klf2与s1pr1对支气管哮喘豚鼠中性粒细胞迁移的影响

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2、Ｉ指导教师签名：＼论义评阅人１；多狂於嫂墙喃大起祗雜二ｇ駭｜评阅人２：靖蟲庭赖於Ｊ吝良邱中魚评阅人３：答辩委员会主席：黃倍顿敕媳祝孚贿燒瓣盛二展檢？１委员：畫捕斯赖觀滿导南皋诚瑜島象：風醇委员２；敢嗔画敌撒滿Ｉ鋪南絲４戾输委员３：拥￡扳旅聽碗＃魂惑魁襄换＾年妾巧４１：培东蟲画继碱朝南怎克年庭换吁麥员５：＇Ｔ）Ｕ答辩期：２口Ｉ年王；］三Ｉ」南华大学学位论文原创性声明本人声明，所芒义的学位论文是本人件．导师巧巧下进行的妍究工作发取得的研究化果

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5、义后适２旭ｉ笠名賓ＶＷ化技年冲Ｉ葱签＞Ｈ］甘帅打（１KLF2与S1PR1对支气管哮喘豚鼠中性粒细胞迁移的影响研究生戴芳芳导师朱黎明教授摘要：目的：通过观察支气管哮喘豚鼠模型中性粒细胞中KLF2、S1PR1的表达情况，探讨KLF2与S1PR1对支气管哮喘豚鼠中性粒细胞的迁移的影响，从而为支气管哮喘的防治提供新的思路。方法：随机将30只豚鼠分为正常对照组、哮喘组、哮喘治疗组，每组各10只；模型组及治疗组通过用10%OVA及FCA致敏，1%OVA雾化激发诱导成支气管哮喘模型，治疗组在雾化激发前腹腔注射地

6、塞米松治疗，对照组用生理盐水替代OVA与模型组同步实验。通过观察各组豚鼠雾化激发后的症状变化及肺组织的病理学改变，并比较各组血及肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类计数，应用肺功能检测各组豚鼠的气道阻力变化。分离各组豚鼠血中性粒细胞，采用Transwell小室检测各组血中性粒细胞迁移情况，RealtimePCR、Western-blot分别检测各组豚鼠血中性粒细胞中KLF2、S1PR1mRNA和蛋白的表达，ELISA检测各组肺泡灌洗液及血清中S1P的蛋白表达情况，免疫荧光检测KLF2在各组豚鼠血中性粒细胞内的表达及定位。

7、结果：1.支气管哮喘动物模型的成功构建（1）各组豚鼠雾化激发后体征变化的观察：在OVA雾化激发期间发现哮喘组豚鼠出现明显的呼吸频率增快、前爪抓鼻、点头呼吸、打喷嚏、咳嗽及腹肌抽搐等典型的哮喘样症状，治疗组豚鼠也出现上述症状但程度较哮喘组明显减轻，正常对照组无异常反应。（2）气道阻力的测定：哮喘组豚鼠的气道阻力随着乙酰甲胆碱浓度的升高而增加，与正常对照组比较，差异有统计学意义（P<0.01）；哮喘治疗组与哮喘组比较在各浓度刺激下的气道阻力水平下降（P<0.01）。（3）肺组织的病理学观察结果：正常对照组显示支气管、肺

8、泡及肺组织结构完整，炎性细胞浸润少；哮喘组豚鼠显示支气管重塑，管腔变狭窄，肺泡及肺组织结构破坏，管腔内可见较多粘液栓及粘膜皱褶增生、平滑肌细胞明显增厚及大量炎症细胞浸润等典型的病理学改变，其中以中性粒细胞浸润最明显；治疗组基底膜、平滑肌层仍有增厚，但支气管粘膜水肿及炎性细胞浸润明显好转。（4）各组豚鼠BALF液中细胞总数及分类计数：哮喘组豚鼠细胞总数（124