渔用益生菌发酵工艺研究

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1、学校编码10390分类号S963学号201312951005密级农业推广硕士专业学位论文渔用益生菌发酵工艺研究指导教师:鄢庆枇教授陈国生高级工程师作者姓名:黄颖渟申请学位级别:硕士领域名称:渔业论文提交日期:2015年4月7日论文答辩日期:2015年6月13日学位授予单位:集美大学学位授予日期:2015年6月答辩委员会主席:苏永全教授论文评阅人:欧阳明安研究员毛相朝教授华雪铭副教授农业推广硕士专业学位论文渔用益生菌发酵工艺研究StudiesonFermentationTechnologyofAquacultureProbi

2、otics作者姓名:黄颖渟指导教师:鄢庆枇教授陈国生高级工程师领域名称:渔业学位授予单位:集美大学论文答辩日期:2015年6月13日学术诚信声明兹呈交的学位论文,是本人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究成果。除文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中+包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。木人依法享有和承担由此论又产生的权利和责任。声明人(签名时间:‘L保护知识产权声明本人完全了解集美大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制

3、手段保存、汇编学位论文。同意柒美大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。•作导时者师间/V签签名«**•/V名

4、/“•«渔用益生菌发酵工艺研究摘要自20世纪80年代以来,我国水产养殖业迅猛发展,已从过去的粗放式养殖转变为集约化、高密度养殖。养殖户由于盲目地追求经济利益,养殖密度过大,水体持续恶化,导致疾病爆发。在对待疾病问题上,养殖户还是使用大量的抗生素类药物,不仅使病原菌产生耐药性,而且水产品的药物残留也会对人体产生危害。近年来,利用益生菌作为饲料添加剂和水质改良剂以实现健康养殖和高产增收,已

5、初见成效。益生菌制剂也极有可能取代抗生素类药物,成为新型、绿色的水产动物保健品。随着对渔用益生菌作用机理研究的不断深入,各类具有益生效果的菌种也不断被发现,利用这些菌种进行发酵培养,摸索最适合的生产工艺也成为渔用益生菌研究的一个新方向。本研究首先在500ml摇瓶条件下,选取从养殖水体中分离出的枯草芽孢杆菌B1884株和好氧反硝化细菌A762株为实验菌株,以农产品加工下角料和常见无机盐为实验原料,通过单因素试验筛选出最适宜两株菌生长的碳源、氮源和无机盐,并通过正交设计试验对碳氮源及无机盐的配比进行优化,以确定两株菌的发酵培养

6、基。单因素实验结果表明:枯草芽孢杆菌1884株最优碳源为麸皮,最优氮源为花生粕,最优无机盐为KH2PO4,好氧反硝化细菌最优碳源为糖蜜,最优氮源为花生粕,最优无机盐为Na2HPO4。正交试验结果表明:枯草芽孢杆菌培养基成分的最优配比为(g/L):麸皮5,花生粕15,KH2PO410;好氧反硝化细菌培养基成分的最优配比为(g/L):糖蜜15,花生粕20,Na2HPO410。在培养基成分及配比确定后,在500ml摇瓶条件下对温度、初始pH、初始接种量、装液量、摇床转速这些发酵条件进行摸索,最终确定最优的发酵条件如下:枯草芽孢杆

7、菌B1884:培养温度38℃,初始pH为7.0,初始接种量3%,装液量150ml,摇床转速220r/min;好氧反硝化细菌A762:培养温度28℃,初始pH为6.5,初始接种量5%,装液量150ml,摇床转速300r/min。经培养基与发酵条件优化后,枯草芽孢杆菌B1884在摇瓶培109养条件下培养48h,菌浓度达到1.11×10CFU/ml,芽孢数量达到9.33×10CFU/ml,芽10孢产率为84.05%。好氧反硝化细菌A762在摇瓶条件下培养96h菌浓度达到1.28×10CFU/ml。经摇瓶条件下优化发酵培养基和发酵

8、条件后,采用5L发酵罐进行小试以验证优化体10系的可行性,枯草芽孢杆菌B1884株发酵24h菌浓度达到7.95×10CFU/ml,芽孢数量I10达到7.12×10CFU/ml,芽孢产率为89.6%,好氧反硝化细菌A762发酵培养36h菌浓度10达到3.91×10CFU/ml。以上结果表明,发酵罐较摇瓶具有放大作用,具有一定的生产价值。关键词:渔用益生菌;枯草芽孢杆菌;好氧反硝化细菌;发酵工艺;优化IIStudiesonFermentationTechnologyofAquacultureProbioticsAbstract

9、Sincethe1980s,withtherapiddevelopmentofaquaculture,whichcoursesthemodelofaquaculturehaschangedfromtheextensivefarmingintointensiveandhigh-densityculture

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