mir-92a在前列腺癌中的表达及意义

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1、分类号:R737.25学校代码:10062密级:学号:2012602382硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目:miR-92a在前列腺癌中的表达及意义TITLEExpressionandsignificanceofmiR-92ainprostatecancer一级学科:临床医学二级学科:外科学泌尿外论文作者:陈晓博指导教师:乔宝民天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号:R737.25学校代码:10062密级:学号:2012602382学位类别:科学学位专业学位学科门类:医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目:miR-92a在前列腺癌中的表

2、达及意义TITLEExpressionandsignificanceofmiR-92ainprostatecancer一级学科:临床医学二级学科:外科学泌尿外论文作者:陈晓博指导教师:乔宝民导师组成员:张昌文杨阔张志宏天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外,论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完

3、全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文,并编入有关数据库。保密,在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。(请在相对应的方框内打“√”)学位论文作者签名:日期:年月日导师签名:日期:年月日天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的了解miRNA-92a在前列腺癌组织及细胞系中的表达水平,探讨miRNA-92a异常表达对前列腺癌细胞生物学行为的影响,并对其可能的分子机制进行探索。方法收集天津市泌尿外科研究所保存的接受前列腺癌根治性切除

4、术的100例前列腺癌(Pca)患者组织标本及行TUR-P的60例良性前列腺增生(BPH)患者的样本组织,分别提取总RNA,进一步RT-qPCR方法检测在Pca和BPH组织中miRNA-92a的表达水平,并对其检测结果进行统计分析。选取天津市泌尿外科研究所前列腺疾病研究室冻存的各种前列腺癌细胞系和正常前列腺上皮细胞系,包括PC3、C4-2和LNCaP3种前列腺癌细胞系以及RWPE-11种正常前列腺上皮细胞系。分别提取总RNA,进一步RT-qPCR方法检测并验证在PC3、C4-2、LNCaP及RWPE-1四种细胞系中miRNA-92a的表达水平,并对检测结果进行统计学分析。通过在前列腺癌细胞系内转

5、染miRNA-92amimic、miRNA-92ainhibitor及其对照,并检测细胞的增殖能力、凋亡和周期的变化。利用生物信息学方法,选取miRanda、TargetScan、PicTar3种靶基因预测软件均可测到的交集基因,进一步在SearchmiRò中预测与疾病相关性,从而初步筛选出可能与肿瘤相关的靶基因,并通过RT-qPCR方法检测各靶基因mRNA的表达水平。从而探讨异常表达的miRNA-92a在前列腺癌发生、发展中的作用。结果与良性前列腺增生组织相比,miR-92a在前列腺癌组织中的mRNA相对表达水平显著增高,且差异具有统计学意义(P<0.01)。通过RT-PCR方法检测人正常前

6、列腺上皮细胞系RWPE-1和三种前列腺癌细胞系(PC3、LNCap、C4-2)中miRNA-92a的表达,发现在PC3细胞系中miRNA-92a的表达量相对其它细胞系明显上调。利用Lipo2000转染miRNA-92amimic和miRNA-92ainhibitor及其阴性对照至PC3细胞系,提取转染24小时后细胞RNA,行RT-PCR检测,结果显示miRNA-92amimic和miRNA-92ainhibitor转染PC3细胞后,能较明显上调及下调miRNA-92a的表达水平。在PC3细胞内转染miRNA-92amimic、miRNA-92ainhibitor及其对照后,发现在上调miRNA

7、-92a的表达后能显著提高细胞的增殖能力,反之下调其表达后细胞的增殖能力受到抑制;上调miRNA-92a的表达后PC3细胞的凋亡率明显低于其阴性对照组,而下调其表达后细胞的凋亡率要高于其阴性对照组;上调miRNA-92a的表达能够促进细胞从G0/G1期进I天津医科大学硕士学位论文入S期,而下调miRNA-92a后,细胞在G0/G1期较对照组明显阻滞,并伴随S期细胞减少。利用生物信息学方法,选取mi

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