内源性orexin-a调控大鼠胃运动及机制研究

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1、分类号：R338.2密级：无UDC：570学校代码：11065硕士学位论文论文题目内源性Orexin-A调控大鼠胃运动及机制研究周华指导教师徐珞教授学科专业名称病理生理学论文答辩日期2015年11月28日摘要目的:探讨内源性Orexin-A对大鼠胃运动作用及作用机制。方法:选取286只成年Wistar大鼠为研究对象。通过禁食诱导内源性Orexin-A表达；放射免疫法测定血浆Orexin-A浓度；采用迷走神经切断术观察迷走神经的介导作用；分光光度法测量胃排空；胃窦部植入应力传感器测量消化间期胃运动变化；采用蛋白印迹检测Orexin前体(PP

2、O)在胃和下丘脑组织中的表达。通过免疫组化观察禁食36h对胃Orexin-A阳性细胞表达的影响。结果：禁食可诱导内源性Orexin-A的表达。与非禁食组相比，禁食18h组血浆Orexin-A浓度升高(P<0.05)，在禁食36h组达到最高(P<0.01)。内源性Orexin-A促进胃排空(P<0.05)，抑制消化间期胃运动(P<0.05)。与非禁食组相比，禁食36h胃和下丘脑组织中PPO蛋白表达显著升高(P<0.05)。外周注射SB334867均能阻断上述胃动力效应(P<0.05)，但对PPO表达没有影响。迷走神经切断术不能阻断内源性Or

3、exin-A的介导作用(P>0.05)。免疫组化显示，与非禁食组相比，禁食36h大鼠胃粘膜组织及肌间神经丛内Orexin-A免疫阳性细胞表达显著增加。结论:禁食能诱导内源性Orexin-A的合成，内源性Orexin-A能加速胃排空，同时它又抑制消化间期胃运动。关键词：禁食；胃动力；Orexin-A；orexin前体；大鼠硕士研究生：周华（病理生理学）指导教师：徐珞教授ABSTRACTObjective：ToinvestigatethecentralandperipheraleffectsofendogenousOrexin-Aongast

4、ricmotilityinrats.Methods：Selecting286adultWistarratsforthestudy,thesynthesisofendogenousOrexin-Awasinducedbyfasting.PlasmaOrexin-Aconcentrationwasmeasuredbyradioimmunoassay.RatswerepretreatedwithOrexin-AreceptorantagonistSB-334867priortomeasurementtoobservetheeffectofOre

5、xin-A.Vagotomywasusedtoobservevagusnerve-mediatedeffects.Gastricemptyingwasmeasuredbyspectrophotometricmethods.Onestraingaugetransducerswereattachedontheantrumtorecordinterdigestivegastricmotility.Preproorexin(PPO)expressioninstomachandhypothalamusweretestedbyWesternblot.

6、Orexin-Aimmunoreactivityinantrumwasdeterminedwithimmunohistochemistry.Results：FastingcouldinducethesynthesisofendogenousOrexin-A.Comparedwithfeedinggroup,thelevelofplasmaOrexin-Aof18hfastinggroupsignificantlyincreased(P<0.05),thehighestlevelappearedin36hfastinggroup(P<0.0

7、1).EndogenousOrexin-Apromotedgastricemptying(P<0.05),inhibitedgastricinterdigestivemotility(P<0.05).Comparedwithfeedinggroup,PPOproteinexpressionofstomachandhypothalamustissuesin36hfastinggroupwassignificantlyincreased(P<0.05).AstheseeffectswereabolishedwithinjectionofSB-

8、334867,butnoeffectonPPOexpression.VagotomysurgerydidnotblockendogenousOrexin-A-mediatedeffects(P