子痫前期患者血清中seng、lxrα的表达及意义

《子痫前期患者血清中seng、lxrα的表达及意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

分类号：R714密级：UDC：618学校代码：11065硕士学位论文子痫前期患者血清中sEng、LXRα的表达及意义张亚楠指导教师齐卫红副教授学科专业名称妇产科学论文答辩日期2015-05-31 子痫前期患者血清中sEng、LXRα的表达及意义中文摘要目的通过研究子痫前期患者血清中可溶性Endoglin（sEng）、肝X受体α（LXRα）的表达，探讨这两个因子与子痫前期发生、发展的关系。方法筛选2013年3月-2014年3月寒亭区人民医院妇产科收住的满足研究条件的子痫前期患者65例（轻度子痫前期患者35例、重度子痫前期患者30例）、同期正常妊娠孕妇30例（对照组）。利用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA），测定各组孕妇血清中sEng、LXRα的含量。结果1.sEng在子痫前期及同期正常妊娠孕妇血清中表达：轻度子痫前期组、重度子痫前期组血清中sEng水平分别为(9.49±1.50)ng/ml、（20.44±6.44）ng/ml，高于对照组血清中sEng水平（2.41±0.46）ng/ml，分别比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；重度子痫前期组sEng水平高于轻度子痫前期组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。2.LXRα在子痫前期及同期正常妊娠孕妇血清中表达：轻度子痫前期组、重度子痫前期组血清中LXRα水平分别为（4.48±0.92）μg/ml、（6.05±3.12）μg/ml，高于对照组血清中LXRα水平（2.79±0.87）μg/ml，分别比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；重度子痫前期组高于轻度子痫前期组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。3.轻度、重度子痫前期患者血清中sEng水平与LXRα水平呈正相关(r=0.56，P＜0.05；r=0.65，P＜0.05)。结论1．子痫前期患者血清中sEng含量、LXRα含量较正常妊娠孕妇增高，sEng、LXRα可能与子痫前期的发生有关。2．随着子痫前期病情的加重，血清中sEng、LXRα表达水平逐渐升高，提示血清中sEng、LXRα可能参与了子痫前期的发展。3.子痫前期组血清中sEng、LXRα表达水平呈正相关性，两者共同作用可能参与了子痫前期的发生、发展过程。4．血清中sEng、LXRα水平有望成为预测子痫前期和判断子痫前期病情严重程度的指标之一。关键词：子痫前期；sEng；LXRα ThestudyofthecorrelationbetweensEngandLXRalphawithpreeclampsiaAbstractObjective:Tostudytheexpressionandthesignificanceofsolubleendoglin(sEng)andliverXreceptorα(LXRα)inserumduringthecourseofpre-eclampsia(PE).MethodsFromMarch2013toMarch2014womenwithpreeclampsiawerepickedupbyHanTingdistrictpeople'shospitalofobstetricsandgynecologyforthisstudy,moderatepreeclampsia(MPEgroup)were35cases,severepreeclampsia(SPEgroup)were30cases,and30healthywomeninpregnancyweretakenascontrolgroup.Weusedenzyme-linkedimmunosorbentassaytodetectthefastingserumsEngandLXRalphalevel.Results:1.TheexpressionofsEngfromserumsamples:TheserumlevelsofsEnginMPEgroup[(9.49±1.50)ng/ml]andSPEgroup[(20.44±6.44)ng/ml]weresignificantlyhigherthanthatincontrolgroup[(2.41±0.46)ng/ml],P<0.05.TheserumlevelsofsEnginSPEgroupweresignificantlyhigherthanthatinMPEgroup(P<0.05).2.TheexpressionofLXRalpha.fromserumsamples:TheserumlevelsofLXRalpha.inMPEgroup[(4.48±0.92)μg/ml]andSPEgroup[(6.05±3.12)μg/ml]weresignificantlyhigherthanthatincontrolgroup[(2.79±0.87)μg/ml],P<0.05.TheserumlevelsofLXRalphainSPEgroupweresignificantlyhigherthanthatininMPEgroup(P<0.05).3.TherewasapositivecorrelationbetweenserumliverXreceptorlevelandserumEndoglinlevelinMPEgroupandSPEgroup(r=0.56,P＜0.05;r=0.65,P＜0.05).Conelusions:1.TheserumlevelsofsEnginMPEgroupandSPEgroupweresignificantlyhigherthanthatincontrolgroup,whichmaybeassociatedwiththeoccurrenceofpreeclampsia;TheserumlevelsofLXRalphaMPEgroupandSPEgroupweresignificantlyhigherthanthatincontrolgroup,whichmaybeassociatedwiththeoccurrenceofpreeclampsia.2.TheserumsEngandLXRalpha.levelsinSPEgroupweresignificantlyhigherthan thatinMPEgroup,whichmayaffecttheprogressofpreeclampsia.3.TherewasapositivecorrelationbetweenserumLXRalphaandsEnglevelinpreeclampsiagroupandcontrolgroup,wesuggestedsEngandLXR-αarerelatedtopreeclampsia.4.TheserumsEngandLXRalphalevelsmayaffecttheprogressofpreeclampsia.studyingonEndoglinandLXR-αmaybeisagoodwaytodismisspreeclampsia.Keywords:preeclampsia;sEng;LXRalpha. 目录引言···············································································································································1第一章材料与方法····················································································································31.1研究对象与分组···················································································································31.1.1子痫前期组（实验组）··································································································31.1.2同期正常妊娠孕妇组（对照组）·················································································31.2标本采集································································································································41.3主要试剂与仪器···················································································································41.3.1主要试剂···························································································································41.3.2主要仪器···························································································································51.4实验方法································································································································61.4.1实验前准备及注意事项··································································································61.4.2血清样本中sEng含量的测定························································································61.4.3血清样本中LXRα含量的测定·······················································································71.5统计学分析···························································································································7第二章结果·································································································································92.1一般临床资料比较···············································································································92.2子痫前期组与对照组患者血清sEng表达水平的比较··················································92.3子痫前期组与对照组患者血清LXRα表达水平的比较···············································102.4血清sEng表达水平与血清LXRα表达水平的相关性分析········································11第三章讨论······························································································································123.1sEng的生物学特性及与子痫前期的关系·······································································123.2LXRα的生物学特性及在子痫前期中的表达及意义·····················································153.3sEng与LXRα之间的关系·································································································18结论·············································································································································20参考文献·····································································································································21综述·············································································································································25攻读学位期间的研究成果·······································································································35致谢·············································································································································36学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明·························································37 引言引言子痫前期（preeclampsiaPE)作为妊娠期特有的常见疾病之一，发生于妊娠20周后，以出现高血压和蛋白尿为显著特征，威胁着孕产妇、围产儿生命安全，对于产妇和新生儿将来的健康也存在重大隐患，发生高血压、心血管疾病、糖尿病及肾[1][2,3]病综合症的风险增加。据不完全统计，目前该疾病发病率约2%-8%，在发达国家该病发病率约为2-5%，发展中国家其发病率约为10%左右，在亚洲和非洲，它占[4][5]到了孕产妇死亡人数的9%，在孕产妇死亡原因中排位第二。近年来，随着医疗水平的进步，虽然对于子痫前期的诊治方法日趋完善，但该疾病作为一种复杂的多系统疾病，其发病病因和发病机制至今尚未明了。由于病因不明，给预防及筛查带来很大的困难，因此对于该疾病发生发展的研究成为了产科[6,7]研究的热点。目前关于子痫前期的病因及发病机制观点众多，诸如血管内皮损伤学说、脂质代谢紊乱学说、胎盘缺血氧化应激学说等等，但是这几种学说并不是完[6-8]全独立的。大量的实验研究证明，血管内皮功能损伤是子痫前期发病机制的重要环节，这已经成为大家在子痫前期研究上的共识。由母体和胎盘组织共同产生的生物学标记物sFlt-1和Endoglin（Eng），对于胎盘血管的形成与功能构建有不可或[10]缺的作用，近年来引起研究人员的重点关注。Endoglin（Eng）又名CD105淋巴细胞抗原，是转化生长因子（transforminggrowthfactor，TGF）TGF-β1和TGF-β3亚型细胞表面上的受体复合物的成分之一，也是体内内皮细胞细胞膜上的跨膜物质。Eng在血管内皮细胞、胎盘合体滋养层及肿瘤血管的含量较多，是血管生成的必要元素之一。现有研究表明Eng与滋养细胞[11]浸润表型分化有关。可溶性Endoglin（solubleEndoglin，sEng）是一种抗血管生成因子，主要由胎盘合成，是Eng分解形成的可溶性结构，存在于血液循环中。它与血液循环中游离的TGF-β竞争性的结合，从而阻断了相关的信号传递，抑制TGF-β1对内皮细胞增殖、迁移等作用，破坏血管内皮完整性，进而打破血管生成平衡；sEng也可以阻[12]断由TGF-β介导的一氧化氮合酶(NOS)的激活，从而抑制NOS依赖的血管舒张。[12]sEng在正常妊娠女性体内只少量存在，而子痫前期孕妇血清sEng水平高于正常[13][15]怀孕女性，而且通常在临床症状出现前8-12周就已经出现其血清水平升高。国外实验表明，白鼠体内同时注射sEng和sFlt-1会出现严重子痫前期的表现；只[14]注入sEng或sFlt-1一种会出现轻微的子痫前期表现。由此猜测，sEng与子痫前期的发病机制有关，但就目前而言这种理论仍在探索阶段。1 青岛大学硕士学位论文肝X受体(LXR)是细胞核受体系统超家族成员之一，主要包括LXRα和LXRβ。LXRα主要在肝脏组织中表达，它参与着脂质代谢，同时影响血管内皮生成及滋养细[16]胞的增殖和浸润。Saarelainen等发现妊娠期孕妇血脂含量较正常非孕女性高，血脂随着孕周的增加而上升；而子痫前期患者血脂、脂蛋白代谢异常与正常妊娠孕[17]妇相比，变化更为显著。现阶段国际上关于sEng和LXRα的研究，主要集中在对子痫前期预测价值及同[16]期孕妇的表达差异上。有学者认为检测sEng对判断是否患有子痫前期的预测灵敏度和特异度分别为90%和95%；还有研究证明，同时对sEng和sFlt-1进行测试，预测孕妇患有早发型子痫前期(怀孕未达34周)的灵敏度达100%，特异度达93.3%。妊娠是机体的特殊状态，子痫前期是多因素共同参与导致的机体调节失衡，其发病的具体机制还有待进一步明确。本实验采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)分别检测子痫前期孕妇和同期正常妊娠孕妇血清中sEng和LXRα的表达水平，探讨sEng、LXRα与子痫前期发生、发展的关系。2 第一章材料和方法第一章材料和方法1.1研究对象与分组1.1.1子痫前期组（实验组）从2013年03月到2014年03月在寒亭区人民医院妇产科收住的子痫前期患者中选出满足研究条件的病患65例，其中轻度子痫前期患者35例，重度子痫前期30例。1.1.1.1入组标准单胎妊娠，年龄18-45岁，孕周20-40周，排除慢性高血压、糖尿病及其他心、肝、肾等严重疾病；无其他产科并发症及合并症；无吸烟、酗酒、滥用药物等病史。1.1.1.2诊断标准[18]：轻度子痫前期：妊娠20周以后出现收缩压≥140mmHg和/或舒张压≥90mmHg，伴尿蛋白≥0.3g/24h或随机尿蛋白（+）。重度子痫前期：血压和蛋白持续升高，发生母体脏器功能不全或胎儿并发症。出现下述任一不良情况可诊断：1.血压持续升高：收缩压≥160mmHg和/或舒张压≥110mmHg；2.尿蛋白≥5.0g/24h或随机尿蛋白≥（+++）；3.持续性头痛或视觉障碍或其他脑神经症状；4.持续性上腹部疼痛，肝包膜下血肿或肝破裂症状；5.肝脏功能异常：肝酶ALT或AST水平升高；6.肾脏功能异常：少尿（24小时尿量小于400ml或者每小时尿量小于17ml）或血肌酐大于106umol/L；7.低蛋白血症伴胸腔积液或9腹腔积液；8.血液系统异常：血小板＜100×10/L；血管性溶血、贫血、黄疸或血LDH升高；9.心力衰竭、肺水肿；10、胎儿生长受限或羊水过少；早发型即妊娠34周以前发病。1.1.2同期正常妊娠孕妇组（对照组）随机选择2013年03月到2014年03月在寒亭区人民医院妇产科住院的正常同期孕妇30例。1.1.2.1入组标准3 青岛大学硕士学位论文单胎妊娠的正常孕妇，年龄18-45岁，孕周20-40周，排除慢性高血压、糖尿病及其他心、肝、肾等严重疾病；无其他产科并发症及合并症；无吸烟、酗酒、滥用药物等病史。1.2标本采集抽取研究对象空腹血5ml，注入不抗凝的采血管中，将标本放于室温环境中2h后，然后3000r/min离心10min，提取血清中的上清液，注入Eppendorf管内，并放置在-70℃的冰箱中备用，防止出现反复冻融情况。1.3主要试剂与仪器1.3.1主要试剂：1.3.1.1人可溶性Endoglin（sENG/sCD105）ELISA检测试剂盒试剂盒由美国R&D公司提供；板内、板间差异低于15%。原理为：用已知sEng含量的标准品、未进行检测的血清样品注入微孔酶标板内，测试各自的组成。首先对sEng和生物素标记的抗体进行温育，然后进行洗涤，在其中注入用酶标记的特异性抗体，再次温育、洗涤，分离其中不结合的酶结合物，最后放入底物A液、B液，让它与酶结合物进行反应，产生颜色变化。颜色深浅不一，颜色越深，血清样品中sEng的浓度越高。主要试剂规格微孔酶标本一块96孔（12孔*8孔）标准品（48ng/ml）1瓶0.6ml标准稀释液1瓶6ml样本稀释液1瓶6ml检测抗体-HR1瓶10ml20*缓冲洗涤液1瓶25ml底物A1瓶6ml底物B1瓶6ml终止液1瓶6ml1.3.1.2LXR-αELISA检测试剂盒4 第一章材料和方法试剂盒由美国R&D公司提供；板内、板间差异低于15%。原理为：用已知LXR-α含量的标准品、未进行检测的血清样品注入微孔酶标板内，测试各自的组成。首先对LXR-α和生物素标记的抗体进行温育。进行洗涤后，在其中注入用酶标记的特异性抗体。再次温育、洗涤，分离其中不结合的酶结合物，最后放入底物A液、B液，让它与酶结合物进行反应，产生颜色变化。颜色深浅不一，颜色越深，血清样品中LXR-α的浓度越高。主要试剂规格微孔酶标本一块96孔（12孔*8孔）标准品（16ug/ml）1瓶0.6ml标准稀释液1瓶6ml样本稀释液1瓶6ml检测抗体-HR1瓶10ml20*缓冲洗涤液1瓶25ml底物A1瓶6ml底物B1瓶6ml终止液1瓶6ml1.3.2主要仪器主要仪器厂家低温高速离心机德国艾本德公司紫外分光光度计德国贝莱克公司恒温水浴系统上海实验仪器厂可调式微量移液仪德国Eppendorf公司常温离心机(15nil,50ml)上海医用仪器厂常温微量离心机德国Eppendorf公司制冰机AF10Scotsman微波炉格兰仕电器实业有限公司4℃、-70℃冰箱青岛Haier股份有限公司电子分析天平德国SatoriusBasicPlus公司微型振荡器KANGILAN公司酶标分光光度仪美国MolecularDevices公司电热恒温水浴箱上海医疗器械厂0.1、0.2、1ml精密移液器、一次性吸头、Eppendorf管(0.5ml、1mlEP管)等5 青岛大学硕士学位论文1.4实验方法1.4.1实验前的准备及注意事项(1)在实验前将试剂盒从冰箱中取出，置于常温下20min，如果发现浓缩洗涤液中有结晶出现，属正常情况，只需要水浴加热让结晶融化即可。将全部试剂均匀混匀，操作过程中尽量避免气泡产生，造成加样的误差；(2)使用洁净的容器配置洗涤剂，试验开始前严格按照试剂盒说明将标准品振荡均匀，按比例稀释，标准品用标准稀释液依次稀释至48、24、12、6、3、1.5ng/mL，20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释。(3)实验中提取液体操作时必须严格符合实验清洁要求，充分利用一次性吸头以免交叉污染，避免使用金属加样器；(4)一次性加样的时间应少于10分钟；(5)实验中冲洗酶联板时，应保证器材干净，保证微孔中不含其它液体，同时利用双孔进行检测，避免其它因素干扰，尽量保证检测结果的准确性；(6)实验中禁止双手直接触碰实验试剂及样品。1.4.2血清样品中sEng含量的测定(1)将血清样品置于室温20分钟，然后从铝箔袋中取出实验所需的板条，余下板条密封后再次放置在4℃环境中；(2)加样：标记血清样品编号，设置空白孔、标准品孔和样本孔，于标准品孔中滴入浓度不同的标准品各50μL；(3)将待测血清10μL置入样本孔，再加入样本稀释液40μL，在标准品孔和样本孔中分别放入酶标记的特异性抗体100μL，利用封板膜密封反应孔，最后放置在37℃的恒温环境中温育1小时；(4)液体弃之后用吸水纸拍干，然后每孔加满洗涤剂，静置1分钟，去除洗涤剂，吸水纸拍干，同上方式反复至少清洗5次；(5)在每孔里放入不同底物A、B各50μL，在37℃避光环境下孵育15min；6 第一章材料和方法(6)在每孔里放入终止液50μL，限制在15min内，用450nm波长测出每孔OD值；(7)计算：以标准品的浓度为横坐标，对应0D值为纵坐标，绘制出标准回归曲线，根据样品的0D值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准品的浓度与0D值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的0D值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。1.4.3血清样品中LXR-α含量的测定(1)将血清样品置于室温20分钟，然后从铝箔袋中取出实验所需的板条，余下板条密封后再次放置在4℃环境中；(2)加样：标记血清样品编号，设置空白孔、标准品孔和样本孔，于标准品孔中滴入浓度不同的标准品各50μL；(3)将待测血清样品10μL置入样本孔，再加入样本稀释液40μL，在标准品孔和样本孔中分别放入用酶标记的特异性抗体100μL，利用封板膜密封反应孔，最后放置在37℃的恒温环境中温育1小时；(4)液体弃之后用吸水纸拍干，然后每孔里加满洗涤剂，静置1分钟，去除洗涤剂，吸水纸拍干，同上方式反复至少清洗5次；(5)在每孔里放入不同底物A、B各50μL，在37℃避光环境下孵育15min；(6)在每孔里放入终止液50μL，限制在15min内，用450nm波长测出每孔OD值；(7)计算：以标准品的浓度为横坐标，对应0D值为纵坐标，绘制出标准回归曲线，根据样品的0D值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准品的浓度与0D值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的0D值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。1.5统计学分析_实验数据通过SPSS19软件进行统计学分析，计量资料用（x±s）表示，两个样本均数比较采用两组完全随机化设计资料均数的q检验(Newman-Keuls法)，多组均7 青岛大学硕士学位论文数间两两比较采用单因素方差分析，对于两个变量的相关性检验采用Pearson相关性分析。检验水准α=0.05，以P＜0.05为有统计学意义。8 第二章结果第二章结果2.1一般临床资料比较对照组与子痫前期组年龄、孕周、体重指数等均无统计学意义，各组之间具有临床可比性（P>0.05）。（见表2.1）表2.1各组一般资料的比较组别例数（人）年龄（岁）孕周（周）体重指数（kg/㎡）对照组3028.4±2.634.8±3.322.3±1.3轻度子痫前期组3529.3±2.1435.3±3.224.6±1.4重度子痫前期组3028.1±2.434.3±3.126.1±1.5注：各组间比较，无统计学意义（P>0.05）。2.2子痫前期组与对照组患者血清sEng表达水平的比较轻度子痫前期组、重度子痫前期组血清中sEng水平分别为(9.49±1.50)ng/ml、(20.44±6.44)ng/ml，高于对照组血清中sEng水平(2.41±0.46)ng/ml，分别比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；重度子痫前期组sEng水平高于轻度子痫前期组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。（见表2.2、图2.3）_表2.2子痫前期组、正常妊娠组血清sEndoglin水平变化（ng/ml，x±s）组别例数（人）sEndoglin（ng/ml）对照组302.41±0.46轻度子痫前期组359.49±1.50重度子痫前期组3020.44±6.44注：轻度子痫前期组与对照组比较q=9.28，P＜0.05；重度子痫前期组与对照组比较q=25.41，P＜0.05；重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较q=19.37，P＜0.05。9 青岛大学硕士学位论文图2.3子痫前期组、正常妊娠组血清sEndoglin水平变化（ng/ml）注：轻度子痫前期组与对照组比较q=9.28，P＜0.05；重度子痫前期组与对照组比较q=25.41，P＜0.05；重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较q=19.37，P＜0.05。2.3子痫前期组与对照组患者血清LXRα表达水平的比较轻度子痫前期组、重度子痫前期组血清中LXRα水平分别为（4.48±0.92）μg/ml、（6.05±3.12）μg/ml，高于对照组血清中LXRα水平（2.79±0.87）μg/ml，分别比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；重度子痫前期组高于轻度子痫前期组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。（见表2.4，图2.5）_表2.4子痫前期组、正常妊娠组血清肝X受体α表达水平的变化(μg/ml，x±s)组别例数（人）LXRα（μg/ml）对照组302.79±0.87轻度子痫前期组354.48±0.92重度子痫前期组306.05±3.12注：轻度子痫前期组与对照组比较q=4.58，P＜0.05；重度子痫前期组与对照组比较q=6.41，P＜0.05；重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较q=7.37，P＜0.05。10 第二章结果图2.5子痫前期组、正常妊娠组血清肝X受体α表达水平的变化(μg/ml)注：轻度子痫前期组与对照组比较q=4.58，P＜0.05，重度子痫前期组与对照组比较q=6.41，P＜0.05，重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较q=7.37，P＜0.05。2.4血清sEng表达水平与血清LXRα表达水平的相关性分析将轻度子痫前期、重度子痫前期患者血清中sEng表达水平与LXRα表达水平进行Pearson相关性分析，sEng表达水平与LXRα表达水平呈正相关，差异有统计学意义(r=0.56，P＜0.05；r=0.65，P＜0.05)。11 青岛大学硕士学位论文第三章.讨论3.1sEng的生物学特性及与子痫前期的关系3.1.1sEng的生物学特性可溶性Endoglin(sEng)是Endoglin释放到血液循环中一类短链、可溶性的抗[22]血管生成因子，Venkatesha在对Endoglin免疫沉淀物进行Western杂交分析时观察到Endoglin的这一结构形式。胎盘中Eng的升高通过一定机制可以引起血清中sEng的升高。Endoglin（Eng）又名CD105淋巴细胞抗原，是转化生长因子（transforminggrowthfactor，TGF）TGF-β1和TGF-β3亚型细胞表面上的受体复合物的成分之一，同时也是体内内皮细胞细胞膜上的跨膜物质，位于人类染色体9q34。Gougos等专家从胎盘组织中获得了不含杂质的Endoglin，一个完整的Eng蛋白质包含有633个氨基酸，在Eng中，氨基酸的分布表现为561个氨基酸分布于胞膜外部，47个氨基酸位于胞膜内部，其余部分皆位于跨膜区，在细胞结构外的区域里有一个向外的缺口，[19]含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列。Endoglin的结构不一，1993年Bellon等发现存在着两种不同结构形式的Endoglin：即L-Endoglin、S-Endoglin，它们由两个同源单体构成一个二聚体，并利用二硫键结合；在细胞质内的氨基酸组成大有不同，前者由47个残余氨基酸构成，而后者只由14个构成，但是在邻近跨膜区的[21]7个氨基酸残基却是共有的。有实验证实，Endoglin为血管再生提供支持，而其作用强弱受到TGF-β及其受体的影响。TGF-β具有改变细胞数目、影响细胞外物质[23][39]代谢的功能，对血管组成和再生有至关重要的作用。有学者曾对Endoglin进行体外实验，应用抗体或阻断剂阻断Endoglin的表达使其处于较低水平时，能够刺激细胞滋养细胞的浸润和分化。由此可知，Endoglin对于滋养细胞的分化和浸润起着负性调节的作用，因此我们可以进一步推测Endoglin表达异常或功能缺失可能会导致一些与滋养细胞入侵和胎盘发育异常的妊娠相关疾病。可溶性Endoglin(sEng)是一个化学结构明确的同型结合体糖蛋白，分析结构表明，它在gly27到arg393的结构中氨基酸序列部分与Endoglin中的一部分特有肽段有相同的结构，相当于EndoglinN端里的一个可溶部分。sEng不含有跨膜区和胞质区域，但包含与配体结合的区域以及具有与TGF-β1高亲和力的特性，是TGF-β1在血液循环中的可溶性受体。sEng是体内抗血管生成因子之一，用来防止相关细胞的增殖和血管的再生。研究发现如果将sEng+转基因注入sEng+/-的小鼠中，转12 第三章讨论基因成功的情况下小鼠死亡；如果将Lewis肺癌细胞移植到sEng+小鼠体内，一段时间后进行观察，发现小鼠体内肿瘤细胞数量没有明显变化，血管新生也受到干扰便证明了这一点。[24]Romero等学者实验研究表明，血清sEng基本不存在于正常女性的血液中，但一旦妊娠后便可检测到sEng，并随着孕周的增加其含量会逐步升高，通常在临产时达到顶峰，胎儿娩出后逐渐恢复到未孕状态，与妊娠周数呈正相关，此实验结果和我们的实验得出的结论基本相同。胎儿出生48小时内sEng含量较之前明显降低，[25]staff等对子痫前期患者的胎儿血清、羊水中sEng含量进行检测，显示脐静脉血中以及羊水中sEng含量较孕妇静脉血中sEng含量低，和正常孕妇含量无明显统计学差异，因此否定了sEng由脐血和羊水表达的观点。这表明正常状况下sEng含量[22]变化不是由胎儿造成的，更进一步推断其可能主要由胎盘组织表达。Venkatesha通过免疫染色定位胎盘滋养层细胞中的Eng，发现其中含有化学结构为90KD的Eng单体，并且它包含血浆膜蛋白和65KD的Eng可溶性结构，提示sEng可能由胎盘表达。3.1.2.sEng与子痫前期的关系由Venkatesha等进行的研究得出如下结论：与正常的同期孕妇相比，轻度子痫前期孕妇血清中sEng含量要比其高出2倍，而重度子痫前期孕妇血清中sEng含量要比其高出5倍，且随着疾病病情的加重呈现上升趋势；另外，患有子痫前期的孕妇其胎盘组织中sEng与EngRNA的表达水平上调近4倍。近几年来，子痫前期患者[24]血清中所含sEng水平的变化趋势被许多研究所发现。有的研究得出了正常未孕妇女血清中所含sEng水平非常低微，有的甚至检测不到，妊娠晚期阶段其血清中所含sEng会有较大幅度的增长，分娩前期会达到最高值，分娩后逐渐下降直至恢复到未[26]孕状态。由Levine等学者对血清sEng水平的研究中发现，相对于正常妊娠孕妇来讲，患有子痫前期、妊娠期高血压以及胎儿生长受限的妇女血清中sEng水平要高很多，正常妊娠孕妇血清中sEng水平在妊娠期33到36周期间是基本稳定的，之后呈现逐渐上升趋势，直到分娩期；未足月妊娠子痫前期患者的sEng水平在妊娠17到20周期间开始上升，且上升速度在33到36周时最为明显；足月妊娠子痫前期患者的sEng水平在妊娠25到28周期间开始慢慢上升，到33周至36周时上升较为显著，以上结论表明子痫前期患者sEng水平在妊娠中期就已经呈现上升趋势，并且该上升趋势与子痫前期的发病周数及病情的严重程度相关。通过实验我们发现，在子痫前期组中，血清sEng含量明显高于对照组的表达水平，且重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期组，得出sEng的含量高低与子痫前期病情的严重程度呈正相关的结13 青岛大学硕士学位论文论，由此我们推测sEng与子痫前期的发病机制有着极大联系，这个结论与[12]Venkatesha等相关研究结果是相符合的。目前，sEng导致子痫前期的发病机理还未研究明了，许多针对该领域的研究认为，sEng的功能与TGF-β及其受体有着密切的关联。TGF-β是一种重要的Th2类细胞因子，在胎盘，TGF-β由子宫蜕膜合成，主要表达于合体滋养细胞，它的主要作用包括：调节细胞增殖、分化；影响细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)代谢；[27]调节血管生成和维持血管壁结构的完整性。妊娠期TGF-β主要作为炎性因子的反作用因子参与Thl/Th2在妊娠期的生理性改变，对妊娠起支持作用，如促进胚胎植入、维持母胎耐受及减轻母体对胎儿的排斥。着床期间，TGF-β可促进子宫内膜的[28,29]蜕膜样改变，提高子宫内膜的容受性，参与滋养细胞向外移出、生长和迁移。sEng和循环中TGF-β1相结合时，TGF-β1与内皮细胞表面受体（TGF-βR）的结合受阻，导致TGF-β1的信号无法正常传入细胞内，使得血管形成障碍，进一步导致血管通透性增加。还有部分学者的研究中发现，TGF-β1使得一氧化氮合成酶（NOS）中的Thr495去磷酸化，NOS无法被激活，NO生成变少，进而引发血管舒缩异常。当sEng与循环中TGFβ1结合后，抑制TGF-β1将内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）中Thr495去磷酸化，进一步导致激活内皮型一氧化氮合成的eNOS酶受抑制，使得血管内皮细胞产生NO等一系列下游反应失调，血管舒缩异常，导致血压上升、血栓形[31][32]成，肾血流量下降、尿蛋白增加。另有研究发现，患有子痫前期的孕妇胎盘所含eNOS比正常足月妊娠孕妇低得多，且eNOS的水平与血压的高低呈反相关，而血压与子痫前期胎盘中的sEng水平呈正相关，由此可见，胎盘产生的sEng对胎盘eNOS[33]激活起着抑制作用，可能参与子痫前期的发生。根据Napolitano等的相关报道，eNOS基因对血管内皮细胞产生NO具有促进作用，目前推测eNOS基因突变与子痫前期患者的小血管痉挛以及内皮细胞数量的减少有关。内皮型一氧化氮合酶eNOS的激活需要Eng的作用才能完成。相关研究曾对孕鼠进行试验，孕鼠同时注射编码sFlt-l与sEng的腺病毒，孕鼠出现严重的类似于子痫前期症状，例如高血压、肝酶升高和蛋白尿增多等，实验对照组只给孕鼠注射sFlt-l或sEng时，发现对照组的孕鼠只会产生轻度的子痫前期症状，如高血压、血管通透性增强以及血管形成障碍等。有学者的研究认为sEng可能通过与sFlt相似的阻断机制抑制VEGF和PLGF的促血管[30]生成的生理作用，进而引起内皮损伤与血管生成障碍。研究还表明，sFlt-l与sEng具有协调作用，可以通过竞争性使vEGF与PLGF的生物学效应受到抑制，实验验证了子痫前期的发生受sEng的影响。[34]Soleymanlou等的研究表明，子痫前期患者病情加重，通过彩色多普勒超声看到子宫胎盘的血供将会明显减少，病理显示损伤的胎盘血管可见分散的梗死区，表14 第三章讨论明子痫前期患者的胎盘血氧供应不足。动物实验发现，sEng在诱发机体的氧化应激[35]反应中发挥重要作用，它通过释放大量内皮损伤因子，导致内皮的进一步损伤。正常组织中sEng的分泌是很少的，它的分泌与组织中的氧浓度有密切关联。在缺氧状态下，通过低氧诱导因子-1的介导作用，sEng的表达会上升，滋养细胞的分化和浸润受到sEng的抑制，胎盘浅着床；在胎盘产生并释放到血循环的sEng，可以通过TGF-β1进一步阻断血管的形成与内皮细胞的增殖，使胎盘血管重塑受到抑制，而内[36][37]皮细胞受损，将会使胎盘组织的血氧浓度进一步下降。Jeyabalan与Munaut等把绒毛组织暴露在低氧环境下培养，结果显示sEng的表达没有上调；将子痫前期患者的胎盘滋养细胞暴露在缺氧的环境中培养时，发现滋养细胞生成sEng的水平要比常[38]氧环境时更高。所以，sEng的异常升高损伤内皮细胞，引起胎盘缺血缺氧，胎盘缺氧进一步引起sEng的高表达，从而引起子痫前期病情加重。胎盘滋养细胞血管生理性重塑过程发生在正常妊娠的6到8周，滋养细胞浸润子宫蜕膜层中的螺旋小动脉，在孕16到20周可达肌层的三分之一，而子痫前期患者子宫螺旋小动脉重塑过程发生障碍，滋养细胞浸润子宫螺旋动脉的能力下降，主要表现为螺旋小动脉重塑的数量明显减少，且重塑的深度仅限于子宫蜕膜段，这被称之为“胎盘浅着床”现象。由于引起血管重塑障碍的本质是因为滋养细胞浸润过浅，有学者对此进行前瞻性研究，发现孕15周左右的子痫前期患者血清中sEng水[40]平要比正常同期孕妇明显增高，而该时期正是血管重塑的重要阶段。sEng水平升高的时间与胎盘血管生理性重塑的时期刚好吻合，进而推断sEng对滋养细胞的浸润具有阻碍作用，伴随血管重塑障碍与胎盘浅着床的异常病理现象，进而引起子痫前期的发生，甚至影响其发展。3.2LXRα的生物学特性及在子痫前期中的表达及意义3.2.1LXRα的生物学特性肝X受体亦被叫做孤儿受体，缩写为LXRs（liverXreceptors），LXR基因在人类染色体中位于18q23.1，该受体属于孤核受体超家族的成员之一，在肝脏中表达丰富。随着医学研究的进步，人们对肝X受体有了更多的了解。人体所需的多种生理调节都有着LXRs的参与，比如胆固醇的代谢及运转、脂质的形成等。现已证明，LXR包括LXRα（NR1H3）和LXRβ（NR1H2）两种同源亚型，对其序列进行分析得知，LXRα和LXRβ有着密切的联系，它们大部分的碱基序列号属于同源序列号，其同源[41]程度高达89%，这主要表现在相应配体结合区中。LXR的核受体结构由6大部分组成，是典型核受体结构，其组成部分为：1.氨基酸端的配体非依赖转录活化域15 青岛大学硕士学位论文（activationfunction-1domain，AF1），具有两个锌指结构域（DNA-bindingdomainDBD），能够使受体和特异的DNA结合，启动靶基因的转录，发挥调节控制的相关作用；2.铰链区（hingeregion）则可以有效的保持受体蛋白的稳定；3.配体结合域（ligand-bindingdomainLBD）；4.二聚化的结合面区；5.羧基端的配体依赖转录活化域（activationfunction2domain，AF2）等。经研究得知LXRα除了在肝脏中高度表达之外，在与代谢有着密切关系的脾、肺、肾、小肠、脂肪组织和吞噬细胞也有大量表达；LXRβ则广泛表达于全身各组织中，尤其在发育的大脑中呈大量表达。LXR有内源性配体及人工合成配体，内源性配体是[42]氧化甾醇，经研究发现，27-羟基胆固醇在内源性配体中占有重要地位，人工合成配体则主要包含TO901317和GW3965，两种配体皆可以无选择的激活两种亚基。LXRs与视黄醛X受体（retinoidXreceptorRXR）形成的异二聚体与靶基因中LXR反应元件（LXRresponseelementLXRE）的特定核苷酸序列结合，LXRS/RXRα异源二聚体与LXRE的特定核苷酸相结合所产生的改变能明显减少阻遏物，从而使得[43,44]LXRs与辅活因子的作用更加明显。经研究发现，与正常妊娠相比，妊娠高血压患者的血清及胎盘中，LXRα值表达增高，而子痫前期患者LXRα值增高程度更加明显，且表达量与缺氧程度呈正相关；本次实验提示，与正常妊娠相比，子痫前期孕妇的血清中LXRα水平表达增高，且与病情严重程度呈正相关，与上述结论一致，由此可推测，LXRα与子痫前期的发病有着极大关系。3.2.2LXRα与脂质代谢在子痫前期中的关系LXRα对脂质平衡有着一定的调节作用，主要表现在LXRs对胆固醇、胆汁以及脂肪酸的调控作用上、对多种脂质蛋白的调节作用上，从而维持脂质的动态平衡。曾有多次研究证明，在子痫前期患者血液中，血脂以及脂蛋白代谢皆处于异常状态。正常情况下，为了满足胎儿营养需求，孕妇将会为之储备大量脂肪，因而极易引起血脂过高，如血清中总胆固醇（totalcholesterol，TC）、甘油三酯（totalglycerin，TG）、游离脂肪酸（freefattyacid，FFA）、载脂蛋白B（apoB）、极低密度脂蛋白胆固醇（verylowdensitylipoprotein，VLDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（lowdensitylipoprotein，LDL-C）等显著升高。在正常孕妇中，其体内的血管病变防护机制可确保血管的正常状态，保证血管不易发生病变，比如说ApoAI/ApoB值越高，动脉血管发生粥样硬化病变的几率就越小；而容易引发动脉粥样硬化的LDL-C/HDL-C值，在正常情况下也是保持平衡的，保证血管维持正常状态，避免血管内皮的损伤。在孕期，胎儿能否正常成长与其在母体内对脂类的吸收有着极大的关系，至于胎儿16 第三章讨论如何吸收脂类，一般分为两种，一种是胎盘转运，另一种是胎盘的内部合成。学者[45]Sandra等曾对胎盘用免疫组化及RNA杂交的方法进行研究，证实胎盘上存在有与脂代谢有关的酶、受体和载脂蛋白，同时也证实胎盘组织培养过程中有脂蛋白分解和合成的参与。我们还发现，相对于正常值，子痫前期患者体内的脂质表达明显升高，并且与病情严重程度呈正相关；LXRα对组织的主要影响就是引起脂代谢异常，导致血管内皮损伤更为严重，因此妊娠期子痫前期的发病几率大大增加。国内外大量学者曾对此作出研究，结果证明，在患有子痫前期的孕妇中，其体内的TC、TG、LDL-C等引发血管损伤的因子表达水平较正常明显增高，血管破坏严重，相对的，具有血管保护作用的HDL-C则表现为明显低于正常值，LDL-C/HDL-C比值相对升高引起血脂代谢紊乱。学者Coster曾做过一项实验，该实验以培养巨噬细胞为关键，在实验时发现ATP结合盒载体A1（ATPbindingcassetteA1，ABCA1）mRNA与蛋白质和LXR有着极大的关系。LXR能够诱导蛋白质ABCA1表达，致使外周组织的胆固醇非正常运转。ABCA1是一种单体转运蛋白，主要源自于组织浆膜内，在机体内的分布主要集中在相关代谢组织如肝、小肠、胎盘、脂肪组织等。LXRα的激活剂可以上调ABCA1和ABCG1表达。另外胆固醇酯转运蛋白（cholesterylestertransportprotein，CETP）、载脂蛋白（apoprotein，apoE）、脂蛋白脂酶（lipoproteinlipase，LPL）都受LXR的调节，它们都参与了胆固醇逆向转运的过程，由此推断出LXRα参与TC的增高。LDL-C可与相关的如位于动脉血管壁上的平滑肌细胞、成纤维细胞膜上的LDL受体发生作用，使得胆固醇发生沉积，从而导致动脉粥样硬化，LDL-C/HDL-C值则相应变高，引发血管内的LDL沉积加剧，动脉[46]硬化情况加重。李刚等学者研究证明，重度子痫前期患者的子宫胎盘部分血管及相关蜕膜血管所发生的病理变化与动脉粥样硬化的相关病理变化有着高度的相似性。当血管内TG值升高时，其抑制血管内皮细胞衍生的舒张因子无法正常表达，血小板凝聚功能异常，而平滑肌的舒张也无法正常进行，从而致使内皮发生损伤；同时，TG的异常增高还会使得脂质过氧化物LPO作用明显增强，从而产生过多的自由基造成血管内皮损伤加重。LPL源自于胎盘滋养细胞，相关研究证明，当胎盘处于子痫前期时会发生梗死现象，其中的LPL酶活性表达明显低于正常，母体及胎盘间营养物质的转换也将无法正常进行，继而导致TG水平升高，对血管内皮的损伤程度更为严重，由此可证明，由于LPL的作用，子痫前期患者处于高血脂状态，其血管内皮细胞的损伤则更为严重，而LXRα可使得LPL表达下调，进一步加重血管内皮损伤。LXRα可上调甾醇调节元件结合蛋白（sterolregulatoryelement-bindingproteins，SREBP1c）的表达。SREBP1c是参与脂肪合成基因的主要转录因子，SREBP-lc启动子中包含LXR结合位点，当LXR与视黄醇X受体（retinoidXrecept）结合形成LXR/RXR异二聚体后，与SREBP-lc启动子上游LXR反应元件的顺式元件结合，17 青岛大学硕士学位论文进而调控SREBP–lc的转录。该程序可以激活多种参与脂肪酸和甘油三酯的合成酶的转录，如乙酰CoA羧化酶（acetylCoAcarboxylase，ACC）、脂肪酸合酶（fattyacidsynthase，FAS）和硬脂酰CoA去饱和酶（steroylCoAdesaturase，SCD1）等。LXRα能极大的抑制血管反应，这一功能通过抑制肾素的分泌来实现。同时，肝[47X受体α激动剂GW3965对于抑制血管收缩也有明显效果，对于降低血压有一定作用48]。LDL经氧化后将产生极大细胞毒性的oxLDL，对动脉粥样硬化的形成有着较大推进作用，它通过与载脂蛋白的氨基酸残基结合，继续修饰LDL，OXLDL抑制内皮细胞和血小板合成前列环素，促进血栓素A2的生成，同时破坏两者的平衡，导致血小板聚集，凝血功能障碍。经研究，部分学者认为oxLDL与子痫前期的产生有着极大的[49]关系。3.2.3LXRα与滋养细胞浸润在子痫前期中的关系在影响人类胎盘形成的因素中，滋养细胞向母体子宫内膜和肌层的浸润起着至[40]关重要的作用，而这一过程则是由MMP降解细胞外基质实现的。基质金属蛋白9（MMP-9）又名明胶酶B，作为MMPs中分子量最大的水解酶，在自愈细胞的浸润过程中起到了至关重要的作用。研究表明：将子痫前期患者的胎盘组织与正常胎盘组织相比较，其MMP-9的表达明显降低，并且与病情严重程度呈反相关，这可能与LXR通过拮抗核因子kB（NF-kB）的炎症信号传导从而抑制MMP-9的表达有关。曾有[42]Castrillo等研究发现，LXR对于MMP-9有着较为明显的抑制作用。Paval等学者对LXR激活剂T0901317做出研究，当LXR激活剂作用于滋养细胞时，滋养细胞的侵蚀能力急剧下降，降低程度可高达55%；另有研究发现，即便同属LXR，其不同成分所产生的机制也不尽相同，例如其激动剂会致使滋养细胞的hCG分泌大量减少，峰值可达45%；而其拮抗剂作用则刚好与其相反，可以提升hCG的分泌[51]。hCG是一种糖蛋白激素，它是由妊娠时合体滋养细胞分泌而成，与滋养细胞的侵袭能力等密切相关。经推测，LXR对滋养细胞的生长及粘附能力有着极大的损害，此损害主要通过上调低密度脂蛋白胆固醇水平，触发过氧化体增殖物激活型受体/视黄[52]醇X受体（PPAR/RXR）途径来实现。学者Plosh等人研究发现，子痫前期患者胎盘中的LXR值比正常孕妇要高，并且其值与缺氧程度呈正相关。3.3sEng与LXRα之间的关系正常妊娠期，血管的新生维持在一个平衡状态。当滋养细胞的侵入和螺旋动脉的重建出现异常时，引起胎盘浅着床，平衡状态被打破，胎盘Eng表达水平应激性18 第三章讨论上调，以促进血管新生；胎盘中Eng的升高，通过一定的调节机制引起血清中sEng升高，sEng与靶器官作用，破坏血管内皮，引起与子痫前期相关的临床表现。经学[53.54]者Henry－Beger等人研究，JAR细胞属于绒癌细胞系，胎盘Eng是LXRα的直接目标，Eng的表达依赖于LXRα的调节，用合成的LXRα激动剂治疗绒癌JAR细胞时发现，Eng和蛋白质水平明显升高。从此推断LXRα表达异常可能引起Eng的升高，间接引起sEng升高。现阶段国际上在sEng和LXRα的研究，主要集中在对子痫前期[18]预测价值及同期孕妇的表达差异上，有学者认为检测sEng判断是否患有子痫前期的预测灵敏度和特异度分别为90%和95%。由本研究可知，在子痫前期患者以及正常妊娠孕妇中，其血清所含sEng量和其LXRα含量呈正相关，提示两者共同作用参与了子痫前期的发生，这与某些学者的研究成果是一致的。19 青岛大学硕士学位论文结论1．子痫前期患者血清中sEng含量、LXRα含量较正常妊娠孕妇增高，sEng、LXRα可能与子痫前期的发生有关。2．随着子痫前期病情的加重，血清中sEng、LXRα表达水平逐渐升高，提示血清中sEng、LXRα可能参与了子痫前期的发展。3.子痫前期组血清中sEng、LXRα表达水平呈正相关，两者共同作用可能参与了子痫前期的发生、发展过程。4．血清中sEng、LXRα水平有望成为预测子痫前期和判断子痫前期病情严重程度的指标之一。20 参考文献参考文献[1]SchneiderS.Gestationaldiabetesandpreeclampsia.Similarriskfactorprofiles?Early.[2]ZeemanG.NeurologicComplicationsofPre-eclampsia[J].SeminPerinatol，2009;33(3):167-172.[3]AukesAM,DeGrootJC,WiegmanMJ,etal.Long-termcerebralimagingafterpre-eclampsia[J].BJOG.2012;119(9):1117–1122.[4]DuleyL.TheglobalimpactofpreeclampsiaandecJampsia[J].SeminPerinatol,2009,33:130~137.[5]WuCS,NohrEA,BechBH,etal.Healthofchildrenborntomotherswhohadpreeclampsia:apopulation-basedcohortstudy.AmJObstetGynecol,2009,201-269.[6]HeG,XuW,ChenY,etal.Abnormalapoptosisoftrophoblasticcellsisrelatedtotheup-regulationofCYPllAgeneinplacentaofpreeclampsiapatients[J].PloSOne,2013,8(3):e59609.[7]KovoM,SchreiberL,BarJ,etal.Placentalvascularpathologyasamechanismofdiseaseinpregnancycomplications[J].THROMBOSISRESEARCH,2013,5(131):S18-S21.[8]RobertsZJM,GammillHS.Preeclamasia:recentinsights[J].HyPertension,2005,46(6):1243-1249.[9]ShettyM,ShettyPK,RameshA,etal.Periodontaldiseaseinpregnancyisariskfactorforpreeclampsia[J].ActaObstetGynecolScand,2010,89(5):718－721.[10]BiggarRJ,PoulsenG,NgJ,etal.HLAantigensharingbetweenmotherandfetusasariskfactorforeclampsiaandpreeclampsia[J].HumImmunol,2010,71(3):263－267.[11]ArthurHM,UreJ,SmithAJ,etal.Endoglin,allancillaryTGF-beta-receptorisrequi-redforextraernbryonicangiogenesisandplayakeyroleinheartdevelopment.DevBiol,2000,217(1):42-53.[12]VenkateshaS,ToPorsianM,LamC,etal.SolubleendoglincontributestothePathogenesisofPreeelampsia[J].NatMed.2006,12(6):642一649.[13]LevineRJ，LamC，QianC，etal.SolubleEndoglinandotherCireulatingAntiangiogenicFactorsinPreeclamPsia[J].NEnglJMed.2006,355(10):992-1005.[14]GIRARDIG，YARILIND,THURMANJM,etal.Complementactivationinducesdysregulationofangiogenicfactorsandcausesfetalrejectionandgrowthrestriction[J].JExpMed,2006,203(9):2165-2175．[15]MutterWP,KarumanchiSA.Molecularmechanismsofpreeclampsia[J].MicrovascRes,2007,75(1):1-8.[16]SanrelainenH,LaitinenT,RaitakariOTetal.PregnancyrelatedhyperlipidemiaandendothelialfunctioninhealthywomenJ.CircJ,2006,70(6):768.[17]ReyesLM,GarciaRG,RuizSL,etal.Angiogenicimbalanceandplasmalipidalterationsinwomenwithpreeclampsiafromadevelopingcountry[J].Growth21 青岛大学硕士学位论文Factors,2012,30(3):158-166.ReyesLM,GarciaRG,RuizSL,etal.Angiogenicimbalanceandplasmalipidalterationsinwomenwithpreeclampsiafromadevelopingcountry[J].GrowthFactors,2012,30(3):158-166.[18]谢幸,主编.妇产科学[M],第八版.北京:人民卫生出版社.2013,65—66.[19]ParkerJMR,GuoD,HodgesRS.Nehydrophilicityscalederivedfromhighper-formanceliquidchromatographypeptideretentiondata:correlationofpredictedsurfaceresiduesithantigenicityandXrayderivedaccessiblesites[J].Biochemistry,1986,25(19):5425-5432.[20]MervielP,CarbillonL,ChallierJC,etal.Pathophysiolgyofpreeclampsia:linkswithimplantationdisorders[J].EuropeanJObstetGynecolReprodBiol,2004,115(2):134-147.[21]LastresP,LetamendiaA,ZhangH,etal.EndoglinmodulatescellularresponsestoTGFpl[J].JCellBio,1996,133:1109.[22]VenkateshaS,ToporsianM,LamC,etal.Solubleendoglincontributestothepathogenesisofpreeelampsia[J].NatMed,2006,12:642一649.[23]RedmanWGSarewtlL.LatestadvaneesinunderstandingPreeelampsia[J].Seienee，2005，308(5728):1592-1594.[24]RomeroR,NienJK,EspinozaJ.AlongitudinalstudyofAngiogenic(plaeenialGrowthfactor)andanti一angiogenie(solubleEndoglinandsolublevascularEndothelialgrowthfactorreceptor-1)factorinnormalPregnancyandPatientsdestinedtodevelopPreeelaanddeliveryasmallforgestationalageneonate[J].JMatenFetalNeonatalMed.ZOO8;21(l):9-23.[25]StaffAC,BraekkeK.JohnsenGM,etal.Cireulatingconeentrationsofsolubleendoglin(CD105)infetalandmaternalserumandinamnioticfluidinPreeelampsia[J].AmJObstetGyneeol,2007,197(2):176.el-6.[26]LevineRJ,LamC,QianC,etal.Solubleendoglinandothercirculatingantiangiogenicfactorsinpreeclampsia[J].NEnglJMed,2006,35510:992-1005.[27]MaynardSE,MinJY,MerehanJ,etal.Excessplaeentalsolublefmsliketyrosinekinasel(sFlt-l)maycontributetoendothelialdysfunction,hypertension,andproteinuriainpreeelampsia[J].JClinInvest,2003,111:649一658.[28]WimCR,RossollRM.OestradiolregulationofantigenPresentationuterinestromalcells:roleoftransforminggrowthfactorProductionbyePithelialcellsinmediatingantigen一Presentatingcellfunction[J].Immunology,2003,109(3):398一406.[29]李大强,王志彪.胚胎植入与肿瘤侵袭转移的相似性[J].中国病理生理杂志,2004,20(2):1273一1277.[30]LoPez-NovoaJM.SolubleEndoglinisanAecuratePredictorandaPathogenicMoleculeinpre-Eclampsia,NephrolDialTransplant2007,22(3):712-714.[31]LevineRJ,MaynardSE,QianC,etal.Circulatingangiogenicfactorsandtheriskofpreeclampsia[J].NEnglJMed,2004,350.22 参考文献[32]LuftFC.Solubleendoglin(sEng)joinsthesolublefins-likettyrosinekinase(sFlt)recVEGF和PLGFeptorasapreeclampsiamolecule[J].NePhrolDialTran-SPlanL,2006,21(11):3052-3054.[33]NapolitanoM,MiceliF,CalceA,etal.Expressionandrelationshipbetweenendothelialmessengerribonucleicacidandinducible/endothelialnitricoxidesynthasemRNAisoformsfromnormalandpreeclampticplacentas[J].JClinEndocrinolMetab,2000,85(6):2318-2323.[34]SolemanlouN,Jurisical,NevoO,etal.MolecularevidenceofplaeentalhypoxiainPreeclamPsia[J].JClinEndoerinolMetab.2005;90(7):4299-4308.[35]ChenY,HaoQ,KimH,etal.SolubleendoglinmodulatesaberranteerebraVascularr-emodeling，AnnNeurol,2009,(66):19一27.[36]JeyabalanA,MeGonigalS,GilmourC,HubelCARajakumarA.CireulatingandplaeentalendoglinconcentrationsinPregnaneiescomplieatebyintrauterinegrowthrestrietionandPreeelamPsia.Plaeenta.2008;29:555一63.[37]MunautC,LorquetS,PequeuxC,BlaeherS,BerndtS,FrankenneF,etal.HyPoxiaisresponsibleforsolublevascularendothelialgrowthfaetorreeeptor-l(VEGFR-l)butnotforsolubleendoglininduetioninvilloustroPhoblast.HumReProd.2008;23:1407-15.[38]RobertsJM,GammillHS.PreeclamPs:recentinsights[J].HyPertension，2005:46(6):1243-1249.[39]CaniggiaI,TaylorCV,RitehieJWetal,EndoglinRegulatesTroPhoblastDifferentiationAlongtheInvasivePathwayinHumanPlacentalVillousExPlantsEndoerinology,1997,138(11):4977一4988.[40]RobinsonCJ,JohnsonDD.Solubleendoglinasasecond-trimestermarkerforPreeClamPsia〔J]AmJObstetGyneeol2007,197:174-175.[41]LinfertD,ChowdhryT,RabbH.Lymphocytesandischemia-reperfusioninjury[J].TransplantRev,2009,23(1):1-11.[42]SZANTOA,ROSZERT.Nuclearreceptorsinmacrophages:alinkbetweenmetabolismandinflammation[J].FEBSLett,2008,582(1):106116.[43]PloschT,GellhausA,vanStratenEM,etal.TheliverXreceptor(LXR)anditstargetgeneABCA1areregulateduponlowoxygeninhumantrophoblastcells:areasonforalterationsinpreeclampsia?[J].Placenta,2010,31(10):910-918.[44]王晶,丁立峰,尚丽新,等.妊娠期高血压疾病患者血清及胎盘组织中肝X受体α水平变化的研究[J].中国实用妇科与产科杂志,2011,27(2):148-150.[45]SandraH,McGladderySH,JiriJ,etal.LipoproteinlipaseandapoEpolymorphisms:relationshiptohypertriglyceridemiaduringpregnancy[J].JLipidRes,2001,42(11):1905-1912.[46]李刚,SchonfeldG.载脂蛋白B介导致动脉粥样硬化脂蛋白代谢的分子机制[J].中华心血管病杂志,2006,34(6):571-573.23 青岛大学硕士学位论文[47]LeikCE,CarsonNL,HennanJK,etal.GW3965,asyntheticliverXreceptor(LXR)agonist,reducesangiotensinII-mediatedpressorresponsesinSprague-Dawleyrats[J].BrJPharmacol,2007,151(4):450-456.[48]MorelloF,deBoerRA,SteffensenKR,etal.LiverXreceptorsαandβregulatereninexpressioninvivo[J].JClinInvest,2005,115(7):1913-1922.[49]孟涛,魏军,刘彤,等.氧化修饰低密度脂蛋白在子痫前期中的测定及意义[J].中国优生与遗传杂志,2006,14(10):21-105.[50]NagamatsuT,FujiiT,KusumiM,etal.Cytotrophoblastsupregulatesolubleliketyrosinekinase-1expressionunderreducedoxygen:animplicationforplacentalvasculardevelopmentandthepathophysiologyofpreclampsia[J].Endocrinology,2004,145:4838-4845.[51]CastrilloA,JosephSB,MaratheC,etal.LiverXreceptor-dependentrepressionofmatrixmetalloproteinase-9expressioninmacrophages[J].JBiolChem,2003,278(12):10443-10449.[52]PloschTGellhausAvanStratenEMetal.TheliverXreceptorLXRanditstargetgeneABCA1areregulateduponlowoxygeninhumantrophoblastcells:areasonforalterationsinpreeclampsiaJ.Placenta2010,31(10):910-918.[53]Henry-BergerJ,MouzatK,BaronS,etal.Endoglin(CD105)ExpressionIsRegulatedbytheLiverXReceptorAlpha(NR1H3)inHumanTrophoblast.Biol2008Jun,78(6):968-975.[54]杜伟.可溶性Endoglin、肝X受体α在妊娠期高血压疾病患者血清中表达水平及意义.安徽医科大学.2013.24 综述综述血管生成因子、肝X受体α与子痫前期的研究进展子痫前期（preeclampsiaPE)作为妊娠期特有的常见疾病之一，是一种严重威胁着孕产妇、围产儿生命安全的临床综合征，发生于妊娠20周后，以出现高血压和蛋白尿为显著特征，严重者临床上可出现视觉障碍、头痛、上腹痛、血液系统异常、肝肾功能异常、HELLP综合征、心衰、抽搐甚至死亡，对孕妇造成严重损害的同时，对胎儿、新生儿也会受到严重不良影响，如胎儿生长受限（FGR）、早产围产儿缺血缺氧性损伤或死亡，该疾病对于产妇和新生儿将来的健康也存在重大隐患如发生高[1]血压、心血管疾病、糖尿病及肾病综合症的风险也增加。据不完全统计，目前该[2,3]疾病发病率约2%-8%，在发达国家该病发病率约为2-5%，发展中国家其发病率约[4]为10%左右，在亚洲和非洲，它占到了孕产妇死亡人数的9%。近年来，随着医疗水平的进步，虽然对于子痫前期的诊治方法日趋完善，但其发病病因和发病机制至今尚未明了。由于病因不明，给预防及筛查带来很大的困难，因此对于该疾病的研究成为了妇产科研究的热点。目前关于子痫前期的病因及发病机制观点众多，诸如血管内皮损伤学说、脂质代谢紊乱学说、胎盘缺血氧化应激学说、胰岛素抵抗学说、前列腺素失衡学说、免疫学说、营养不良学说、遗传学说等。但是这几种学说之间并不是完全独立的，大量的实验研究证明，血管内皮功能损伤是子痫前期发病机制的中心环节。首先胎盘着床时母体界面血管网的发育异常引起胎盘浅着床，从而造成胎盘缺血、缺氧，胎盘局部出现氧化应激反应，同时孕期母体脂质代谢紊乱、炎症反应和免疫损伤等造成血管内皮细胞的进一步损伤，而血管内皮细胞损伤反过来又可以进一步加重胎盘着床问题，因此构成一个恶性循环，最终导致子痫前期的发生。当前这个学说引起了相关学者的广泛重视，成为大家在这项疾病研究上的共识。基于子痫前期发生的病理生理学基础，一些来源于母体或者胎盘滋养细胞的血清生物性标记物如胎盘生长因子（PIGF）、血管内皮生长因子受体1（VEGFR－1）、sEng、胎盘蛋白13（PP13）、妊娠相关血浆蛋白A（PAPP－A）、去整合素及金属蛋抑制素A或胱抑素C（CysC）等被发现在子痫前期孕妇血清中存[5]在明显的浓度变化。由母体和胎盘组织共同产生的生物学标记物sFlt-1和Endoglin（Eng），对于胎盘血管的形成与功能构建有不可或缺的作用，近年来引起[10]研究人员的重点关注。综合国内外研究发现，子痫前期患者普遍存在血脂代谢紊乱的特点，主要表现25 青岛大学硕士学位论文为血清中总胆固醇（totalcholesterol，TC）、甘油三酯（totalglycerin，TG）、游离脂肪酸（freefattyacid，FFA）、载脂蛋白B（apoB）、极低密度脂蛋白胆固醇（verylowdensitylipoprotein，VLDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（lowdensitylipoprotein，LDL-C）显著升高，而载脂蛋白A（apoA）、高密度脂蛋白胆固醇（highdensitylipoprotein，HDL-C）显著下降。参与血脂代谢过程的相关性标记物如肝X受体α（liverXreceptorα，LXRα）、胆固醇调节元件结合蛋白-1c（sterolregulatoryelement-bindingprotein-1c，SREBP-1c）、脂肪酸合酶（fattyacidsynthase，FAS）等存在明显升高，越来越多的实验证明这些因子的异常变化参与子[7]痫前期的发生发展。现针对与子痫前期的发病机制有关的血管生成因子及血脂代谢相关因子做一综述。1.滋养细胞浸润与子痫前期子宫螺旋动脉在子宫内膜中呈弯曲走向，承担着子宫内膜主要营养物质输入的同时，还通过胎盘满足胎儿的生长发育所需，它受人体内雌孕激素水平的影响。子宫螺旋动脉重铸以及滋养细胞侵袭在胎盘的形成过程中发挥重要作用，滋养细胞侵袭对于子宫螺旋动脉重铸也极为重要。滋养细胞的入侵过程尤为繁复，与肿瘤细胞[8]的生物学行为极为相似。简单来说就是自妊娠8-10周开始由绒毛外细胞逐渐侵入子宫螺旋动脉内部代替血管内皮细胞，再由子宫蜕膜内部向外反发展，到妊娠约16-18周滋养细胞侵袭达到子宫肌层内1/3的螺旋动脉，最终完成子宫螺旋动脉的生理性重铸。妊娠早期，滋养细胞侵袭蜕膜化的子宫内膜和肌层，使子宫螺旋小动脉失去正常肌层结构，转变为低阻抗血管，肌层被无定型纤维蛋白替代，侵入螺旋动脉内的滋养细胞取代血管内皮细胞，并且埋藏在这层无定型物质中，成为低阻大直径血管。被侵润的子宫螺旋动脉初为螺旋状血管，随着滋养层细胞侵蚀螺旋动脉肌层，其管腔逐渐扩张，开口逐渐增大，变成漏斗状，弹性丧失，血流阻力下降，[9-11]并且不受母体缩血管活性物质调节。重铸后的螺旋动脉细胞与之前相比，拥有更高的容量，并且相对阻力变小，以满足胎盘所需血流灌注，确保母胎之间物质正常[12]交换，从而保证胎儿的正常发育。有国外学者研究表示，子痫前期患者滋养细胞侵袭能力明显低于正常值。相关[13]数据表明，子痫前期病情越重，其侵袭能力就越低。在子痫前期的发病机制中，子宫螺旋动脉能否正常重铸是关键。在子痫前期，各种原因导致胎盘功能异常，从而引起相关细胞因子非正常表达，滋养细胞侵袭无法正常进行，螺旋动脉无法正常重铸，子宫螺旋动脉容量低，阻力大，致使胎盘灌注明显不足，使得子宫-胎盘-胎儿循环无法正常进行。在胎盘处于缺血缺氧状态时，胎盘所释放的细胞毒性因子明显增加，导致血管内皮损伤的发生，以至进一步引发全身血管炎性等异常的病理生26 综述理改变。在胎盘中存在着两类因子影响血管的生成：促进血管生成因子如血管内皮生长因子、胎盘生长因子、转化生长因子，存在于人胎盘滋养细胞，对子宫螺旋动脉的重铸起着积极作用；抑制血管生成的因子如可溶性血管内皮生长因子受体-1（sFlt-1）、可溶性Endoglin等，抑制滋养细胞的浸润。两类因子相互制约、相互平衡，对子宫螺旋动脉的重铸起着不可或缺的作用。当两类因子不能正常发挥作用时，滋养细胞侵入就会出现异常，子宫螺旋动脉无法完成正常重铸，引起胎盘灌注供给无法正常进行，胎盘呈现缺血缺氧状态，进而使得血管内皮损伤加剧。另有研究发现，LXRα对于组织的脂代谢功能也有严重影响，同样会使血管内皮损伤。因此，我们认为，子痫前期患者血清的sEndoglin和LXRα含量水平与其病情程度有着高度联系。2.血管生成因子与滋养细胞侵袭的关系当滋养细胞已植入血管时，植入部位的血管较正常血管通透性明显提高。在滋养细胞本体以及局部微环境如激素、细胞因子、生长因子和细胞外基质糖蛋白以及[14]各种转录因子等相互调节作用下，滋养细胞才得以实现正常浸润。子宫内膜细胞外基质（ECM）的降解对于滋养细胞能否正常浸润起着相当重要的作用，在浸润过程中，滋养细胞需要将ECM正常降解，而患有子痫前期时，ECM降解无法正常进行，滋养细胞入侵无法正常实现。2.1TGF-β转化生长因子（transforminggrowthfactor，TGF）家族是一类结构相关蛋白的异二聚体多肽，分为TGF-α和TGF-β，两者虽然都称之为转化生长因子，但是其结构和功能并无明显关联性。TGF-α的主要作用是为新生血管提供诱导因素；TGF-β并非具有单一功能，其拥有保证细胞正常增殖和分化的作用，在体内，TGF-β的主要功能是为细胞外基质的再生做保障，可以引导细胞生成不止一种的细胞外基质蛋白；从胎盘部位来看，胎盘中的TGF-β主要源自于子宫蜕膜，在合体滋养细胞中能发现TGF-β的存在。经相关研究可知，TGF-β在胎盘滋养细胞浸润的过程中也起〔8]着一定的作用。其中，TGF-β1的存在有着极大的作用，它不仅对相关分泌轴有着调节控制的作用，也与子宫内膜和滋养细胞有着密切联系。妊娠后，TGF-β1对于子宫内膜以及胚胎着床都有着重要意义。经研究发现，妊娠期子宫蜕膜和滋养细胞中均可检测出TGF-β1的存在，并且随着孕期时间的增长，其含量也逐步升高，并存在于整个胎盘生长期，因此，我们认为TGF-β1及其相关受体对于胎盘有着相[15]当重要的存在意义。[16]经研究证明，患有子痫前期的孕妇在妊娠后期，其TGF-β1的浓度较之正常孕妇有着明显增高，可达42%之多，过多的TGF-β1很有可能是引起子痫前期的发27 青岛大学硕士学位论文病原因之一。而另一方面的研究也表明，随着子痫前期患者病情加重，TGF-β1值也随之增加，细胞的死亡率表达同步增加。经一系列的分析表明，TGF-β1的值与细胞死亡率呈正相关，由此可证明，在子痫前期患者中，其胎盘滋养层细胞的非正[17][18]常死亡与TGF-β1有着极大的关系。学者涂文等人认为，子痫前期患者TGF-β1及相关受体含量升高，过多的TGF-β1及相关受体使得滋养细胞浸润无法正常进行，这可能与子痫前期的发生有密切关系。TGF-β1对于滋养细胞浸润有着极大的影响，通过一系列的生物性反应阻碍滋养细胞浸润的正常进行，这些生物性反应包含所有由TGF-β1引起的抑制滋养细胞浸润正常进行的相关行为，总之，TGF-β1及其受体以一系列的生物机制造成滋养细胞无法正常浸润，致使子宫螺旋动脉重铸异常进行，胎盘灌注无法满足，进而使得胎盘缺血缺氧、发育不良，最终导致子痫前期的发生。2.2sFlt-1可溶性血管内皮生长因子受体-1（solublefms-liketyrosinekinase，sFlt-1）是VEGF跨膜受体Flt-1的可溶形式，是一种抗血管生成蛋白，研究发现，大部分的sFlt-1的产生与胎盘有关，并且通过VEGF和PLGF起作用；另一部分则由Flt-1经一系列的水解分化而成，再作用于VEGF和PLGF，使VEGF和PLGF表达失常，血管无法正常生成的同时血管壁通透性增加。一系列的研究证明，在缺氧的环境中，细胞滋养层将产生sFlt-1，而sFlt-1[2021]值则随着缺氧程度的加重而升高。有学者以孕鼠做实验对象分别研究sFlF-1和sEng在单独使用至孕鼠体内与同时使用至孕鼠体内所产生的影响，实验表明，在同时注入组孕鼠多发生类似于子痫前期症状，而分别给予注入的孕鼠所表现的症状程度明显较轻。经观察得知，在正常妊娠绒毛培养液环境中，当有sFlt-1加入时，培养液对于绒毛发展的促进作用明显降低，由此证明，sFlt-1对于滋养细胞浸润有阻[22]碍作用。学者zhou等人曾作出研究，发现在滋养细胞发生侵入转化的过程中，sFlt-1对于此过程有着一定程度的阻碍作用，sFlt-1的表达量越多其产生的作用越大，最终导致滋养细胞侵入转化过程无法正常完成，子宫螺旋动脉的重铸受阻，子宫螺旋动脉仍旧处于高阻力低容量的状态，对胎盘的生长尤为不利，致使胎盘处于缺血缺氧状态，胎盘的此种状态则使得母体多处血管内皮出现损伤迹象，进而引发[24]血压升高。相关研究还发现子痫前期还会引起一系列的细胞非常态现象发生，这些研究表明，sFlt-1对于子痫前期的发病机制有着一定的作用，当sFlt-1存在过多时，将引发一系列的炎性反应，血管内皮损伤程度也明显增加，进一步导致子痫前期的发生。28 综述2.3EndoglinEndoglin（简写为Eng）也称为簇分化抗原（clusterofdifferentiation，CD)105，是分子质量为180KD的同型二聚体膜糖蛋白，在染色体中，Eng的基因存在于编码9q34。一个完整的Eng蛋白质包含633个氨基酸，其氨基酸的分布表现为大部分氨基酸分布于胞膜外部，有561个之多，其次则为胞膜内部，达到47个，剩余部分皆位于跨膜区。经研究发现，Eng是TGF-β受体复合物的组成成分之一，在血管新生过程中，Eng作用必不可少。TGF-β的主要作用包括：调节细胞增值与分化；影响细胞外机[25]制的代谢；对血管的生成有着极大影响。当Eng与TGF-β相结合时，Eng的磷酸化值将明显减少，极大的影响TGF-β的正常功能，使得TGF-β1无法正常工作，恢复血管再生。2.4sEng经学者研究表明，可溶性Eng（sEng）源自于Eng，是经过MT1-MMP酶解后的产[26]物，妊娠妇女的血清中sEng水平明显高于非妊娠妇女，而子痫前期孕妇的血清sEng水平相较于正常妊娠孕妇则表现更高。在子痫前期患者中，胎盘组织中的sEng及EngmRNA含量比正常妊娠者高出4倍。另有学者Romero等人发现，正常未孕妇女的血清中，其sEng值极低甚至没有，而在妊娠期则很容易检测到，并且会随着孕期的增长逐渐升高，妊娠第25周后大幅增高，在分娩前达到最高值，分娩后逐渐恢复。经实验发现，子宫灌注压减少，造成胎盘缺血，增加了sEng的表达，并打破母体血循环中血管形成因子的平衡，可能是子痫前期发病的重要机制。对于sEng为什么能引起子痫前期的发生，至今为止并没有明确的机制阐明。（1）主流学术研究认为，sEng与本该与TGF-βR相结合的TGF-β1结合，使得原本应正常传导的TGF-β1信号无法进行正常传导，血管的形成受到阻碍，从而血管通透性[27]增加。另有学者认为，VEGF和PLGF对血管生成起着极大的促进作用，然而因为sEng以及sFlt的出现，使得两者不能进行正常促进行为，从而导致血管生成障碍以及细胞内皮损伤。（2）研究还表明，TGF-β1可将Thr495去磷酸化，sEng的出现阻断了这一过程，从而使得NOS不能被正常激活，NO产生减少，使得血管舒缩不[28]能正常进行。（3）还有研究表明，因sEng而造成的TGF-β1未能与Eng正常结合，抑制TGF-β1将eNos中Thr495去磷酸化，进而导致eNOS不能被正常激活，致使原本该正常进行的一系列后续反应不能正常进行，致使血管舒缩失常，从而导致子痫前期相关症状凸显，如高血压及蛋白尿等。（4）sEng的存在受氧浓度影响，在正常组织中，能检测出的sEng量极少，甚至没有，而当组织处于缺氧状态时，sEng量会随着缺氧程度的加深而逐步升高，在低氧诱导因子-1(HIF-1)的介导下Eng表达上调，sEng也随之表达增加，阻断TGF-β1促进内皮细胞增殖和血管形成的作29 青岛大学硕士学位论文用，胎盘血管无法实现重铸，滋养细胞浸润层浅，胎盘浅着床，螺旋动脉阻力大容量小，血管内皮细胞损伤加剧，进而出现子痫前期临床病症。2.5血管生成因子之间的相互联系研究证明，在妊娠期子宫蜕膜及滋养细胞中均有TGF-β1及其受体mRNA的表达，且于孕中、晚期达高峰，说明TGF-β1及其受体参与了母-胎之间的相互作用，并在调节胎盘成长、分化上起重要作用。sEng是一种可溶性受体，与TGF-β1有着高亲和力。VEGF和PLGF拥有促进血管生成的作用，而sFlt则可抑制这种作用，阻碍血[29]管生成，对于血管壁也有极大的影响。曾有学者以孕鼠做实验对象分别研究sFlt-l和sEng在单独使用至孕鼠体内与同时使用至孕鼠体内所产生的影响，实验表明，在同时注入组孕鼠多发生类似于子痫前期症状，由此可知，在子痫前期中，sFlt-l和sEng有着协同作用。另有证明，在子痫前期孕妇中，随着其血清中的sEng量的提高，sFlt：PLGF值也随之升高，总结以上可知，sEng、sFlt以及PLGF在子痫前期中皆存在着一定作用。3肝X受体α与子痫前期肝X受体曾被叫做孤儿受体，缩写为LXR（liverXreceptors），属于孤核受体超家族。在人类染色体中，LXR基因属于18q23.1，主要包括LXRα和LXRβ。LXRα与代谢有着密切关系，经研究得知其含量最高值表达于肝脏中，其次，机体其他组织如脾、小肠、肺、脂肪细胞等也有表达，在胎盘以及蜕膜组织中，也能发现LXRα。LXRα参与脂质代谢，同时也影响血管内皮生成及滋养细胞的增殖和浸润。在针对子痫前期的研究中得知，患有子痫前期的孕妇，其机体内存在的对血管有不良影响的TC/TG高于正常值，而有益于血管的HDL-C则明显低于正常值，血脂代谢不能正常进行，当TG高于正常值时，将导致内皮损伤；而若TG明显升高，其LPO作用也将随之增强，因而产生的自由基将对血管内皮细胞产生更大损伤。[30]研究表明，LXR可以减少胎盘血流量，导致子痫前期病症，主要原因是LXR抑制MMP-9的正常表达，从而导致螺旋动脉不能随着妊娠期孕妇身体机能的改变而改变。即便同属LXR，其不同成分所产生的机制也不尽相同，例如其激动剂会致使滋养细胞的hCG分泌大量减少，峰值可达45%；而其拮抗剂GGPP则刚好与其作用相反，可以提升hCG的分泌，hCG则关系着滋养细胞的侵袭能力等相关功能。由此可知，肝X受体α表达水平升高可能损伤血管内皮细胞、影响滋养细胞的浸润，引发子痫前期。对于子痫前期，其发病机制并不明确，在子痫前期的发生、发展中，血管生成因子是很大一部分影响因素，但是血管生成因子众多且作用不尽相同，每个因子以何种方式存在、在子痫前期发生发展中如何发挥作用以及各个因子的相互关系尚未30 综述得到确认。研究表明，LXRα与子痫前期有着极大的关系，主要表现在脂类代谢，血管内皮损伤等方面。若能进一步研究血管生成因子以及肝X受体α与子痫前期之间的关系，对于将来相关的临床诊断将能提供更好的参考依据。31 青岛大学硕士学位论文参考文献[1]SchneiderS.Gestationaldiabetesandpreeclampsia.Similarriskfactorprofiles?Early.[2]ZeemanG.NeurologicComplicationsofPre-eclampsia[J].SeminPerinatol，2009;33(3):167-172.[3]AukesAM,DeGrootJC,WiegmanMJ,etal.Long-termcerebralimagingafterpre-eclampsia[J].BJOG.2012;119(9):1117–1122.[4]DuleyL.TheglobalimpactofpreeclampsiaandecJampsia[J].SeminPerinatol,2009,33:130~137.[5]ShettyM，ShettyPK,ＲameshA，etal.PeriodontaldiseaseinpregnancyisariskfactorforpreeclampsiaJ].ActaObstetGynecolScand,201089(5):718－721.[6]BiggarＲJ,PoulsenG,NgJ,etal.HLAantigensharingbetweenmotherandfetusasariskfactorforeclampsiaandpreeclampsia[J].HumImmunol,2010,71(3):263－267.1RedmanCW,SargentIL,LatestAdvaneesinUnderstandingPreeclamps-aScience,2005,308(5728):1592一1594.[7]缪学钦.LXRα、SREBP-1c介导脂质代谢紊乱在子痫前期中的作用及机制.福建医科大学.2013.[8]SchillingB,YehJ.Transforminggrowthfactor-beta(1),beta(2),-beta(3)andth-eirtypeIandreceptorsinhumantermpla-centa[J].GynecolObstetInvest,2000,50:19-23.[9]PapageorghiouAT,YuCK,NicolaideskH.Theroleofuterinearteryinpredictingadversepregnancyouteome[J].BestPractResClinObstetGynaecol,2004,18(3):383一396.[10]WangHY,DuanYY,YinGW,etal.Studyonfai1edtrophob1asticinvasionofthespiralarteriesinPregnancyindueedhypertensionbycolorDopplerultrasonography[J].ChinJMedImagingTechno,2003,19(3):304一306.[11]Lyal1F.Printingandremodelingofhumanplacentalbedspiralarteriesduringpregnancy一areview[J].Placenta,2005,26(Supp1A):S31一36.[12]Red-HorseK,ZhouY,GenbacevO,etal.TroPhoblastdifferentiationduringEmbryoimPlantationandformationofthematemal-fetalinterface.[J].JClinInvest,2004，114(6):744一754.[13]MadazliR,BudakE,CalayZ,etal.CorrelationbetweenPlaeentalbedbiopsyfindings，vascularcelladhesionmoleeuleandfibronectinlevelsinPreeclampsia.BrJObstetGyn-aecol.2000.107:51一54.[14]DasC,KumarVS,GuptaSetal,NetworkofCytokines,IntegrinsandHormonesinHumanTrophoblastCells,JReprodImmunol,2002,53(1-2):257-268.[15]孙刚.胎盘内分泌的基础与临床.上海:第二军医大学出版社，2001:2.32 综述[16]Muy-RiveraM,SanchezSE,VadachkoriaS,etal.TransformingGrowthFactor-β1(TGF-β1)inplasmaisassociatedwithpreeclampsiariskinPeruvianwomenwithsystemicinflammation[J].AmJHypertens,2004,17(4):334-338.[17]孙壮状,王琳,王卓然,等.整合素β3(Integrinβ3)和转化生长因子-β1(TGF-1)在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义[J].中国优生与遗传杂志,2008,16(9):25-26.[18]涂文,乔福元,许建平.TGF-1及TGFRmRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义[J].中国优生与遗传杂志,2006,14(11):14-15.[19]KarmakarS,asC.egulationoftrophoblastinvasionbyIL-1betaandTGF-beta[J].mJReprodImmunol,2002,48:210-219.[20]NagamatsuT,ujiiT,usumiM,tal.Cytotrophohlastsup-regulatesolublefmsliketyrosinekinase-1expressionunderreducedoxygen:imPlicationforthePlacentalvasculardevelopmentandthepathophysiologyofpreeclampsia[J].Endoelinology，2004:145(11):4838-4845.[21]AhmadS,hmedA.levatedPlacentalsolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-1inhibitsangiogenesisinPrecelampsia[J].ircRes，2004;5(9):884-891.[22]ZhouY,eMasterM，WooK，etal.VaseularendothelialgrowthfaetorligandsandreceptorsthatregulatehumancytotroPhoblastsurvivalaredysregulatedinseverePreec-lamPsiaandhemolysis,levatedliverenzymes,ndloWPlateletssyndrome.mJPathol，2002,60(4):1405-1423.[23]Redmanew,arsentIL.Latestadvancesinunderstandingpreeelampsia.Seienee2005，308(5728):1592一1594.[24]KrysiakO,retsehLneiderA，ZhongE,tal.Solublevascularendothelialgrowthfaetorreceptor-1(sFLT-1)mediatesdownregulationofFLI-1andPrevenisactivatedneutroPhilsfromwomenwithPreeclampsiafromadditionalmigrationbyVEGF.CireRes，2005,7(12):1253一1261.[25]SalahuddinS,eeY,adnaisiM,lal.Diagnosticutilityofsolubleftns-liketyosinekinaseandsolubleendoglininhypertensivediseasesofpregnaney.AmJObstetG皿ecol,007,97(l):28.[26]Velasco-LoydenCArribasJ,Lpez-CasillasF.Thesheddingofbetaglycanisregulatedbypervanadateandmediatedbvmembranetypematrixmetalloprotease-1[J],BiolChem.2004.279(9):7721-7733.[27]VenkateshaS,oporsianM,amC,tal.olubleendoglincontributestothepathogenesisofpreeclampsiaNat[J].Med,2006,2:2-649.[28]LevineRJ,aynardSE,ianC,etal.irculatingangiogenicfactorsandtheriskofpreeclampsia[J].nglJMed,2004,350.[29]LevineRJ，MaynardSE,QianC,etal.Circulatingangiogenicfactorsandtheriskofpreeclampsia[J].NEnglJMed，2004,50(7):672一683.33 青岛大学硕士学位论文[30]GeyereggerRShehataMZeydaMetal.iverXreceptorsinterferewithcytokine-inducedproliferationandcellsurvivalinnormalandleukemiclymphocytesJ.LeukocBiol20098651039-1048.34 攻读学位期间的研究成果攻读学位期间的研究成果1.在《中国医药》发表论文《异位妊娠破裂一例》；2.在《医师在线》发表论文《血管生成因子、肝X受体α与子痫前期的研究进展》。35 青岛大学硕士学位论文致谢参加同等学力考试，是我最正确的选择，不仅学到了知识，更认识了老师，结交了朋友。是她们给予我帮助，让我顺利完成学业，度过一个愉快而又让人难忘的学习阶段。首先，我要感谢我的导师齐卫红副主任医师，进修时已被她扎实的基础、严谨的态度、求真的作风所感染。作为我的导师，时刻关心我论文进展情况，不断探讨论文中的缺陷、问题，力求把论文写完美，把工作做精致。其次，我也感激院领导和老师们给予的帮助。感谢和我一起学习的同学们，史翠霞、刘玮，她们乐观、积极向上的态度影响了我，作为一名妇产科医师，只有自己时刻保持乐观精神，严谨的工作态度才能给病人以希望。最后，感谢家人，是他们的无私奉献给了我坚定的信心。36