去细胞髓核基质来源三维多孔支架构建组织工程髓核的研究

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1、分类号密级ＵＤＣ编号讀飾＾嫁硕壬学位论文去细胞髓核基质来巧Ｈ维多亦支架拘建组织王程髓核的研究Ｎｕｃｏｓｕｓｅｕｒｘ－－ｌｅｕｓｕｌｅｘｔｒａｃｌｌｌａｍａｔｒｉｄｅｒｉｖｅｄ３Ｄｐｐｐｏｒｏｕｓｓｃａｆｆｏｌｄｆｏｒｎｕｃｌｅｕｓｐｕｌｐｏｓｕｓｔｉｓｓｕｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ译伟导师巧名周初松主任医师則教授专业名称巧化科培巧类型专业型论文巧交日期２０巧年４月南方医科大学２０１２级硕±学位论文去细胞髓核基质来源Ｈ维多孔支架构建组织工程髓核的研究

2、－－Ｎｕｃｌｅｕｓｕｌｏｓｕｓｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘｄｅｒｉｖｅｄ３Ｄｐｐｏｒｏｕｓｓｃａｆｆｏｌｄｆｏｒｎｕｃｌｅｕｓｕｌｏｓｕｓｔｉｓｓｕｅｅｎｉｎｅｅｒｉｎｐｐｐｇｇ课题来源：自选课题学位申请人谭伟导师姑違周初松教授专业違称骨外科培养类型专业型培养层次硕去所在学院南方医科大学第二临床学院答辩委员会主席陈建庭教授答辩委员会委员夏虹教授刘少喻教授郑召民教授了自海教授２０１５年５月１９日广州ｒ硕壬学位论文去细胞髓核基庚来源Ｈ维多孔

3、支架构建组织工程髓核硕壬研究生；谭伟指导老师：周初松摘要背景：椎间盘退变是导致脊柱解剖和功能《乱的重要原因一系列脊柱退行性，是疾病的病理基础。随着人口老龄化Ｗ及人们生活节奏的加快，由其所致的脊巧疾患发病率越来越高，对个人、家庭及社会造成了沉重的负担。因此，有关椎间盘退变性疾病的治疗研究得到越来越多的关注，成为多学科的研究热点。尽管国内外对椎间盘退变的发生、发展及治疗进行了广泛而深入的基础和临床研究，，但由于椎间盘退变是多因素参与的复杂过程目前临床上既无有效的方法阻止其发生和发展，又无理想的措施来对椎间盘退变本身进

4、行合理的治，保守治疗Ｗ对症治疗为主疗。传统的治疗方法包括保守治疗及手术治巧，巧效有限、人工椎间盘置换；手术治疗包括单纯髓核摘除或者化学溶解髓核组织等一，因退变而致的脊柱不稳采用植骨融合等。这些方法在定程度上缓解了椎间盘退变性疾病（Ｉ孤）引起的的症状，但同时也造成脊柱解剖结构和稳定性的破坏，加重邻近节段的退变，并可能引起许多其，从而导致节段活动功能的丧失。他并发症，且远期效果仍不确切大量研究认为椎间盘退变始于髓核，髓核的退变在于髓核细胞数量减少及活力下降，进而分泌细胞外基质减少，细胞外基质减少导致髓核含水量减少，髓核的弹性及缓冲压

5、力的能力减退，椎间盘高度降低，，纤维环所受压力增大严重者可致纤维环变形、撕裂形成椎间盘突出或脱出。因此，Ｗ髓核为突破口，研究退变髓核的修复方法，或许是修复退变椎Ｉ摘要间盘的关键。近年来，通过利用组，随着国内外组织工程技术和方法的不断发展与创新织工程技术构建具有生物学功能的髓核，或许将为椎间盘退行性疾病的治疗带来新的希望。目前Ｗ下髓核组织工程支架研究较多，主要包括：１．人工合成材２一ＰＬＡＰＧＡ．，二，明胶等，型胶原，料支架，如，；单天然成分材料如透明质酸３－－．人工天然复合成分材料壳聚糖等，，如明胶壳聚糖复合支架等。Ｗ上

6、支架仍存在诸多不足，因为天然髓核成分复杂，很难完全模拟其微结构、基质成份及微环境，在某些领域己研究较深入，，而去细胞基质非常接近于正常髓核取、血得重大进展，例如在膀脱管、真皮、也瓣膜等取得较大成功并被批准用于临床。但在组织工程髓核领域，检索国内外文献鲜，在软骨方面亦有不少研究有报道，我们猜想Ｗ去细胞髓核基质为材料来源的支架是不是同样能成功构建？组织工程髓核并在此基础上，将种子细胞接种至去细胞兔天然髓核支架，进行体外构建组织工程髓核。参考国内外相关文献，脱细胞的方法很多，有酶消一法、冷冻干燥法、去污剂处理法等，我们前期进行了大

7、量的预实验，总结出套理想的兔髓核脱细胞方法；但是我们发现单纯脱细胞后获得的兔髓核去细胞。基质存在明显缺陷，即结构致密，孔隙率及孔径均很不理想故我们在脱细胞一基碰上创新，进步采用物理粉碎、溶解、离也、冷冻干燥成型、物理化学交一联等系列处理制得去细胞髓核基质来源Ｈ维多孔支架，它去除了髓核细胞及－些小分子免疫源性蛋白，因此具有良好的生物相容性，及更低的细施毒性，基本保留了天然髓核的原有细胞外基质成分及局部微环境。它呈Ｈ维立体结构，拥有较好的力学性能及细胞所需微环境，并有理想的孔隙率及合适大小的孔径，非常有利于种子的粘附、迁移。兔髓核取材方

8、便，大小合适，国内外制作兔椎间盘退