的变化，发现植物叶片中FAA浓度对大气氮沉降有很好的响应。从郊区到交通干道，随着大气氮沉降的增加，苔藓样品的总FAA浓度从1187μg/g增