葛根芩连汤对慢性牙周炎合并动脉粥样硬化大鼠模型tnf-α水平的影响

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1、中图分类号：R781论文编号：HBLG2015-112UDC：密级：公开硕士学位论文葛根芩连汤对慢性牙周炎合并动脉粥样硬化大鼠模型TNF-α水平的影响作者姓名：李文娟学科名称：口腔临床医学研究方向：口腔内科学学习单位：华北理工大学学习时间:3年提交日期：2015年5月13日申请学位类别：医学硕士导师姓名：彭伟教授单位：华北理工大学口腔医学院论文评阅人：陈春悠教授单位：唐山市工人医院霍峰教授单位：承德医学院附属医院论文答辩日期：2015年6月6日答辩委员会主席：陈春悠教授关键词：葛根芩连汤；肿瘤坏死因子-α；慢性牙周炎；动脉粥样硬化；大鼠唐山华北理工大学2015年6月EffectofGe

2、genqinlianDecoctiononLevelsofTNF-αinChronicPeriodontitisandAtherosclerosisCompoundModelinRatsDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofMedicinebyLiWenjuan(ClinicalScienceofStomatology)Supervisor:ProfessorPengWeiJune,2015独创性说明

3、本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公

4、开、检索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：□自授予学位之日起；□自年月日起。作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日摘要摘要目的通过建立牙周炎合并动脉粥样硬化大鼠模型，检测肿瘤坏死因子-α（TumorNecrosisFactor-α，TNF-α）水平，应用药物治疗，检测TNF-α水平，分析葛根芩连汤对慢性牙周炎合并动脉粥样硬化模型大鼠治疗效果，为临床治疗提供实验依据。方法46只健康Wistar大鼠，雌鼠和雄鼠各23只，分笼饲养，按体重随机分为两组：正常对照N组8只，正常饲喂，普通饮食、饮水，在剩余大鼠的左上颌第二磨牙牙颈部用0.2mm钢丝结扎，高脂饲料饲喂大鼠

5、并配合药物诱导，用时12w建立慢性牙周炎合并动脉粥样硬化的复合型大鼠模型。12w末，将正常组和模型组大鼠分别随机处死3只，剩余模型组大鼠随机分成5组，并进行处理：空白对照（D0）组灌胃0.9％生理盐水2ml∕kg；甲硝唑（D1）组灌胃甲硝唑0.05g∕kg；阿伐他汀（D2）组灌胃阿伐他汀0.08g∕kg；联合用药（D3）组同时灌胃阿伐他汀0.08g∕kg和甲硝唑0.05g∕kg；葛根芩连汤（D4）组灌胃葛根芩连汤0.42g∕kg，所有动物灌胃体积不超过4ml∕kg，所有动物于12周末开始连续灌胃持续4w至实验结束。于实验12w末和16w末麻醉状态下分别检测各组大鼠牙周各项指标（SBI、

6、PD、AL）、腹主动脉采血后检测血脂各项指标（TC、TG、LDL、HDL）、腹主动脉取血采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清TNF-α水平；将牙周组织、动脉血管组织制作成石蜡切片，一部分切片进行HE染色光镜下观察病理学变化病理切片上测量牙周袋深度（PD）和附着丧失（AL），一部分切片用来做免疫组织化学染色（Immunohistochemistry，IHC），观察TNF-α在牙周组织和腹主动脉中的阳性表达部位，半定量检测TNF-α在牙周组织和腹主动脉中的表达水平。结果1一般情况观察：正常组大鼠饮食活动规律。模型组大鼠饮食明显减少，被毛杂乱，体重下降，牙周组织出现炎症。2

7、HE染色光镜下所见：正常组大鼠牙周组织中骨组织，牙周纤维，牙周膜宽度等无明显改变；血管管壁均匀一致。模型组大鼠牙周组织中大量炎细胞浸润，上皮钉突伸长，牙槽骨不规则吸收，牙周膜宽度增加出现牙周袋；腹主动脉血管内膜增厚，血管壁出现不规则的改变，粗细不一，出现动脉斑块并有脂质沉积。各治疗组炎症减轻，腹主动脉内膜厚度减小，部分血管管壁均匀一致。图像分析软件在病理切片上精确测定牙周探诊深度及附着丧失，模型组牙周探诊深度与附着丧失水平与正常对照组比较差异有