新农1号狗牙根再生体系优化及ems诱变研究

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1、巧-0758S543.91:分类号:学校代码口34020198:密没:公开学号硕±学位论文新农1号狗牙根再生体系优化及EMS诱变硏究Eh—studonReeneratStimizationandtlmethlyionstemOpyygysulfoneMutationof砂如w舶c沙(L.)Perscv.XinnongNo.l研究生姓笔刘莉导师姓名及职称李培英教授合作导师姓名及职称学位口类穀别农学硕去专业秦称

2、草学研究方向草坪草育种所在学晓草业与环境科学学院新疆?乌鲁木齐二〇—五年五月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究-X作及取得。,论文中的研究成果尽我所知,除了文中特别加臥标注和致谢的地方外不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得新疆农业大^学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。—A时间。:三5年^月H研究生签名:3驾/关于

3、学位论文使用授权的说明本人完全了解新疆农业大学有关保罰、使用学位论义的规定,即:新疆农业大学有权保留化向国家巧关部口或机构送交论文的复印件和化子文L、等复、文,允许论缩制手段保存汇编学位论,印印或描可U采用影扫档学位的全部或部分内业火论文容编。本人授化农学将文被楚阀和借新疆阅。论义的全部或部分内容,可(包巧刊尝)行检从公布入有关数扼巧进索此议的学位论文在解密后应遵守协密)(保5/:时间:州月曰名年巧叫饼生签荀y〇:円间三年月名:时^22导师签巧木^、弄I本

4、文是新疆维吾尔自治区科技厅高新技术项目“优质抗旱耐盐禾草新品种选育”(项目编号:201111122)新疆草地资源与生态自治区重点实验室开放课题“新农1号狗牙根胚性愈伤获得及维持研究”(项目编号:XJDX0209-2013-01)的部分研究成果课题主持人:李培英教授(新疆农业大学)新农1号狗牙根再生体系优化及EMS诱变研究摘要狗牙根(Condondactylon)是我国分布广泛、应用较多的暖季型草坪草之一。目前,市场上应用的狗牙根品种主要依赖国外进口,国内狗牙根育种工作相对滞后,因此国家提倡大力开

5、发本土野生资源,利用传统育种结合生物技术方法选育狗牙根新品种,满足市场需求,促进我国草坪业健康发展。在狗牙根生物技术育种方面,目前进展较缓慢,其技术瓶颈在于再生体系建立的难度较大,胚性愈伤组织得率较低、且难以分化;另外目前国内还未见利用EMS诱变狗牙根的相关报道,因此本研究拟在已有研究基础上以新农1号狗牙根成熟颖果为材料,通过正交法探讨激素、外源添加物等对狗牙根愈伤诱导、胚性愈伤获得及长时间胚性维持的影响,优化新农1号狗牙根再生体系;在此基础上,探讨狗牙根离体培养结合EMS诱变的技术体系,为狗牙

6、根生物技术育种奠定基础。试验结果如下:(1)对新农1号狗牙根愈伤组织诱导而言,各因子影响程度为2,4-D>6-BA>脯氨酸;优化诱导培养基为添加2,4-D(2.0mg/L)+6-BA(0.01mg/L)+脯氨酸(200mg/L)的MS培养基,此时愈伤诱导率达69.5%;对继代增殖而言,各因子对胚性愈伤诱导率、愈伤增殖率、褐化率的影响程度不同,对胚性愈伤诱导率的影响程度为2,4-D>ABA>6-BA,对愈伤增殖率的影响程度为6-BA>ABA>2,4-D,对褐化率的影响程度为2,4-D>6-BA>A

7、BA。综合3个指标结果认为,新农1号狗牙根愈伤继代的优化培养基为2,4-D(2.0mg/L)+6-BA(0.20mg/L)+ABA(2.0mg/L)的MS培养基,其胚性愈伤率和愈伤增殖率分别可达71.67%和61.67%,且褐化率较低;对分化而言,优化的分化培养基为MS+6-BA(1.0mg/L),小植株形成强度可达49.44%。(2)对新农1号狗牙根胚性维持而言,2,4-D、6-BA及CuSO4对胚性愈伤增殖率、褐化率、小植株形成强度的影响程度不同,3种因素对胚性愈伤增殖率的影响为CuSO4>

8、2,4-D>6-BA,对褐化率的影响为2,4-D>CuSO4>6-BA,对小植株形成强度的影响为2,4-D>CuSO4>6-BA;进一步对培养基类型进行试验表明交替培养基的小植株形成强度要优于单一培养基。综合胚性维持正交试验及交替培养基的单因素试验结果,认为胚性维持的最佳培养基为2,4-D(1.0mg/L)+6-BA(1.0mg/L)+CuSO4(3.0mg/L)的MS-N6交替培养基,其胚性愈伤增殖率达52.22%,小植株形成强度为53.33%,且褐化率较低。-I-(3)利用不同EMS浓度和不

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