滤膜富集—光镜检验硅藻技术的建立及其法医学应用

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1、分类号密级ＵＤＣ编号／，似Ｉ似爹硕壬学位论文滤膜富集－光镜检验珪藻技术的建立及其法医学应用Ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔａｎｄｆｏｒｅｎｓｉｃａｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｄｉａｔｏｍ把巧ｂａｓｅｄｏｎｐｐｐｍｅｍｂｒａｎｅｆｉｌｔｅｒｉｎｇａｎｄｌｉｇｈｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ王玉仲导师姓名刘超专业名称法医学培养类型学术型论文提交日期２０１５年３月２２日南方医科大学２０１２级硕击

2、学位论文滤膜富集－光镜检验娃藻技术的建立及其法医学应用Ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔａｎｄｆｏｒｅｎｓｉｃａｌｉｃａ枯ｏｎｏｆｄｉａｔｏｍｔｅｓｔｐｐｐｂａｓｅｄｏｎｍｅｍｂｒａｎｅｆｉｌｔｅｒｉｎａｎｄｌｉｇｈｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅｇｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ课题来源：公安部重点研究计划项目口ＯＩＯＺＤＹＪＧＤＳＴＯＩ７）公安部科技强警基础工作专项巧目（２０１４ＧＡＢＪＣ０２０）学位申请人王玉仲导师姓違刘超专业若称法医学？培养类型

3、学术型培养层次全日制硕去所在学院基础医学晓２０１５年３月２２日广州硕去学位论文滤膜富集－光镜检验枉藻技术的建立及其法医学应用硕古研究生：王玉仲指导教师：刘超教授摘要目的：溺死（ｄｒｏｗｎｉｎｇ）是由于液体机械性地阻塞呼吸道及肺泡，阻碍气体交换，使机体缺氧，二氧化碳雜留，导致其窒息死亡。我国沿海、沿江地区溺死。的案件相对较多，水中尸体检验是法医工作中的重要内容实际检案中，水中，尸体死因多为溺死，但存在抛尸入水伪装成溺死的可能因此水中尸体可能与

4、。刑事案件相关，必须进行法医学鉴定溺水尸体可呈现出特有的病理征象，如一口、鼻部章样泡沫，水性肺气肿，支气管内异物等。然而对于些溺死病理不典型的尸体或是高度腐败的尸体，，由于各种病理征象已不复存在常需借助其它检验技术辅助鉴定溺死。溺死的辅助诊断方法有很多，，但其或缺乏特异性或受尸体腐败等因素的影响，或者理论、技术不成熟等，使这些方法难Ｗ应用于法医溺死诊断。溺水过程中，机体剧烈呼吸使溺液中的珪藻通过肺泡毛细血管屏障进入血管，随血液循环进入全身各个脏器，加之娃藻分布广泛和良好的

5、抗酸性和耐腐蚀性使的珪藻检验对辅助鉴定溺死具有较强的优势。目前，珪藻检验被认为是水中尸体尤其是腐败尸体溺死诊断较为可靠的证据。法医学挂藻检验实践中，主要由Ｈ个过程组成：消解、富集和观察。法医学者研究的珪藻检验方法多只针对消解过程进行优化，而忽略了将Ｈ个过程均进行优化一，他们在实际应用时存在些问题，如传统的强酸消解法消解程序简单，成本低廉，但存在富集效率较低，灵敏度低的问题；使用扫描电镜观察桂Ｉ摘要藻分辨率高，珪藻观察清晰，种类鉴定容易，但其成本较高，使其应用范围受

6、一种珪藻检出率高到限制。本课题旨在建立、操作简单、安全，对设备要求不窩，检验成本低的珪藻检验方法，使其在裡藻检验过程中获得良好效果，并为基层法医学实验室提供一种合适的珪藻检验方法。、方法：方法建立：分别使用醇类醇类、酸类、苯类、Ｔ香酷、树脂类等ＰＥＳ）？）试剂与水系滤膜（聚趟讽（材料、有机系滤膜（尼龙材料）和核孔滤膜一（有机化合物材料）相互反应，探索建立种基于滤膜富集和光学显微镜检测。脏器及水样内旌藻的新方法，并对该法的操作步骤进行优化动物实验：１０只新西兰大白兔耳缘静

7、脉注射过量麻醉剂处死后提取肾脏待检５００ｍｌ。－－；广州市区段珠江水样实验样本随机分为强酸消解离也富集光镜检验法组－－－（Ａ组）、微波消解滤膜富集扫描电镜联用法姐（Ｂ组）、微波销解滤－Ｃ组２０－膜富集光镜检验法组（），每组份样本；Ｈ组样本分别采用强酸消解－离也富集－光镜检验法－（方法Ａ）、微波消解滤膜富集扫描电镜联用法（方法Ｂ）－－Ｃ微波消解滤膜富集光镜检验法（方法）处理。观察指标为样本前处理时间、组织消解程度、桂藻总回收率、各珪藻种类回收率、应用效果。０尸体样本：收集２０

8、１３年２月至２０１３年１月广州市水中尸体５６例，其中明确溺死的尸体３０例、明确死因为死后拋尸入水的尸体２６例，并收集同时段广州市区陆地死ｔ的尸体３０例。取上述案例尸体的肺、肝、肾组织和对照水样－－－－并分别采用强酸消解离也富集光镜检验法（方法Ａ）、微波消解滤膜富集扫－滤膜富集－光镜检验法描电镜联用法（方法Ｂ）和微波消解（方法Ｃ）进行撞藻检验。观察指标为娃藻检出情况、样本前处理时间、观察效果和结果比对。结果：方法建立：经使用７类试剂