西洋参种子休眠解除与萌发分子机理研究

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1、長方京碱和巧f條中3钟《化硕±研究生学位论文義化京协和医学院研究生院学校代码:00231学号!S2012009011硕±学位论文西洋参种子休眠解餘与萌发分子机理硏究ResearchontheMolecularMechanismofSeedDormancReleaseandGerminationofPanaxyuinueoliumL.qqf所院:药用植物研究所姓名:孙同玉指导教师;祁建军副研究员导师小组:祁建军副研究员李先恩研究员学科

2、专业;生药学研究方向:药用植物生物技术日期一完成:二零五年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进巧的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加W标注和致谢的地方外,不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢〇'局、学位论文作者签名:签字日期:年/月V日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解北京协和医学院有关保存、使用学位论文的管理

3、办法。有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阀。本人授权北京愤和医学院可W将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文(保密的学位论文在解密后适用本授权书)\;学位论文作者签名;导师签名切1A-,!年^月曰签字曰期;如?年月M曰签字曰期:如]:)学位论文作者毕业后去向:工作单位:电话:通讯地址:邮编:目录摘要1ABSTRACT2一第章文献综述51植物激素调控

4、种子休眠与萌发的分子机理51.1植物激素ABA调控种子休眼与萌发的分子机理51.2植物激素GA调控种子休眠与萌发的分子机理71.3巧它植物激素调控种了休眠与萌发的分了化理82西洋参种子休眠与萌发的硏究进展921.西洋参种子休眠解除研究92丄1物理方法解除休眠92.1.2化学方法解除休眠102.2西详参休眠解除过程生理生化机制研究1113本研究的目的和意义2参考文献口第二章外源GA、ABA及其抑制剂对西洋参神子内源激素的影响211材料、试剂212

5、方&21221.1试剂配制方法222.2西洋参种子层积处理及巧率测定2.3内源激素ABA、GA测定方法与取样时间223结果与分析23323.1GA、ABA及其抑制剂对西洋参种子胚率影响3.2植物生长调节剂对内源激素GA、ABA含量的影响244W论26参考文献27第H章西洋参种子休眼解除过程转录组数据分析及相关基因的特异表达研究....291材料、试剂和仪器302施3012.西洋参种子处理方法及取样时间30I32.2转录姐信息挖掘03

6、2.3总RNA提取及反转录22.4设计引物巧2.5内参基因筛选34.26基因特异表达的PCR体系及程序353结果与分析353.1转录组、表达谱数据分析353.2半定量PCR363巧.3巧光定量PCR内参筛选-431.4qRTPCR分析结果4W论51参考文献53第四章西洋参巧G420X和巧基因的克隆与序列分析551西洋参尸基因的克隆与序列分析551155.材料与试剂156.2诚571.3结果与分析2西洋参巧基因的克隆与序列

7、分析612.1材斜与试剂6112巧振612.3结果分析拍3W论64参考文献65±要结论67附录1酶联免疫吸附测定法(EL投A)68附录2植物多糖多齡RNA提取试剂盒操作步骤69附录3反转录步骤70附录4引物表71作誠A75Sttf76II中閑反学科学院北京协和医学院硕±学位论文摘要西洋参为多年生草本植物,具有广泛的药理活性和药用价值。西洋参主要通过。种子繁殖,但种子具有深度休眠的特性,需要温度层积解除休眠目前西洋参种子

8、休眠与萌发的分子机制尚不明确。赤霉素和脱落酸是调控种子休眠与萌发的关键激素。为研究其作用规律,本研究采用6种生长调节剂(赤霉素GA3、赤霉素GA4+7、脱落酸、氛巧厕、多效哇、’‘巧效嗤)处理西洋参种子。阴千种子进行高温20C层积、裂口种子低温4C层积,每隔30d取样计算胚率;在形态休

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