高中生物实验及科学方法总结

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1、纪超（易题库高中生物教研员）http://www.yitiku.cn/实验1：观察DNA和RNA在细胞中的分布1、原理（1）真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。（2）甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现绿色，吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可显示DNA和RNA在细胞中的分布。（3）盐酸的作用：盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；盐酸使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。2、试剂：0

2、.9％的NaCl溶液（维持细胞形态）；8％的盐酸；吡罗红甲基绿染色剂（现配）3、流程：制片→水解→冲洗→染色→观察（染色均匀、色泽浅）4、结论：细胞质呈红色（面积大），细胞核呈绿色。5、高频考点：选择人口腔上皮细胞、洋葱内表皮细胞等无色的细胞，防止颜色干扰【高考这样考】【12安徽】某同学以新鲜洋葱鳞片叶内表皮为材料，经不同处理和染色剂染色，用高倍显微镜观察。下列描述正确的是A．经吡罗红甲基绿染色，可观察到红色的细胞核B．经吡罗红甲基绿染色，可观察到绿色的细胞质C．经健那绿染色，可观察到蓝绿色颗粒状的线粒体D．经苏丹Ⅲ染色，可观察到橘黄色颗粒

3、状的蛋白质【解析】用新鲜洋葱鳞片叶内表皮做材料，经吡啰红甲基绿染色，DNA被染成绿色，RNA被染成红色，因此可观察到细胞质被染成红色，细胞核被染成绿色；苏丹Ⅲ可将细胞内的脂肪颗粒染成橘黄色；健那绿可将活细胞内的线粒体染成蓝绿色【答案】C实验2：检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质1、原理（1）还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖）+斐林试剂（水浴加热）→砖红色沉淀（2）脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色；脂肪+苏丹Ⅳ→红色（3）蛋白质+双缩脲试剂→紫色反应2、还原糖的检测（1）实验材料：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果、梨、白萝卜。（2）试剂：斐林试剂（甲液：

4、0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。（3）步骤：向试管内注入2mL待测组织样液→加入斐林试剂1mL（甲液和乙液等量混合均匀后再注入）→50～65℃水浴加热约2min→观察颜色变化（蓝色→砖红色沉淀）（4）原理：NaOH和CuSO4反应生成Cu(OH)2，被还原糖还原成Cu2O3、脂肪的检测（1）实验材料：脂肪含量越高的组织越好，如花生的子叶。（2）步骤：方法一：向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察样液的颜色方法二：制作子叶临时切片：制备最薄的切片→滴2～3滴苏丹Ⅲ染液染色→2～3min后吸去

5、染液→滴加体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精→滴1滴蒸馏水→盖上盖玻片→低倍镜找最薄处→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒4、蛋白质的检测（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）（2）步骤：向试管内注入2mL待测组织样液→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩脲试剂B液4滴→观察（3）原理：在碱性条件下，Cu2+与肽键反应生成紫色的络合物。【高考这样考】【14广东】油菜种子成熟过程中部分有机物的变化如图所示，将不同成熟阶段的种子匀浆后检测，结果正确的是选项取样时间检测试剂检测结

6、果A第10天斐林试剂不显色B第20天双缩脲试剂不显色C第30天苏丹Ⅲ试剂橘黄色D第40天碘液蓝色20/20【解析】第10天，有可溶性糖存在，斐林试剂检测会出现砖红色沉淀；细胞中含量最多的有机物是蛋白质，所以在第20天用双缩脲试剂会出现紫色；第30天，细胞中脂肪含量较高，用苏丹Ⅲ试剂可将脂肪染成橘黄色；第40天，细胞中没有淀粉，所以用碘液不会出现蓝色【答案】C【12广东】分析下表，可推测溶液双缩脲试剂碘液斐林试剂甲＋－－乙－＋＋－甲、乙混合＋＋＋注：“＋”显色，“＋＋”显色更深；“－”不显色。A．甲溶液含有淀粉B．乙溶液含有还原糖C．混合溶液

7、不含淀粉D．混合溶液含有淀粉酶【解析】甲溶液加入双缩脲试剂显色，说明含有蛋白质，遇碘液不变蓝色说明不含淀粉；乙溶液加碘液显色较深，说明含大量的淀粉，而加入本尼迪特试剂不显色，说明不含还原性糖；甲溶液中只含蛋白质，乙溶液中只含淀粉，都不含还原性糖，但混合后却有还原性糖存在，说明混合溶液中含有能将淀粉分解成还原性糖的淀粉酶；甲、乙混合溶液中分别加入双缩脲试剂、碘液和本尼迪特试剂都能显色，说明同时含有蛋白质、淀粉和还原性糖【答案】D【08广东】双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于蛋白质有A．肽键B．氨基酸C．羧基D．氨基【解析】鉴定生物组织中的蛋白质

8、时，常用双缩脲试剂。其反应实质是：在碱性环境下，Cu2+与双缩脲发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H2NOC－NH－CONH2)结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩