五虎汤对rsv诱发幼年大鼠喘气道重塑模型的影响

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1、分类号：学校代码：学号：密级：湖南中医药大学博士学位论文五虎汤对诱发幼年大鼠喘气道重塑模型的影响学科专业：中医儿科研究方向：小儿肺系疾病作者姓名：李海霞导师姓名、职称：王孟清教授学位类型：科学学位中国湖南长沙二零一五年五月原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是在导师指导下，独立进行研究工作所取得的研究成果。文中除注明引用的内容外，不包含有任何已发表的科研成果，对本文提供重要帮助的单位和个人均己明确标注并以致谢。本声明的法律责任完全由本作者承担。作者签名：杏珥良年月曰关于学位论文使用授权说明本人完全了解湖南中

2、医药大学有关收集、保留及使用学位论文的规定，即：学校可以釆用复印、缩印或其它手段保存学位论文；可以公布学位论文的全部或部分内容，允许学位论文被查阅和借阅；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文或通过国内有关权威机构收录论文全文，向社会提供信息服务。、人士？亡、年月曰中文摘要目的：本文在建立病毒诱发幼年大鼠哮喘气道重塑模型的基础上，从体内研究五虎汤对哮喘大鼠血清中、肺组织、及气道重塑的影响；体外研宄五虎汤含药血浆对及受体和表达的影响，以及与之间的相互关系，从调整网络紊乱达到改善气道重塑，为进一步阐明五虎汤

3、防治病毒诱发儿童哮喘机理提供实验依据。方法：建立模型：将只幼年大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组与地塞米松组，每组只，于实验第、天哮喘模型组与地塞米松组以滴鼻联合〇皮下注射，第天以雾化吸入，每次，隔日一次，持续正常对照组以细胞滴鼻联合生理盐水致敏、激发作为对照。通过测定气道反应性，留取作细胞计数与分类，肺组织染色及染色观察其病理变化及胶原纤维沉积情况，验证模型建立成功与否。体内实验：将只幼年大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、五虎汤高、中、低剂量组，除正常对照组外，其余各组均建立哮喘气道重塑模型，于

4、实验第天起，五虎汤高、中、低剂量组分别予、、浓度的五虎汤，每日分次灌胃，持续，正常对照组与哮喘模型组予生理盐水灌胃，地塞米松组予地塞米松溶液（灌胃，每日次，持续。观察各组大鼠反应情况时，病理形态学方法分析气道重塑的相关指标，免疫组化法检测肺组织表达，法测定血清中水平，法检测肺组织及蛋白相对含量，法测定肺组织中、丨及的表达。体外实验：分离正常对照组和哮喘模型组大鼠气道上皮细胞，进行原代培养并传至代后，将细胞进行分组：组为正常气道上皮细胞，不做任何处理；组为哮喘气道上皮细胞，不做任何处理；组为哮喘气道上皮细胞；组为

5、哮喘气道上皮细胞加入、抗组、组分别为哮喘气道上皮细胞五虎汤高、中剂量含药血浆；组、组分别为哮喘气道上皮细胞与五虎汤高、中剂量含药血浆，均处理后，应用法和小室法分别检测气道上皮细胞增殖量及迁移数量，法及法分别测定受体和及蛋白表达水平，法检测气道上皮细胞中表达。结果：建立模型：与正常对照组比较，哮喘模型组大鼠出现明显的喘息、烦躁、竖毛耸肩、口唇发绀、体重增长缓慢及精神差等，染色及染观察发现大量炎性细胞浸润，以嗜酸性粒细胞为主，量化气道学参数明显升胶原纤维沉积大量增多等，气道阻力显著增高（地塞米松组较哮喻模型组哮喘症

6、状及相应病理变化均有所减轻。丨体内实验：（与正常组比，模型组大鼠出现明显喘息症状，五虎汤高、￥剂量组喘息等症状较模型组明显减轻，地塞米松组大鼠症状亦有所缓解，五虎低剂量组大鼠喘息缓解不明显；（与正常组比较，模型组病理切片镜下可见义量炎性细胞、管腔狭窄、粘液分泌增多、气道平滑肌显著增厚且排列紊乱、粘下可见较多胶原样物质沉积，气道重塑量化指标、肺组织表达值均显著增高（与模型组比较，五虎汤高、中剂量组及地塞米松组镜下病理改变程度明显减轻，且气道形态学参数各项指标、阳性表达值曰彳显降低（，五虎汤低剂量组与其差异不明显（

7、尸与正常比较，模型组大鼠血清中表达明显增高（，各治疗组均能降低水平，以五虎汤高、中剂量组较明显（，且下降程度较低剂量组、塞米松组差异具有统计学意义（，五虎汤各剂量组降低表达程度均优于地塞米松组（，与正常组比较，模型组肺组织蛋白的表达均明显升高（，予药物干预后，五虎汤高、剂量及地塞米松组蛋白表达显著下降（，且三组间无差异（，五虎汤低剂量组蛋白减弱较模型组差异无计学意义（尸与正常组比，其余各组肺组织相对表达量均升高，与模型组比，各治疗组的表达均显著下降五虎汤高、中剂量组较低剂量组、地塞米松组下降有明显统计学意此二组

8、之间无差异（尸与正常组比较，模型组大鼠的表达明显升高（尸与模型组比，五虎汤中剂量组表达水平显著降低（均且二组之间无明讀差异（尸但仍高于正常组（尸，低剂量组及地塞米松组与模型组比较无显著差异（均五虎汤高、中剂量组及地塞米松组表达水平较模型组均明显降低（尸，五虎汤高、中剂量组之间差堯无统计学意义（〉，较地塞米松组表达差异具有显著性；五虎汤低剂量组较模型组差异无统计学意义（。3.体外实验：（