硅基芯片和磁纳米粒子表面dna生物传感器的构建及其在荧光分析中的应用

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1、分类号密级ＵＤＣ＾南ｆ凌是乂菩ＮＡＮＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＣＩＥＮＣＥ＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕壬学位论文桂基芯片和巧纳米粒子表面ＤＮＡ生物传感帯的构建及其在巧光分析中的应用胡伟文巧＾？＾名孔金明教Ｗ学位类别王学巧去皮学王程学科名称生物研究方向生若Ｔ传成巧论间２０１６．０３注１：注明＜国际十进分类法ＵＤＣ》的类号。硕壬学么冶文娃基芯片和碟纳米粒子表面ＤＮＡ生物传感器的构建及其在巧光分析中的应用作者：胡伟文指导教师；乳金明教授南京肛

2、大学２０１６年０３月ＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏ打ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＤＮＡｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓｏｎｓｉｌｉｃｏｎｃｈｉｐａｎｄｍａｎｅ村ｃｂｅａｄｓａｎｄｔｈｅｉｒａｌｉｃａ杜ｏｎｓｉｎｇｐｐｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓＢｙＷｅｉｗｅｎＨｕＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏ．ＪｉｎｍｉｎｏｎｆｇＫｇＮａｎｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏｊｇｙｇｙＭａｒｃｈ，２０１６声明本学位论文是我在导师的指导下取

3、得的研究成果，尽我所知，在本学位论文中，不包含其他人已经发表或公布，除了加Ｗ标注和致谢的部分外过的研究成果，也不包含我为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料一。与我同工作的同事对本学位论文做出的贡献均已在论文中作了明确的说明。研究生签名；錫乏ｗｋ年多月日＾学位论文使用授权声明南京理工大学有权保存本学位论文的电子和纸质文档，可Ｗ借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容，可Ｗ向有关部口或机构送交并授权其保存。、借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容对于保密论文，按保密的有关规定和程序处理。研究生签名；苗扛＞

4、化年多月／７日硕±论文活基芯片和磁纳米粒子表面ＤＮＡ生物传感器的构建及其在巧光分析中的应用摘要近年来，随着科学技术的发展，ＤＮＡ检测技术变得越来越重要。传统的凝胶电泳法劳动强度大，，消耗时间长。在这种情况下Ｗ碱基配对为基础的ＤＮＡ生物传感器应运而生。其中，ＤＮＡ巧光传感器由于其高灵敏度、低成本及简便性等特点受到了越来越多的关注。基于此一，我们构建了四种ＤＮＡ巧光传感器。第种是将共价连接到娃基芯片表面的吗晰寡核巧酸作为捕获探针，与ＤＮＡ片段杂交后，利用锥离子的配位作用，将罗丹明Ｂ连接到ＤＮＡ晉架上，通过巧光成像分析的方法

5、实现ＤＮＡ片段的检测。第二种是将共价连接到磁纳米粒子表面的吗晰寡核巧酸作为捕获探针，与较长链的待测ＤＮＡ片段杂交后，待测ＤＮＡ的未杂交段再与生物素醜化的信号探针ＤＮＡ杂交，利用亲和素－生物素相互作用，将碱性憐酸酶结合到信号探针ＤＮＡ末端，碱性磯酸酶催以２－化抗坏血酸憐酸盐生成以抗坏血酸，以抗坏血酸再还原刃天青形成强癸光的试商灵，通过巧光光谱分析的方法实现ＤＮＡ片段的检测。第兰种是将吗晰寡核昔酸固定到磁纳米粒子表面，与目标ＤＮＡ片段杂交后，利用－锥离子的配位作用－花下酸之间，将１巧Ｔ酸连接到ＤＮＡ骨架上，再利用金丝桃素与１的７Ｗ

6、Ｃ堆积作用引入巧光较强的金丝桃素。ＤＮＡ的’３ＤＮＡ片段杂交后第四种是将捕获端固定到磁纳米粒子表面，与目标，ＤＮＡ的’３末端转移酶对目标端进行加尾，生成聚胸腺嚼暖，铜离子可与聚胸腺嗦時一相互作用一，抗坏血酸钢将二价铜还原成价铜，价铜再歧化形成巧光铜纳米粒子附着、在ＤＮＡ模板上，Ｗ上几种体系均具有较高的灵敏度，操作简便，可应用于分子识别临床诊断、环境监测及食品安全等领域。关巧词：珪基芯片，磁纳米粒子，吗晰寡核巧酸，ＤＮＡ，巧光，生物传感器ＩＡｂｓｔｒａｃｔ硕ｉｌｒ论文ＡｂｓｔｒａｃｔＩｎｒｅｃｅｎｔｅａｒｓＤＮＡ

7、ｄｅｋｃｔｉｏｎ１；ｅｃｈｎｏｌｏｈａｓｂｅｃｏｍｅｍｏｒｅａｎｄｍｏｒｅｉｍｏｒｔａｎｔｗｉｔｈｙ，ｇｙｐｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｓｃｉｅｎｃｅａｎｄ化ｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｉｓｌａｂｏｒｉｏｕｓａｎｄ－ｔｉｍｅｃｏ打ｓｕｍｉｎＤＮＡｓｅｎｓｏｒｓｂａｓｅｄｏｎｂａｓｅａｉｒｉｎｅｍｅｒｅｄａｔａｈｉｓｔｏｃｍｏｍｅ打ｔＡｍｏｎｇ．ｐｇｇｒｉ．ｇ化ｅｓｅ，ＤＮＡｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｓｅｎｓｏｒｓｈａｖｅｄ

8、ｒａｗｎｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｅａｔｔｅ打ｔｉｏ