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时间:2019-03-15
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1、学位论文肝脏节律相关基因参与电针调整节律義乱的作用研究searc-RehofLivercircadianreatedenesinvolvedintheeffectofge-lectroacupunctureregulatedthecircadiandisorders寅亚妹指导教师姓名:薛红研究员:硕古专业名称;针灸推拿学申请学位级别论文提交时间:20巧年5月论文答辩时间;2015年5月二〇—五年五月国家自然科学基金‘"吨针对肝癌小鼠生物节律的
2、影响及其表观遗传学机制研究批准号:(81373739)成都中医药大学硕±论文中文摘要目的;研究节律奈乱小鼠自发性活动昼夜节律时相特征及电针干预对其节律的影响作用,并W肝脏为代表,研充电针对外周生物钟基因的影响,探讨肝脏相关基因参与电针调整节律素乱的作用机制。方法:采用成都中医药大学时间生物学实验室自主研发的小动物自发活动自动记录及分析系统及美国aocklab生物节律数据采集分析系统对实验动物自发性活动昼夜节律进行监测和记录。将筛选出的24只C57BL/6J小鼠随机分为
3、空白组、模型组、自然恢复沮和电针组四姐,每组6只动物。按照光暗同步驯L--化(ight:06:0018:00,Dark;18:0006:00)10天,驯化结束后每2天将开灯h-的时间提前8个小时,共10天,之后恢复自然光照(Ligt:06:0018:00,Dark:"-18:0006:00)的方法进巧造模,;造模成功后模型沮处死取材电针组选取肝"""俞灰.215至阳,在ZT16针刺,频率2/15HZ,电流0mA,每次分钟,每天电针1次,连续电针3无而自然恢复组不电针
4、,只捆绑平衡刺激;第H天电针后2h处死动物取材保存待测-Arra。采用实时巧光定量PCRy法检测各组动物肝脏内的生物钟基因的表达水平结果:(1)造模前,各组动物自发性活动昼夜节律的周期、峰相位、总活(P>0M)动度和起始时间点均无统计学差异.,其自发性活动表现出明显近似昼夜节律性。造模后,模型组动物自发性活动昼夜节律周期、峰相位、总活动度和起始活动时间点与空白组比较其差异均具有统计学意义(户。(2)电针后,电针组小鼠自发性活动昼夜节律的峰相位、总活动度和起始时间点差异均具有统
5、计学意义(户<0.〇5);自然恢复组小鼠自发性活动昼夜节律的峰相位差异均具有统计学意义;电针组和自然恢复组小鼠电针前后周期比较其差异均无统计学意义(户>0.〇5)。(3)模型组与空白组相比有10个基因上13127调,个基因下调;自然恢复姐与模型組相比有个基因上调,个基因下调;电针组与模型组相比有14个基因上调,9个基因下调,而在W上所有的基因变化中,电针干预具有优势的节律基因是Bmall、DEC2、Fbxl3和Mtnrla,其中模型组与空白组相比,生物钟基因Email、生物钟调节基因
6、FbxU和诞黑激素抑1成都中医药大学硕止论文制剂Mtnrla的表达上巧,而生物钟基因DEC2的表达下降;电针组与模型组相比,电针组生物钟基因Email、生物钟调节基因Fbxl3和褐黑激素抑制剂Mtnrla的表达下调,而生物钟基因DEC2的表达上调,自然恢复组与模型组比较,自然恢复组的物钟基因Bmall、DEC2、生物钟调节基因Fbx巧和摧黑激素抑制剂Mtnrla的表达不变。一结论:C57BL/6J小鼠造模后,其自发性活动昼夜节律具有定程度的改变,、、、时相特征为周期缩
7、短峰相位超前活动度下降起始时间点提前;电针可W在一定程度上恢复慢性时差小鼠自发性活动昼夜节律,并使峰相位和起始时间点恢复,;但电针后小鼠的活动度下降说明电针不能改变小鼠的活动度下降的趋势;电针对小鼠节律的周期也没有影响;电针对慢性时差小鼠肝脏内生物钟基因Bmall、生物钟调节基因Fbxl3和袍黑激素抑制剂Mtnrla的上调作用和DEC2的一下调作用可能是电针发挥其节律调整作用的分子机制么。关键字:电针节津慢化时差综合征巧化脑和肌肉组织基因1胚胎软骨分化细胞表达基因2泛素化修饰踐基
8、因3被黑激素受体基因12成都中医药大学硕壬论文AbstractObective:theaimofthisstudas化investiatethetimehasecharacteristicsjywgp-oflocomotoractivityrhythmsofcircadiandisordermiceandtheeffectof,-EAllel
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