羟基红花黄色素a缓解烟熏—脂多糖诱发的大鼠慢性阻塞性肺病不同时间损伤的作用

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1、单位代码：10025分类号：R96学号：122012000259密级：CapitalMedicalUniversity硕士学位论文羟基红花黄色素A缓解烟熏-脂多糖诱发的大鼠慢性阻塞性肺病不同时间损伤的作用StudyofHydroxysafflowyellowAoninhibitinginjuryindifferenttimesofchronicobstructivepulmonarydisease申请人：彭园园学科专业：药理学指导教师：金鸣导师单位：首都医科大学附属北京安贞医院完成日期：二○一五年三月首都医科大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究

2、所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日首都医科大学硕士学位论文目录中文摘要……………………………………………………………………………1英文摘要……………………………………………………………………………4前言…………………………………………………………………………………7第一部分动物实验：羟基红花黄色素A缓解烟熏-脂多糖诱发的大鼠慢性阻塞性肺病不同时间损伤的作用一实验材料…

3、…………………………………………………………….9二实验方法………………………………………………………………10三实验结果………………………………………………………………15四讨论……………………………………………………………………25五参考文献………………………………………………………………27第二部分细胞实验：羟基红花黄色素A抑制TGF-β1诱导NIH/3T3细胞活化的作用一实验材料……………………………………………………………….31二实验方法………………………………………………………………33三实验结果………………………………………………………………35四讨论…………………………

4、…………………………………………38五参考文献………………………………………………………………40总结…………………………………………………………………………………44综述…………………………………………………………………………………45附录………………………………………………………………………………….63攻读学位期间发表文章情况………………………………………………………64致谢…………………………………………………………………………………65个人简历…………………………………………………………………………….66首都医科大学硕士学位论文羟基红花黄色素A缓解烟熏-脂多糖诱发的大鼠慢性阻

5、塞性肺病不同时间损伤的作用中文摘要目的慢阻肺(COPD)患病率上升已成严重的公共卫生问题，该病主要机理为肺部慢性炎症，现无理想的治疗药物。羟基红花黄色素A（HSYA）为红花有效成分，预试发现它可抑制COPD大鼠炎症损伤及小鼠肺纤维化与TGF-β1表达上调、抑制TNF-α引发细胞炎症因子表达升高。本课题观察HSYA抑制COPD大鼠肺部炎症信号转导、细胞因子表达异常、炎症损伤及组织重构的药效，探索HSYA缓解烟熏-脂多糖诱发的大鼠慢性阻塞性肺病不同时间损伤的作用和HSYA缓解TGF-β1诱导NIH/3T3细胞的活化作用，探索HSYA缓解COPD慢性炎症和肺纤维化的机制，为开发抗COPD的新药

6、提供依据。方法1.动物实验：以烟熏-脂多糖刺激wistar大鼠建立COPD模型。120只wistar大鼠按体重分层随机分为12组（N=10）：2周正常对照组、2周COPD组、2周COPD+35mg/kgHSYA低剂量组、2周COPD+70mg/kgHSYA高剂量组；3周正常对照组、3周COPD组、3周COPD+35mg/kgHSYA低剂量组、3周COPD+70mg/kgHSYA高剂量组；4周正常对照组、4周COPD组、4周COPD+35mg/kgHSYA低剂量组、4周COPD+70mg/kgHSYA高剂量组。病理切片HE染色在光学显微镜下观察各组大鼠肺组织结构；Masson染色光镜下观察

7、各组大鼠肺组织及微小气管形态改变及胶原沉积情况；用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、IL-1β、IL-6和TGF-β1的蛋白表达水平，用免疫组化的方法来检测各组大鼠肺组织中核因子p65和α-SMA的水平。2.细胞实验：以TGF-β1诱导NIH/3T3细胞的活化为细胞模型，细胞分8组：正常对照组、HSYA对照组、TGF-β1组、TGF-β1+0.5µmol/LHSYA组、-1-首都医科大学