缺铁胁迫下柑橘菌根共生体酚类物质及其关键基因研究

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1、学校代码:10385分类号:研究生学号:1200215009密级:缺铁胁迫下柑橘菌根共生体酚类物质及其关键基因研究StudyonPhenolisandkeyGeneinCitrusMycorrhizalSymbiontunderIrondeficiency作者姓名:李建福指导教师:王明元(副教授)学科:生物化学与分子生物学研究方向:菌根信号物质所在学院:化工学院论文提交日期:二零一五年六月五日学位论文独创性声明本人声明兹呈交的学位论文是本人在导师指导下完成的研究成果。论文写作中不包含其他人已经发

2、表或撰写过的研究内容,如参考他人或集体的科研成果,均在论文中以明确的方式说明。本人依法享有和承担由此论文所产生的权利和责任。论文作者签名:签名日期:学位论文版权使用授权声明本人同意授权华侨大学有权保留并向国家机关或机构送交学位论文的复印件和电子版,允许学位论文被查阅和借阅。本人授权华侨大学可以将本学位论文的全部内容或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。论文作者签名:指导教师签名:签名日期:签名日期:摘要摘要丛枝菌根(ArbuscularMyco

3、rrhizal,AM)真菌是一种古老的球囊菌门真菌,能与70%-90%的陆生植物形成互惠共生体,促进宿主植物对水分和矿质营养的吸收,显著改善植物的营养状况,明显增强植物的抗逆境能力。柑橘根系短、根毛稀少、甚至不生根毛,根系无法接触根际以外大部分的土壤,这成为根系吸收矿质营养的重要限制因子,因此,柑橘很大程度上依赖AM真菌得以维持柑橘的正常的营养水平。柑橘是一类对缺铁(Fe)非常敏感的果树,生产上由于土壤环境等因素频频出现缺Fe现象。柑橘缺Fe可以提高酚类物质的含量,促进Fe的运输。然而,缺Fe胁

4、迫下,AM真菌诱导的酚类物质与Fe营养之间的关系未曾报道。本论文是在缺Fe胁迫条件下,以枳和红橘为供试植株,接种AM真菌地表球囊霉Glomusversiforme(G.versiforme),探讨AM真菌对枳(PoncirustrifoliataL.)和红橘(CitrusreticulateBlanco)根系酚类物质积累与分泌、酚类物质合成关键基因pal1表达的影响;克隆pal1基因及生物信息学分析,以期为AM真菌在柑橘上的利用和柑橘转基因工程育种提供一定的理论依据。本研究获得的主要结果如下:1

5、.以G.versiforme为供试菌剂接种于枳和红橘幼苗上进行盆栽沙培试验,比较枳和红橘根系菌根侵染状况。结果表明,缺Fe和正常供Fe处理组的枳根系侵染率分别为29.0%和37.5%,菌丝密度分别为2.2±0.3m·g-1和1.6±0.1m·g-1;缺Fe和正常供Fe处理组的红橘根系侵染率分别为39.5%和41.2%,根际菌丝密度分别为4.1±0.4m·g-1和3.6±0.1m·g-1。2.接种G.versiforme显著促进了枳和红橘植株的生长发育。在正常供Fe条件下,接种处理组枳和红橘植株地

6、上部分生物量、地下部分生物量及总生物量分别为0.58±0.05gDW/株、0.25±0.04gDW/株、0.83±0.08gDW/株和1.18±0.02gDW/株、0.55±0.03gDW/株、1.73±0.08gDW/株;在缺Fe条件下,接种处理组枳和红橘植株地上部分生物量、地下部分生物量及总生物量分别为0.37±0.01gDW/株、0.21±0.05gDW/株、0.58±0.03gDW/株和1.03±0.01gDW/株、0.47±0.05gDW/株、1.50±0.03gDW/株,均显著高于对

7、照组。3.接种G.versiforme显著提高了枳和红橘植株根系高铁还原酶(FCR)和苯I华侨大学硕士学位论文丙氨酸解氨酶(PAL)的活性。在正常供Fe条件下,枳根系接种处理组FCR和PAL的活性分别为10.47μmol·g-1h-1和120.80U·g-1FW,较未接种的分别提高了109.0%和20.8%;红橘根系接种处理组FCR和PAL的活性分别为10.32μmol·g-1h-1和167.40U·g-1FW,较未接种的分别提高了84.0%和35.4%。在缺Fe条件下,枳根系接种处理组FCR和

8、PAL的活性分别为17.63μmol·g-1h-1和138.0U·g-1FW,较未接种的分别提高了132.0%和27.3%;红橘根系接种处理组FCR和PAL的活性分别为11.32μmol·g-1h-1和296.80U·g-1FW,较未接种的分别提高了52.0%和106.9%。4.接种G.versiforme显著增加了枳和红橘植株根系分泌物总酚的含量。在正常供Fe条件下,枳和红橘根系接种处理组的总酚含量较未接种的分别提高了49.3%和91.8%;在缺Fe条件下,枳和红橘根系接种处理组的总酚含量较未

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