严重烧伤大鼠肠道treg对t淋巴细胞免疫功能的影响和th17treg变化对肠黏膜屏障损伤的影响

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1、分类号：密级：UDC：学号：416523212169南昌大学专业学位研究生学位论文严重烧伤大鼠肠道Treg对T淋巴细胞免疫功能的影响和Th17/Treg变化对肠黏膜屏障损伤的影响RegulatoryTcellEffectsonintestinalT-cellimmunefunctionandThechangesofexpressionofTHelper17cellandRegulatoryTcellanditeffectsonintestinalbarrierinjuryinSeverelyBurnedRats熊林朋培养单位（院、系）：南昌大学第一附属医院指导教师姓名：张红艳教

2、授主任医师专业学位种类：医学硕士专业领域名称：外科学（烧伤）论文答辩日期：2015年5月27日答辩委员会主席：评阅人：2015年5月学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同

3、意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公

4、开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要第一部分严重烧伤大鼠肠道调节性T细胞(Treg)对T淋巴细胞免疫功能的影响+目的：体外分选严重烧伤后大鼠肠道淋巴结中CD3T细胞及Treg细胞，予以不+同浓度Treg与CD3T细胞体外共培养，以此来探讨Treg浓度的升高对肠道T细胞免疫功能的影响。方法：将10只SD大鼠用控时控温控压蒸汽烫伤仪在每只大鼠背部造成全身体表面积为30%的III度烧伤，于伤后12小时颈椎脱臼处死大鼠，提取肠道淋巴+细胞，抗原特异性玻璃柱法纯化CD3T细胞，采用免疫磁珠分选技术分选+CD4+CD25+Treg细胞，将纯化后的CD3T细胞随机

5、分成空白对照组和A、B、6C、D共4个浓度组。各组CD3+T细胞均为10个，其中空白对照组不加Treg，4445各个浓度组分别加入1×10、2×10、5×10、1×10个分选好的Treg细胞，体外共培养12小时后，采用流式细胞技术检测CD4+/CD8+T细胞、Th1/Th2细胞比例及T细胞凋亡率；采用ELISA方法检测IL-2和IL-10在培养液上清中的表达变化。结果：（1）严重烧伤后不同浓度的Treg作用于T细胞后，随着浓度升高，各组CD4+、CD8+T细胞数目逐步下降，CD4+/CD8+T细胞比例也随之下降，与空白对照组(1.22±0.12)比较，A组(0.95±0.08)

6、比例出现下降，D组(0.35±0.09)比例明显下降，各组差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）严重烧伤后不同浓度的Treg细胞作用于T细胞后，与空白对照组比较，各组Th1/Th2细胞比例逐渐下降，随着浓度的升高，Th1细胞比例降低，Th2细胞比例明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）严重烧伤后不同浓度的Treg作用于T细胞后，随浓度升高，各组T细胞总调亡率逐步升高，与空白对照组(32.04±1.84)比较，A组(35.25±2.04)T细胞总调亡率升高，D组（51.69±1.47）T细胞总调亡率明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）（4）与空白对照组比

7、较，随浓度升高，各组培养上清液的IL-2表达下降，II摘要差异有统计学意义(P<0.05)；而IL-10表达升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：大鼠严重烧伤后肠道Treg细胞的升高，可能参与了肠道的T细胞免疫紊乱的过程。随着Treg浓度的升高，CD4+/CD8+T细胞比例也随之下降，促进Th1向Th2飘移，T细胞凋亡率升高，IL-2表达下降、IL-10表达升高，产生免疫抑制状态，适度减少Treg的数目或抑制其活性，可能作为纠正烧伤后免疫功能抑制状态的一个新的靶点。关键词：烧伤、调节