播娘蒿对苯磺隆抗性水平差异机理研究

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1、分类号：单位代码：密级学号：学位论文播娘蒿对苯磺隆抗性水平差异机理研究研究生：许贤指导教师：倪汉文教授作指导教师：串请学位类农学博士专业领域名称：植物检疫与农业生态健康研究方向：农田杂草防治所在学院：农学与生物技术学院年月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中已经注明引用和致谢的内容外，论文中不包含本人和其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。

2、学位论文作者签名：时间：年月丨曰关于学位论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定。本人同意中国农业大学有权保存及向国家有关部门和机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人同意中国农业大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》或《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。保密的学位论文在解密后应遵守此协议）学位论文作者签名：时间：年（月导师签名：时间：年月摘要播娘蒿是小麦田常见恶性杂草之一，己经对常用乙酰乳酸合成酶（抑制剂类除草剂苯磺隆产生了抗药性。目前研究表

3、明，播娘蒿的位氨基酸由脯氨酸（突变为丝氨酸（、苏氨酸（、丙氨酸（、组氨酸（、亮氨酸（和酪氨酸（及相对活性增高是造成其对苯磺隆产生抗性的原因。本研究发现，播娘蒿对苯磺隆的抗性水平存在显著差异，关于这种差异产生的机理还没有相关报道。本研究从保守区氨基酸突变情况、基因拷贝数、儿基因表达量的大小、相对活性大小、及谷胱甘肽硫转移酶（活性大小等方面来研宂播娘蒿对苯磺隆抗性水平差异产生的机理。主要研宄结果如下：、根据釆集的播娘蒿种群对苯磺隆的抗性水平的预试盆栽实验结果，从个播娘蒿种群中挑选出个不同抗性水平的种群，采用单株套袋方式进行繁种，测定单株繁种后代对苯磺隆

4、的抗性水平。测定结果表明，单株繁种的后代群体对苯磺隆的反应一致，而不同抗性种群对苯磺隆的抗性水平存在差异。、检测到播娘蒿位由缬氨酸（突变为了、位由突变为了、、、位由精氨酸（突变为了、位由蛋氨酸（突变为了、位由天冬氨酸（突变为了谷氨酸（，位的由色氨酸（突变为了或，上述氨基酸突变位点与播娘蒿对苯磺隆的抗性产生有关，其中位与位氨基酸突变需进一步验证，位氨基酸突变首次在抗性杂草中发现，位和位氨基酸突变首次在抗性播娘蒿体内发现，由突变为首次在抗性杂草中发现。、釆用杂交法及结合基因同源克隆结果，初步确定播娘蒿体内基因有个拷贝，编码区长度分别为和，在抗性种群中只

5、检测到其中之一发生突变与播娘蒿对苯磺隆的抗性产生有关。、米用荧光定量技术，经、和个统计软件进行数据分析，成功开发了、和三个适用于研究播娘蒿基因表达水平变化的内参基因。、播娘蒿对苯磺隆的抗性水平与突变位点、突变氨基酸数量、相对活性大小有关与活性及力基因表达量无关；当位或在保守区发生双突变时，其抗性水平较高，抗性倍数均在以上；而当位突变为或或位突变为时，抗性水平低于突变或发生双突变的种群；发生突变的播娘蒿种群的抗性水平有大有小，且抗性水平大小与相对活性大小呈正相关；没有发生突变的抗性种群，播娘蒿的抗性水平大小同样与相对活性大小呈正相关。关键词：播娘蒿；

6、苯磺隆；相对活性；活性；基因表达量AbstractFlixweed{Descurainiasophia),oneofthemalignantweedsinwheatfield,hasevolvedresistanttotribenuronthatbelongstoacetolactatesynthase(ALS)inhibitorherbicides.Thereportedstudiesshowedthatthemechanismsofflixweedevolvedresistancetotribenuronwereduetomutationsof

7、the197thaminoacidinALSofflixweed,whichmutatedfromproline(P)toserine(S),threonine(T),alanine(A),histidine(H),leucine(L)，】tribenuron-resistantindexofdiferentflixweedpopulationwaspositivelyrelatedtoALSrelativeactivitynomatterwheatherthepopulationhadmutationsornotinALS.KeyWords:Fl

8、ixweed;tribenuron,ALSrelativeactivity;GSTsactivity;ALSexpress