梨花粉管液泡的提取及cpa和tpc1基因对花粉管生长的调控

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1、%分类号学号邏师為请泉建乂每博±学位论文梨花粉管液泡的提取及OM和rPC7基因对花粉管生长的调控周宏胜指导教师张绍铃教授专业名務果树学研究方向果树发育生物学答辩日期二〇—五年十一月ISOLATIONOFVACUOLESFROMPOLLENTUBESOFPE乂RANDFUNCTIONAL乂NALY別SOFC/MANDr户GENESINREGULATINGPOLLENTUBEGROWTHbyZhouHonshenggTh

2、eDissertationSubmittedtoNaninAriculturalUniversitjggyInPartialFulfillmentof化eRequirementsForPh.DDereegSupervisedbyProf.ZhangShaolingCompletedin.,2015Commencementin.2015,原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容

3、外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中W明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。^学位论文作者:月日(需亲笔)签名兴攻年学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留。并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被査阅和借闻本人授权南京农业大学可W将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文?

4、保密□,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。_""(请在W上方框内打V)0学位论文作者(需亲笔)签名:间名M年f/月聋日导师I。(需亲笔)签名年/月多日^日录目录巧要IABSTRACTIllmmmv一第章文献综述111.1植物衰老和死亡的研究1丄1植物衰老概化11.1.2植物细胞死亡的研究进展312花粉管生长发.育转录姐分析61.2.1高通量测序技术的发展71.2.2花粉转录组研究进展813液泡离子转运蛋白和离子通道研究进展

5、10..131液泡巧转运蛋白和通道10++..132液泡Na/K转运蛋白和通道121.3.3液泡阴离子转运蛋白和通道121.4本研究的目的与意义口第二章梨花粉管发育过程中信号分子及细化器的变化152.1材料与方法162丄1实验材料162丄2花粉培养与活力的检测162丄3梨花粉巧液泡的提取162丄4花粉管巧性氧(ROS)的检测172丄5梨花粉管巧窝子含量的测定172丄6液泡pH的测定18-2丄7FM464标记梨花粉管囊泡182丄8梨花粉管液

6、泡超微结构的观察182丄9梨花粉管核DNA降解的观察1821.2结果与分析9I梨花粉管液泡的提取及和r巧。基因对花粉管生长的调控2.21.花粉管体外生长过程中的发育特性192.2.2花粉管液泡的提取和纯化192.2.3花粉管发育过程中液泡体积和数量的变化212+2+2.2.4花粉管胞质Ca含量变化及Ca含量对花粉管的影响222.2.5花粉管胞质活性氧含量变化及活性氧对花粉管生长的影响23.2.62花粉管胞内囊泡的分布252.2.7花粉管内细胞核降解倩况

7、2522H的变..8花粉管内液泡p化262.2.9花粉管内液泡结构的变化272.3讨论27第;章梨花巧管发育过程表达谱研究..."313.1材輯骑法323丄1实验材料323.1.2花粉离体培养与活为的测定323RNA提.1.3取32一314cDNA第..链的合成巧3丄5测序实验巧3丄6数据分析343丄7RT-PCR)验证差异基因实时炎光定量PCR(q353.2结果与分析363.2.1四个阶段花粉状态的确定363

8、.2.2RNA的提取及质量检测37‘’3.2.3场山骄梨花粉萌发和花粉管生长过程测序结果统计373.2.4梨花粉管生长过程中基因表达情况及差异基因的筛选393.2.5所有基因和差异表达的基因的主要生物学功能413.2.6差异基因表

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