新烟碱类杀虫剂对蚯蚓毒性及作用机制研究

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1、分类号：单位代码：密级学号：博士学位论文新烟碱类杀虫剂对蚯蚓毒性及作用机制研究研究生：王凯指导教师：王成菊教授申请学位门类级别：理学博士专业名称：农药学研究方向：农药毒理与使用技术原理所在学院：理学院年月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研宄生签名时间：如石月关于论文使用授权的说明本人

2、完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研宂生签名时间：月日导师签名时间：上丨年《月（日中国农业大学溥士学位论文摘要摘要新烟碱类杀虫剂具有独特的作用机制，其作用靶点为乙酰胆碱受体，可有效防治同翅目、鞘翅目、双翅目，鳞翅目等害虫，具有良好的杀卵、杀幼虫活性，既可用于茎叶处理、也可用于土壤、种子处理，而且与有机磷、氨基甲酸酯和拟除虫菊酯

3、类等杀虫剂不存在交互抗性。新烟碱类杀虫剂一般对鸟类、鱼类、哺乳动物毒性低，但是对蚯蚓和蜜蜂都有较高的毒性。蚯蚓作为土壤生态系统中一种重要动物，是生态环境安全评价的一个重要指标。本论文结合了形态学、生物化学和分子生物学手段，研宄了六种新烟碱类杀虫剂对蚯蚓的影响，从而揭示其毒性机制，为新农药的创制、科学使用及新烟碱类农药安全评价提供科技支撑：新烟碱类杀虫剂对蚯蚓急性毒性和慢性毒性釆用人工土壤法测定了吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺、噻虫胺、噻虫啉和戊吡虫胍对蚯蚓的急性毒性，。值分别为、、、、和，急性毒性试验结果表明，吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺、噻虫胺、噻虫啉对蚯蚓为高毒，戊吡虫胍为

4、低毒，其中噻虫胺毒性最高；生殖毒性结果显示，蚓茧半数孵化率分别为、、、、、产苗量、产苗数、苗重都明显低于对照；试验结果表明，戊啦虫胍对蚯蚓生殖影响最小，而其他几种农药对生殖影响较大；六种新烟生长发育试验结果显示这六种新烟碱类农药对蚯蚓体重都有不同程度的影响，随着时间的延长，其影响逐渐增强。新烟碱类杀虫剂对蚯蚓乙酰胆碱酯酶（、超氧化歧化酶（和过氧化氢酶的影响蚯蚓暴露于不同浓度新烟碱类杀虫剂中】天。分别在暴露后和时测定三种酶的活性。试验结果表明，六种新烟碱类杀虫药剂除噻虫胺外，在暴露前期都对表现出显著抑制，吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺和噻虫啉处理，蚯蚓体内的的活性显著下降；同

5、时新烟碱类杀虫剂对蚯蚓和表现出显著激活作用，但随着暴露时间的延长，酶活恢复至对照水平。蚯蚓暴露含有戊吡虫胍的人工土壤中，和活性先上升后下降暴露丨恢复至对照水平；当戊吡虫胍浓度和丨蚯蚓在暴露后，活性下降。新烟碱类杀虫剂对蚯蚓损伤作用中国农业大学博士学位论文摘要采用人工土壤法对蚯蚓进行药剂处理，通过单细胞凝胶电泳技术（研究吡虫啉、噻虫啉和戊吡虫胍三种新烟碱类杀虫剂对蚯蚓体腔细胞的损伤。结果显示：吡虫啉、噻虫啉处理蚯蚓后，尾距、尾部百分含量和尾长随暴露剂量的增加逐渐加强，呈现良好的剂量一效应关系；而戊吡虫胍在下对蚯蚓体腔细胞没有影响。新烟碱类杀虫剂对蚯蚓、和基因表达量的影响

6、为进一步研宂新烟碱类杀虫剂对蚯蚓相关酶的影响，将蚯蚓暴露于的人工土壤中。分别在暴露后、、和天时检测与、和相关的个基因的表达水平。基因表达结果发现，蚯蚓暴露天、天、天和天时，和神经系统有关的乙酰胆碱酯酶相关基因、和均表现出显著下降通道有关的基因暴露天和天后表现出显著下降；信号传导相关基因在天和天表现出显著地上调。但是随着暴露时间延长，其下调作用逐渐减弱；和相关的基因表现出明显上调，暴露天和天后基因表现出明显上调，其中烯啶虫胺对基因的表达量在天时影响最明显；不同新烟碱类农药在不同的暴露时间均导致基因的表达量的上调，其中，戊吡虫胍对基因表达量的影响最为明显。新烟碱类杀虫剂对

7、蚯蚓组织损伤作用将蚯蚓暴露在不同浓度的吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺、噻虫胺、噻虫啉和戊吡虫胍人工土壤中通过组织切片电镜观察研宄新烟碱类杀虫剂对蚯蚓表皮和中肠细胞的影响。结果显示，吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺、噻虫胺和噻虫啉对蚯蚓表皮产生了一定的损伤。相比于其他几种农药，啶虫脒对表皮和中肠的影响最为明显，在时就己经出现病变，在时，表皮和中肠细胞就己经出现裂解情况。同时戊吡虫胍对蚯蚓的表皮和中肠的影响相对较弱，在时表皮和中肠才出现病变。关键词：新烟碱类农药，蚯蚓，急慢性毒性，氧化应激，损伤，基因表达，组织损伤中农业大学溥士学位论文，，，，、、、、，‘、——中国农